HS-5

La lignée cellulaire HS-5 est un modèle de cellules stromales mésenchymateuses (CSM) dérivées de la moelle osseuse humaine, couramment utilisé pour étudier le rôle de soutien des cellules stromales dans l’hématopoïèse et le développement du cancer. Initialement isolées et immortalisées à l’aide des gènes E6 et E7 du papillomavirus humain, les cellules HS-5 présentent une morphologie de type fibroblastique et sont connues pour sécréter un large éventail de cytokines et de facteurs de croissance essentiels aux interactions entre les cellules hématopoïétiques et immunitaires. Parmi les facteurs sécrétés notables, on retrouve le facteur de stimulation des colonies de granulocytes (G-CSF), le facteur de stimulation des colonies de granulocytes et de macrophages (GM-CSF), le facteur de croissance des macrophages (M-CSF), le facteur des cellules souches (SCF), l’interleukine-6 (IL-6), l’IL-8 et l’IL-11, entre autres. Ces sécrétions permettent aux cellules HS-5 de soutenir la croissance et la prolifération des cellules progénitrices hématopoïétiques in vitro, même dans des conditions sans sérum, ce qui souligne leur similitude fonctionnelle avec les CSM primaires dans le soutien de l’hématopoïèse.

En recherche oncologique, les cellules HS-5 servent de modèle pour l’étude des interactions entre les CSM et les cellules cancéreuses, notamment dans l’étude de la survie des cellules cancéreuses, de la modulation immunitaire et de la résistance aux médicaments, toutes trois médiées par le microenvironnement tumoral. Des études ont montré que les cellules HS-5 peuvent protéger les cellules de la leucémie myéloïde aiguë (LMA) contre l’apoptose induite par des agents chimiothérapeutiques tels que la cytarabine (Ara-C) et la daunomycine (DNR), potentiellement par le biais de mécanismes impliquant la signalisation des cytokines et des interactions directes entre cellules. Cet effet protecteur des cellules HS-5 favorise la prolifération des cellules de la LAM et réduit l’efficacité de la chimiothérapie, ce qui fait de cette lignée cellulaire un outil précieux pour modéliser la résistance aux médicaments dans le microenvironnement de la moelle osseuse. De plus, les cellules HS-5 expriment des marqueurs des CSM tels que CD73, CD90 et CD105, bien que leurs niveaux d’expression puissent varier par rapport à ceux des CSM primaires.

Par ailleurs, les cellules HS-5 ont été utilisées pour explorer de nouvelles approches thérapeutiques, notamment pour tester les effets cytotoxiques de nanomatériaux tels que le graphène pur. Il a été démontré que l’exposition au graphène chez les cellules HS-5 induit un dysfonctionnement mitochondrial et un stress oxydatif, menant à l’apoptose par une production accrue d’espèces réactives de l’oxygène (ERO) et une perturbation du potentiel membranaire mitochondrial; elles servent ainsi de modèle pour évaluer la toxicité des nanoparticules et leur potentiel thérapeutique dans les interactions avec les cellules stromales au sein du microenvironnement tumoral.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.