HS-5

Celična linija HS-5 je model mezenskih stromalnih celic (MSC), pridobljenih iz človeškega kostnega mozga, ki se pogosto uporablja za preučevanje podporne vloge stromalnih celic pri hematopoiezi in razvoju raka. Celice HS-5, ki so bile prvotno izolirane in imortalizirane z uporabo genov E6 in E7 človeškega papilomavirusa, imajo morfologijo, podobno fibroblastom, in so znane po izločanju širokega spektra citokinov in rastnih faktorjev, ki so ključni za interakcije med hematopoetskimi in imunskimi celicami. Med pomembnejšimi izločanimi faktorji so med drugim faktor, ki stimulira kolonije granulocitov (G-CSF), faktor, ki stimulira kolonije granulocitov in makrofagov (GM-CSF), makrofag-CSF (M-CSF), faktor matičnih celic (SCF), interleukin-6 (IL-6), IL-8 in IL-11 ter druge. Ti izločki omogočajo celicam HS-5, da in vitro ohranjajo rast in proliferacijo hematopoetskih progenitornih celic, celo v pogojih brez seruma, kar poudarja njihovo funkcionalno podobnost s primarnimi MSC pri podpori hematopoze.

V onkoloških raziskavah celice HS-5 služijo kot model za preučevanje interakcij med MSC in rakavimi celicami, zlasti pri raziskovanju preživetja rakavih celic, ki ga posreduje mikrookolje tumorja, imunomodulacije in odpornosti na zdravila. Študije so pokazale, da lahko celice HS-5 ščitijo celice akutne mieloidne levkemije (AML) pred apoptozo, ki jo povzročajo kemoterapevtska zdravila, kot sta citarabin (Ara-C) in daunomicin (DNR), verjetno prek mehanizmov, ki vključujejo signalizacijo citokinov in neposredne medcelične interakcije. Ta zaščitni učinek celic HS-5 pospešuje proliferacijo celic AML in zmanjšuje učinkovitost kemoterapije, zaradi česar je ta celična linija dragoceno orodje za modeliranje odpornosti na zdravila v mikrookolju kostnega mozga. Poleg tega celice HS-5 izražajo markerje MSC, kot so CD73, CD90 in CD105, čeprav se njihove ravni izražanja lahko razlikujejo v primerjavi s primarnimi MSC.

Poleg tega so se celice HS-5 uporabljale za raziskovanje novih terapevtskih pristopov, kot je preizkušanje citotoksičnih učinkov nanomaterialov, na primer neprečiščenega grafena. Pokazalo se je, da izpostavljenost grafenu v celicah HS-5 povzroča mitohondrijsko disfunkcijo in oksidativni stres, kar vodi v apoptozo prek povečane produkcije reaktivnih kisikovih spojin (ROS) in motenega mitohondrijskega membranskega potenciala, s čimer služi kot model za ocenjevanje toksičnosti nanodelcev in terapevtskega potenciala v interakcijah stromalnih celic znotraj mikrookolja tumorja.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo