P19

קו התאים P19, סוג של קרצינומה עוברי פלוריפוטנטי, הושג בתחילה מתראטוקרצינומה בעכבר מזן C3H/He. קו תאים דמוי אפיתל זה מפגין יכולת שיבוט ברמת יעילות גבוהה כאשר הוא גדל במדיום המכיל 0.1mM β-mercaptoethanol. מאפיין בולט של תאי P19 הוא יכולתם להסתגל ולהתמיין לתאי עצב ותאי גליה כאשר הם נחשפים לחומצה רטינואית. במקביל, יש להם פוטנציאל להפוך לשריר לב ושריר שלד כאשר הם נחשפים לדימתיל סולפוקסיד (DMSO). כאשר הם נחשפים הן לחומצה רטינואית והן ל-DMSO, הם מפגינים בעיקר מאפיינים של התמיינות המושרית על ידי חומצה רטינואית.

קו התאים P19 מקורו בעכבר (Mus musculus) ומשתייך לקטגוריה הרחבה של Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata ו-Tetrapod. התאים מגלמים את המורפולוגיה של רקמת אפיתל שמקורה בעובר, והם קשורים למחלה טרטוקרצינומה. הם משמשים בעיקר ביישומים של תרבית תאים תלת-ממדית בקטגוריית המוצרים של תאים מן החי.

תאי סרטן מהווים איום בריאותי משמעותי בשל צמיחתם המהירה והאגרסיבית, אך הם גם מהווים משאב יקר ערך לחוקרים העוסקים בחקר התפתחות תאי סרטן ומחפשים טיפולים ממוקדים יותר. בשנת 1982, קו התאים P19 נוצר כאשר McBurney ו-Rogers השתילו עובר עכבר בן 7.5 ימים באשך כדי לגרום לצמיחת גידול. הם הצליחו לבודד תרבויות תאים מהגידול הראשוני המכיל תאי גזע בלתי מובחנים, המכונים תאי קרצינומה עובריים P19. תאים אלה הפגינו צמיחה מהירה ללא צורך בתאי הזנה והיו קלים לתחזוקה. הזרקה עוקבת לבלסטוציסטים של זן עכברים אחר אישרה את הרב-תכליתיות של תאי P19, שכן רקמות משלושת שכבות הגרעין צמחו בעכבר המקבל.

מספר תת-סוגים של קווי תאים נגזרו מתאי P19 המקוריים, כולל P19S18, P19D3, P19RAC65 ו-P19C16. לכל אחד מתתי-סוגים אלה יכולות התמיינות ייחודיות לתאי עצב או תאי שריר כאשר הם מטופלים בחומצה רטינואית או DMSO, בהתאמה. מחקרים עדכניים יותר יצרו קווי תאים שמקורם בתאי P19 מובחנים, אשר, בזכות הפלוריפוטנטיות של תאי P19, יכולים להפוך לתאים דמויי אקטודרם, מזודרם ואנדודרם.

תאי P19 ידועים בצמיחתם המתמשכת בתווך המכיל סרום. ניתן לשלוט ביעילות בהבחנה שלהם באמצעות תרופות לא רעילות כגון חומצה רטינואית, מה שמוביל להתפתחות נוירונים, אסטרוגליה ומיקרוגליה. מצד שני, צברים של תאי P19 שנחשפו ל-DMSO מתמיינים לתוצרים אנדודרמליים ומזודרמליים, כולל שריר לב ושריר שלד. תאי P19 ניתנים גם להחדרה עם DNA המקודד גנים רקומביננטיים, וניתן לבודד בקלות שורות יציבות המבטאות גנים אלה. גמישות ורב-תכליתיות זו הופכות את תאי P19 למשאב מצוין לחקר המנגנונים המולקולריים השולטים בהחלטות ההתפתחות של תאים פלוריפוטנטיים מתמיינים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו