HS-5

HS-5 šūnu līnija ir no cilvēka kaulu smadzenēm iegūts mezenhīmālo stromas šūnu (MSC) modelis, ko parasti izmanto, lai pētītu stromas šūnu atbalstošo lomu asinsveidošanā un vēža attīstībā. Sākotnēji izdalītas un imortalizētas, izmantojot cilvēka papilomas vīrusa E6 un E7 gēnus, HS-5 šūnas uzrāda fibroblastu līdzīgu morfoloģiju un ir pazīstamas ar to, ka izdalīta plašu citokīnu un augšanas faktoru klāstu, kas ir būtiski asinsveidojošo un imūno šūnu mijiedarbībai. Nozīmīgākie izdalītie faktori ietver, cita starpā, granulocītu koloniju stimulējošo faktoru (G-CSF), granulocītu-makrofāgu koloniju stimulējošo faktoru (GM-CSF), makrofāgu CSF (M-CSF), cilmes šūnu faktors (SCF), interleikīns-6 (IL-6), IL-8 un IL-11, kā arī citi. Šie izdalītie faktori ļauj HS-5 šūnām in vitro uzturēt hematopoētisko priekšteču šūnu augšanu un proliferāciju pat bez seruma apstākļos, kas uzsver to funkcionālo līdzību ar primārajām MSC hematopoēzes atbalstīšanā.

Onkoloģijas pētījumos HS-5 šūnas kalpo kā modelis, lai izpētītu mijiedarbību starp MSC un vēža šūnām, jo īpaši pētot audzēja mikrovides ietekmēto vēža šūnu izdzīvošanu, imūnmodulāciju un rezistenci pret zālēm. Pētījumi liecina, ka HS-5 šūnas spēj aizsargāt akūtas mieloīdās leikēmijas (AML) šūnas no apoptozes, ko izraisa tādi ķīmijterapijas līdzekļi kā citarabīns (Ara-C) un daunomicīns (DNR), iespējams, izmantojot mehānismus, kuros iesaistīta citokīnu signālu pārraide un tiešas šūnu savstarpējās mijiedarbības. Šis HS-5 šūnu aizsargājošais efekts veicina AML šūnu proliferāciju un samazina ķīmijterapijas efektivitāti, padarot šo šūnu līniju par vērtīgu rīku zāļu rezistences modelēšanai kaulu smadzeņu mikrovidē. Turklāt HS-5 šūnas ekspresē MSC marķierus, piemēram, CD73, CD90 un CD105, lai gan to ekspresijas līmeņi var atšķirties salīdzinājumā ar primārajām MSC.

Turklāt HS-5 šūnas ir izmantotas, lai pētītu jaunas terapeitiskas pieejas, piemēram, pārbaudot tādu nanomateriālu kā tīra grafēna citotoksisko iedarbību. Ir pierādīts, ka grafēna iedarbība uz HS-5 šūnām izraisa mitohondriālo disfunkciju un oksidatīvo stresu, kas noved pie apoptozes, palielinot reaktīvo skābekļa savienojumu (ROS) ražošanu un traucējot mitohondriālo membrānu potenciālu, tādējādi kalpojot par modeli nanopartikulu toksicitātes un terapeitiskā potenciāla novērtēšanai stromas šūnu mijiedarbībā audzēja mikrovidē.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu