HS-5

Az HS-5 sejtvonal egy emberi csontvelőből származó mezenchimális stromális sejt (MSC) modell, amelyet gyakran használnak a stromális sejtek vérképzésben és a rák kialakulásában betöltött támogató szerepének vizsgálatára. Az eredetileg az E6 és E7 humán papillomavírus-gének segítségével izolált és immortilizált HS-5 sejtek fibroblaszt-szerű morfológiát mutatnak, és arról ismertek, hogy a vérképző és immunsejtek közötti kölcsönhatások szempontjából kulcsfontosságú citokinek és növekedési faktorok széles skáláját szekretálják. A kiemelt szekretált faktorok közé tartozik többek között a granulocita-kolóniát stimuláló faktor (G-CSF), a granulocita-makrofág kolóniát stimuláló faktor (GM-CSF), a makrofág-CSF (M-CSF), az őssejt-faktor (SCF), az interleukin-6 (IL-6), az IL-8 és az IL-11, többek között. Ezek a szekréciók lehetővé teszik az HS-5 sejtek számára, hogy in vitro körülmények között, akár szérummentes körülmények között is fenntartsák a vérképző őssejtek növekedését és szaporodását, ami kiemeli funkcionális hasonlóságukat az elsődleges MSC-kkel a vérképzés támogatásában.

Az onkológiai kutatásban a HS-5 sejtek modellként szolgálnak az MSC-k és a ráksejtek közötti kölcsönhatások vizsgálatához, különösen a tumor mikrokörnyezete által közvetített ráksejt-túlélés, az immunmoduláció és a gyógyszerrezisztencia tanulmányozásában. Tanulmányok kimutatták, hogy a HS-5 sejtek képesek megvédeni az akut mieloid leukémia (AML) sejteit a citarabin (Ara-C) és a daunomicin (DNR) típusú kemoterápiás szerek által kiváltott apoptózistól, valószínűleg a citokin-jelátvitelben és a közvetlen sejt-sejt kölcsönhatásokban részt vevő mechanizmusok révén. Az HS-5 sejtek ezen védő hatása fokozza az AML-sejtek szaporodását és csökkenti a kemoterápia hatékonyságát, így ez a sejtvonal értékes eszközzé válik a csontvelői mikrokörnyezetben kialakuló gyógyszerrezisztencia modellezéséhez. Ezen felül az HS-5 sejtek olyan MSC-markereket fejeznek ki, mint a CD73, a CD90 és a CD105, bár ezek expressziós szintjei eltérhetnek az elsődleges MSC-kétől.

Ezen felül az HS-5 sejteket új terápiás megközelítések feltárására is használták, például a tiszta grafénhez hasonló nanomateriálisok citotoxikus hatásainak vizsgálatára. Kimutatták, hogy a HS-5-sejtek grafénnel való expozíciója mitokondriális diszfunkciót és oxidatív stresszt vált ki, ami a reaktív oxigénszármazékok (ROS) fokozott termelése és a mitokondriális membránpotenciál zavara révén apoptózishoz vezet, így modellként szolgál a nanorészecskék toxicitásának és terápiás potenciáljának értékeléséhez a tumor mikrokörnyezeten belüli stromális sejtekkel való kölcsönhatások során.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban