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P19
Tissue
睪丸
Disease
畸胎癌
Synonyms
P-19

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P19

Cell line · Product number 400416

The P19 cell line, a type of pluripotent embryonal carcinoma, was initially obtained from a teratocarcinoma in a C3H/He strain mouse. This epithelial-like...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

P19 細胞系是一種多能性胚胎癌細胞系,最初是從 C3H/He 品系小鼠的畸胎癌中分離而得。這種上皮樣細胞系在添加了 0.1mM β-巰基乙醇的培養基中生長時,展現出高效率的克隆能力。 P19 細胞的一大顯著特徵在於,當暴露於視黃酸時,其具有分化為神經元和膠質細胞的適應性。 同時,當暴露於二甲基亞砜(DMSO)時,它們亦具有分化為心肌細胞和骨骼肌細胞的潛能。當同時暴露於視黃酸和 DMSO 時,它們主要表現出視黃酸誘導分化的特徵。

P19 細胞系源自小鼠(Mus musculus),在生物分類上隸屬於真核生物(Eukaryota)、動物界(Animalia)、後生動物(Metazoa)、脊索動物門(Chordata)、脊椎動物亞門(Vertebrata)以及四足動物(Tetrapod)。 這些細胞呈現源自胚胎的上皮組織形態,並與畸胎癌相關。它們主要應用於動物細胞產品類別中的三維細胞培養。

儘管癌細胞因其快速且具侵襲性的生長而對健康構成重大威脅,但對於研究癌細胞發育及尋求更具針對性治療方法的研究人員而言,它們亦提供了無價的資源。 1982年,McBurney與Rogers將一顆7.5日齡的小鼠胚胎移植至睪丸中以誘導腫瘤生長,從而建立了P19細胞系。他們成功從原發性腫瘤中分離出含有未分化幹細胞的細胞培養物,並將其命名為胚胎癌P19細胞。 這些細胞展現出快速增殖的特性,無需養分細胞即可生長,且易於維持。隨後將其注射至另一小鼠品系的囊胚中,證實了 P19 細胞的多能性,因為受體小鼠體內生長出了來自三胚層的所有組織。

從原始的 P19 細胞已衍生出數種亞型細胞系,包括 P19S18、 P19D3、P19RAC65 及 P19C16。當分別以視黃酸或二甲基亞砜(DMSO)處理時,這些亞型細胞均具備分化為神經細胞或肌肉細胞的獨特能力。 近期研究更成功建立了源自分化後 P19 細胞的細胞系,這些細胞系得益於 P19 細胞的多能性,能夠轉化為外胚層、中胚層及內胚層樣細胞。

P19 細胞以其在含血清培養基中能持續增殖而聞名。其分化過程可透過視黃酸等無毒藥物有效控制,從而誘導出神經元、星形膠質細胞及小膠質細胞。 另一方面,暴露於二甲基亞砜(DMSO)的 P19 細胞聚集体會分化為內胚層和中胚層衍生物,包括心肌和骨骼肌。P19 細胞亦可轉染編碼重組基因的 DNA,且能方便地分離出表達這些基因的穩定細胞系。 這種可塑性與多功能性,使 P19 細胞成為探索調控分化中多能細胞發育決策之分子機制的絕佳資源。

Tissue
睪丸
Disease
畸胎癌
Synonyms
  • P-19

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
成纖維細胞樣
Karyotype
N = 40,xY

04Identifiers

Citation
P19(Cytion 型號 400416)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2153

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨酰胺,重量比:15 mM HEPES, w: 0.5 mM 丙酮酸鈉,w: 1.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820400a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
移除培養基,並使用不含鈣和鎂的PBS沖洗貼壁細胞(T25細胞培養瓶需3-5毫升PBS,T75細胞培養瓶需5-10毫升)。 加入 TrypleExpress(T25 培養瓶每瓶 1–2 毫升,T75 培養瓶每瓶 2.5 毫升),確保細胞片完全被覆蓋。於 37 攝氏度下孵育 10 分鐘。 小心地將細胞重新懸浮,可選擇性添加培養基但並非必要,並分裝至含有新鮮培養基的新培養瓶中。切勿讓細胞保持密合狀態。至少每48小時進行一次傳代。
Seeding density
至少每 48 小時進行一次培養
Fluid renewal
每兩天
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Breed / subspecies
C3H/He