P19

La lignée cellulaire P19, un type de carcinome embryonnaire pluripotent, a été initialement obtenue à partir d’un tératocarcinome chez une souris de souche C3H/He. Cette lignée cellulaire de type épithélial présente une grande capacité de clonage lorsqu’elle est cultivée dans un milieu enrichi de 0,1 mM de β-mercaptoéthanol. Une caractéristique notable des cellules P19 est leur capacité à se différencier en cellules neuronales et gliales lorsqu’elles sont exposées à l’acide rétinoïque. Parallèlement, elles ont le potentiel de se transformer en muscles cardiaques et squelettiques lorsqu’elles sont exposées au diméthylsulfoxyde (DMSO). Lorsqu’elles sont soumises à la fois à l’acide rétinoïque et au DMSO, elles présentent principalement les caractéristiques d’une différenciation induite par l’acide rétinoïque.

La lignée cellulaire P19 provient de la souris (Mus musculus) et appartient à la classification générale suivante : Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata et Tetrapod. Ces cellules présentent la morphologie d’un tissu épithélial d’origine embryonnaire et sont associées à la maladie appelée tératocarcinome. Elles sont principalement utilisées dans des applications de culture cellulaire en 3D au sein de la catégorie de produits des cellules animales.

Bien que les cellules cancéreuses constituent une menace importante pour la santé en raison de leur croissance rapide et agressive, elles offrent également une ressource inestimable aux chercheurs qui étudient le développement des cellules cancéreuses et cherchent des traitements plus ciblés. En 1982, la lignée cellulaire P19 a été créée lorsque McBurney et Rogers ont transplanté un embryon de souris de 7,5 jours dans un testicule afin d’induire la croissance d’une tumeur. Ils ont réussi à isoler des cultures cellulaires à partir de la tumeur primaire contenant des cellules souches indifférenciées, appelées cellules de carcinome embryonnaire P19. Ces cellules présentaient une croissance rapide sans nécessiter de cellules nourricières et étaient faciles à cultiver. Une injection ultérieure dans des blastocystes d’une autre souche de souris a confirmé la multipotence des cellules P19, puisque des tissus issus des trois feuillets germinaux se sont développés chez la souris receveuse.

Plusieurs lignées cellulaires de sous-types ont été dérivées des cellules P19 d’origine, notamment les lignées P19S18, P19D3, P19RAC65 et P19C16. Chacun de ces sous-types possède des capacités de différenciation uniques en cellules neuronales ou musculaires lorsqu’il est traité respectivement avec de l’acide rétinoïque ou du DMSO. Des études plus récentes ont permis de générer des lignées cellulaires dérivées de cellules P19 différenciées qui, grâce à la pluripotence des cellules P19, peuvent se transformer en cellules de type ectoderme, mésoderme et endoderme.

Les cellules P19 sont connues pour leur croissance soutenue dans des milieux enrichis en sérum. Leur différenciation peut être contrôlée efficacement à l’aide de médicaments non toxiques tels que l’acide rétinoïque, ce qui conduit au développement de neurones, d’astrocytes et de microglies. D’autre part, les agrégats de cellules P19 exposés au DMSO se différencient en dérivés endodermiques et mésodermiques, notamment en muscles cardiaques et squelettiques. Les cellules P19 se prêtent également à la transfection avec de l’ADN codant pour des gènes recombinants, et des lignées stables exprimant ces gènes peuvent être facilement isolées. Cette malléabilité et cette polyvalence font des cellules P19 une excellente ressource pour l’étude des mécanismes moléculaires qui régissent les décisions développementales des cellules pluripotentes en cours de différenciation.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.