HS-5

La línea celular HS-5 es un modelo de células estromales mesenquimales (MSC) derivadas de la médula ósea humana que se utiliza habitualmente para estudiar el papel de apoyo de las células estromales en la hematopoyesis y el desarrollo del cáncer. Aisladas e inmortalizadas originalmente mediante los genes E6 y E7 del virus del papiloma humano, las células HS-5 presentan una morfología similar a la de los fibroblastos y son conocidas por secretar una amplia gama de citocinas y factores de crecimiento que resultan cruciales para las interacciones entre las células hematopoyéticas e inmunitarias. Entre los factores secretados más destacados se encuentran el factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF), el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), el factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF), el factor de células madre (SCF), la interleucina-6 (IL-6), la IL-8 y la IL-11, entre otros. Estas secreciones permiten a las células HS-5 mantener el crecimiento y la proliferación de las células progenitoras hematopoyéticas in vitro, incluso en condiciones sin suero, lo que pone de relieve su similitud funcional con las MSC primarias en el apoyo a la hematopoyesis.

En la investigación oncológica, las células HS-5 sirven como modelo para examinar las interacciones entre las MSC y las células cancerosas, especialmente en el estudio de la supervivencia de las células cancerosas mediada por el microambiente tumoral, la modulación inmunitaria y la resistencia a los fármacos. Los estudios han demostrado que las células HS-5 pueden proteger a las células de la leucemia mieloide aguda (LMA) de la apoptosis inducida por agentes quimioterapéuticos como la citarabina (Ara-C) y la daunomicina (DNR), posiblemente a través de mecanismos que implican la señalización de citocinas e interacciones directas célula-célula. Este efecto protector de las células HS-5 potencia la proliferación de las células de LMA y reduce la eficacia de la quimioterapia, lo que convierte a esta línea celular en una herramienta valiosa para modelar la resistencia a los fármacos en el microambiente de la médula ósea. Además, las células HS-5 expresan marcadores de las MSC, como CD73, CD90 y CD105, aunque sus niveles de expresión pueden variar en comparación con las MSC primarias.

Por otra parte, las células HS-5 se han utilizado para explorar nuevos enfoques terapéuticos, como la evaluación de los efectos citotóxicos de nanomateriales como el grafeno puro. Se ha demostrado que la exposición al grafeno en las células HS-5 induce disfunción mitocondrial y estrés oxidativo, lo que conduce a la apoptosis a través del aumento de la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) y la alteración del potencial de la membrana mitocondrial, sirviendo así como modelo para evaluar la toxicidad de las nanopartículas y su potencial terapéutico en las interacciones de las células estromales dentro del microambiente tumoral.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía