HS-5

La linea cellulare HS-5 è un modello di cellule stromali mesenchimali (MSC) derivate dal midollo osseo umano, comunemente utilizzato per studiare il ruolo di supporto delle cellule stromali nell’emopoiesi e nello sviluppo del cancro. Originariamente isolate e immortalizzate tramite i geni E6 ed E7 del papillomavirus umano, le cellule HS-5 presentano una morfologia simile a quella dei fibroblasti e sono note per la secrezione di un’ampia gamma di citochine e fattori di crescita fondamentali per le interazioni tra le cellule ematopoietiche e quelle immunitarie. Tra i fattori secreti più rilevanti figurano il fattore stimolante le colonie di granulociti (G-CSF), il fattore stimolante le colonie di granulociti e macrofagi (GM-CSF), il fattore stimolante le colonie di macrofagi (M-CSF), il fattore delle cellule staminali (SCF), l’interleuchina-6 (IL-6), l’IL-8 e l’IL-11, tra gli altri. Queste secrezioni consentono alle cellule HS-5 di sostenere la crescita e la proliferazione delle cellule progenitrici ematopoietiche in vitro, anche in condizioni prive di siero, evidenziando la loro somiglianza funzionale con le MSC primarie nel supporto dell’emopoiesi.

Nella ricerca oncologica, le cellule HS-5 fungono da modello per l’analisi delle interazioni tra le MSC e le cellule tumorali, in particolare nello studio della sopravvivenza delle cellule tumorali mediata dal microambiente tumorale, della modulazione immunitaria e della resistenza ai farmaci. Alcuni studi hanno dimostrato che le cellule HS-5 possono proteggere le cellule della leucemia mieloide acuta (LMA) dall’apoptosi indotta da agenti chemioterapici quali la citarabina (Ara-C) e la daunomicina (DNR), potenzialmente attraverso meccanismi che coinvolgono la segnalazione delle citochine e le interazioni dirette cellula-cellula. Questo effetto protettivo delle cellule HS-5 favorisce la proliferazione delle cellule di LMA e riduce l’efficacia della chemioterapia, rendendo questa linea cellulare uno strumento prezioso per modellare la resistenza ai farmaci nel microambiente del midollo osseo. Inoltre, le cellule HS-5 esprimono marcatori delle MSC quali CD73, CD90 e CD105, sebbene i loro livelli di espressione possano variare rispetto alle MSC primarie.

Inoltre, le cellule HS-5 sono state utilizzate per esplorare nuovi approcci terapeutici, come la valutazione degli effetti citotossici di nanomateriali quali il grafene puro. È stato dimostrato che l’esposizione al grafene nelle cellule HS-5 induce disfunzione mitocondriale e stress ossidativo, portando all’apoptosi attraverso un aumento della produzione di specie reattive dell’ossigeno (ROS) e l’alterazione del potenziale di membrana mitocondriale, fungendo così da modello per valutare la tossicità delle nanoparticelle e il potenziale terapeutico nelle interazioni delle cellule stromali all’interno del microambiente tumorale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia