P19

P19 ląstelių linija, pluripotentinės embrioninės karcinomos tipas, iš pradžių buvo gauta iš C3H/He padermės pelės teratokarcinomos. Ši į epitelį panaši ląstelių linija pasižymi dideliu klonavimo gebėjimu, kai auginama terpėje su 0,1 mM β-merkaptoetanoliu. Pažymėtina P19 ląstelių savybė - jų gebėjimas diferencijuotis į neuronines ir glialines ląsteles veikiant retinoine rūgštimi. Tuo pat metu, veikiamos dimetilsulfoksido (DMSO), jos gali virsti širdies ir skeleto raumenimis. Veikiant ir retinoine rūgštimi, ir DMSO, jie daugiausia pasižymi retinoinės rūgšties sukeltos diferenciacijos savybėmis.

P19 ląstelių linija kilusi iš pelės (Mus musculus) ir priklauso plačiai Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata ir Tetrapod klasifikacijai. Šios ląstelės įkūnija epitelinio audinio tipo, gauto iš embriono, morfologiją ir yra siejamos su liga teratokarcinoma. Jos daugiausia naudojamos 3D ląstelių kultūrų programose, priskiriamose gyvūnų ląstelių produktų kategorijai.

Nors vėžinės ląstelės kelia didelę grėsmę sveikatai dėl savo greito ir agresyvaus augimo, jos taip pat yra neįkainojamas šaltinis mokslininkams, tiriantiems vėžinių ląstelių vystymąsi ir ieškantiems tikslingesnių gydymo būdų. 1982 m. P19 ląstelių liniją sukūrė McBurney ir Rogersas, kai 7,5 dienos pelės embrionas buvo persodintas į sėklidę, siekiant sukelti naviko augimą. Jie sėkmingai iš pirminio naviko išskyrė ląstelių kultūras, kuriose buvo nediferencijuotų kamieninių ląstelių, pavadintų embrioninės karcinomos P19 ląstelėmis. Šios ląstelės sparčiai augo nenaudojant maitinamųjų ląstelių ir buvo lengvai palaikomos. Vėlesnė injekcija į kitos pelių padermės blastocistas patvirtino P19 ląstelių daugialypiškumą, nes pelės recipientės audiniai augo visuose trijuose gemaliniuose sluoksniuose.

Iš originalių P19 ląstelių buvo išvestos kelios potipių ląstelių linijos, įskaitant P19S18, P19D3, P19RAC65 ir P19C16. Kiekvienas iš šių potipių pasižymi unikaliomis diferenciacijos galimybėmis į neuronines arba raumenines ląsteles, kai yra veikiamas atitinkamai retinoine rūgštimi arba DMSO. Naujesniuose tyrimuose sukurtos ląstelių linijos, gautos iš diferencijuotų P19 ląstelių, kurios dėl P19 ląstelių pliripotentiškumo gali transformuotis į ektodermą, mezodermą ir endodermą primenančias ląsteles.

P19 ląstelės pasižymi ilgalaikiu augimu serumu papildytoje terpėje. Jų diferenciaciją galima veiksmingai kontroliuoti naudojant netoksiškus vaistus, pavyzdžiui, retinoinę rūgštį, ir taip sukurti neuronus, astrogliją ir mikrogliją. Kita vertus, DMSO veikiamų P19 ląstelių sankaupos diferencijuojasi į endodermos ir mezodermos darinius, įskaitant širdies ir skeleto raumenis. P19 ląstelės taip pat gali būti transfekcionuojamos rekombinantinius genus koduojančia DNR, todėl galima patogiai išskirti stabilias šiuos genus išreiškiančias linijas. Dėl šio plastiškumo ir universalumo P19 ląstelės yra puikus šaltinis tiriant molekulinius mechanizmus, kurie lemia diferencijuojančių pluripotentinių ląstelių vystymosi sprendimus.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime