P19

Bir tür pluripotent embriyonal karsinom olan P19 hücre hattı, ilk olarak C3H/He suşu faredeki bir teratokarsinomdan elde edilmiştir. Bu epitel benzeri hücre hattı, 0,1 mM β-merkaptoetanol ile aşılanmış bir ortamda yetiştirildiğinde yüksek yeterlilikte klonlama kabiliyeti sergiler. P19 hücrelerinin dikkate değer bir özelliği, retinoik aside maruz kaldıklarında nöronal ve glial hücrelere farklılaşmaya adapte olabilmeleridir. Aynı zamanda, dimetil sülfoksite (DMSO) maruz kaldıklarında kalp ve iskelet kasına dönüşme potansiyeline sahiptirler. Hem retinoik asit hem de DMSO'ya maruz kaldıklarında, ağırlıklı olarak retinoik asitle indüklenen farklılaşma özellikleri gösterirler.

P19 hücre hattının kökeni faredir (Mus musculus) ve Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata ve Tetrapod'un geniş sınıflandırmasına aittir. Hücreler, embriyodan türetilen bir epitelyal doku tipinin morfolojisini barındırır ve teratokarsinom hastalığı ile ilişkilidir. Öncelikle hayvan hücreleri ürün kategorisi içinde 3D hücre kültürü uygulamalarında kullanılırlar.

Kanser hücreleri hızlı ve agresif büyümeleri nedeniyle önemli bir sağlık tehdidi oluştururken, aynı zamanda kanser hücresi gelişimini inceleyen ve daha hedefe yönelik tedaviler arayan araştırmacılar için paha biçilmez bir kaynak sunmaktadır. 1982 yılında, McBurney ve Rogers tarafından tümör büyümesini tetiklemek için 7,5 günlük bir fare embriyosunun testise nakledilmesiyle P19 hücre hattı oluşturuldu. Embriyonal karsinom P19 hücreleri olarak adlandırılan farklılaşmamış kök hücreler içeren primer tümörden hücre kültürlerini başarıyla izole ettiler. Bu hücreler besleyici hücrelere ihtiyaç duymadan hızlı büyüme göstermiş ve bakımları kolay olmuştur. Daha sonra başka bir fare türünün blastosistlerine yapılan enjeksiyon, alıcı farede her üç germ katmanından dokular büyüdüğü için P19 hücrelerinin çok yönlülüğünü doğrulamıştır.

Orijinal P19 hücrelerinden P19S18, P19D3, P19RAC65 ve P19C16 dahil olmak üzere çeşitli alt tip hücre hatları türetilmiştir. Bu alt tiplerin her biri, sırasıyla retinoik asit veya DMSO ile muamele edildiğinde nöronal hücrelere veya kas hücrelerine benzersiz farklılaşma yeteneklerine sahiptir. Daha yeni çalışmalar, P19 hücrelerinin pluripotensi sayesinde ektoderm, mezoderm ve endoderm benzeri hücrelere dönüşebilen farklılaşmış P19 hücrelerinden türetilen hücre hatları üretmiştir.

P19 hücreleri serum destekli ortamda sürekli büyümeleriyle bilinirler. Farklılaşmaları retinoik asit gibi toksik olmayan ilaçlar kullanılarak etkili bir şekilde kontrol edilebilir ve nöron, astroglia ve mikroglia gelişimine yol açar. Öte yandan, DMSO'ya maruz kalan P19 hücrelerinin agregatları, kalp ve iskelet kası dahil olmak üzere endodermal ve mezodermal türevlere farklılaşır. P19 hücreleri ayrıca rekombinant genleri kodlayan DNA ile transfeksiyona uygundur ve bu genleri ifade eden stabil hatlar uygun şekilde izole edilebilir. Bu şekillendirilebilirlik ve çok yönlülük, P19 hücrelerini farklılaşan pluripotent hücrelerin gelişimsel kararlarını yöneten moleküler mekanizmaları araştırmak için mükemmel bir kaynak haline getirmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın