HS-5

HS-5-solulinja on ihmisen luuytimestä peräisin oleva mesenkymaalisten stromasolujen (MSC) malli, jota käytetään yleisesti stromasolujen tukevan roolin tutkimiseen hematopoieesissa ja syövän kehittymisessä. Alun perin ihmisen papilloomaviruksen E6- ja E7-geenien avulla eristetyt ja ikuistetut HS-5-solut ovat morfologialtaan fibroblastien kaltaisia, ja niiden tiedetään erittävän laajaa valikoimaa sytokiineja ja kasvutekijöitä, jotka ovat ratkaisevia hematopoieettisten ja immuunisolujen välisissä vuorovaikutuksissa. Merkittäviä erittyviä tekijöitä ovat muun muassa granulosyyttikoloniastimuloiva tekijä (G-CSF), granulosyytti-makrofagikoloniastimuloiva tekijä (GM-CSF), makrofagi-CSF (M-CSF), kantasolutekijä (SCF), interleukiini-6 (IL-6), IL-8 ja IL-11. Näiden eritteiden ansiosta HS-5-solut pystyvät ylläpitämään hematopoieettisten esisolujen kasvua ja proliferaatiota in vitro jopa seerumittomissa olosuhteissa, mikä korostaa niiden toiminnallista samankaltaisuutta primaaristen mesenkymaalisten kantasolujen (MSC) kanssa hematopoieesin tukemisessa.

Onkologisessa tutkimuksessa HS-5-soluja käytetään mallina MSC-solujen ja syöpäsolujen välisten vuorovaikutusten tutkimiseen, erityisesti kun tarkastellaan kasvaimen mikroympäristön välittämää syöpäsolujen selviytymistä, immuunimodulaatiota ja lääkeresistenssiä. Tutkimukset ovat osoittaneet, että HS-5-solut voivat suojata akuutin myelooisen leukemian (AML) soluja sytarabiinin (Ara-C) ja daunomysiinin (DNR) kaltaisten kemoterapeuttisten aineiden aiheuttamalta apoptoosilta, mahdollisesti sytokiinisignaloinnin ja suorien solu-solu-vuorovaikutusten välityksellä. HS-5-solujen tämä suojaava vaikutus tehostaa AML-solujen proliferaatiota ja heikentää kemoterapian tehoa, mikä tekee tästä solulinjasta arvokkaan työkalun lääkeresistenssin mallintamiseen luuytimen mikroympäristössä. Lisäksi HS-5-solut ilmentävät MSC-markkereita, kuten CD73:a, CD90:tä ja CD105:tä, vaikka niiden ilmentymistasot voivat vaihdella verrattuna primaarisiin MSC-soluihin.

Lisäksi HS-5-soluja on käytetty uusien terapeuttisten lähestymistapojen tutkimiseen, kuten puhtaan grafeenin kaltaisten nanomateriaalien sytotoksisten vaikutusten testaamiseen. On osoitettu, että grafeenille altistuminen HS-5-soluissa aiheuttaa mitokondrioiden toimintahäiriöitä ja oksidatiivista stressiä, mikä johtaa apoptoosiin reaktiivisten happiyhdisteiden (ROS) lisääntyneen tuotannon ja mitokondrioiden kalvopotentiaalin häiriintymisen kautta. Näin ollen solulinja toimii mallina nanopartikkelien toksisuuden ja terapeuttisen potentiaalin arvioimiseksi stromasolujen vuorovaikutuksissa kasvaimen mikroympäristössä.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa