P19

Garis sel P19, sejenis karsinoma embrionik pluripoten, pada awalnya diperoleh dari teratokarsinoma pada tikus galur C3H/He. Garis sel yang mirip epitel ini menunjukkan kemampuan untuk mengkloning dengan kemahiran tinggi ketika ditumbuhkan dalam media yang mengandung 0,1 mL β-mercaptoethanol. Fitur penting dari sel P19 adalah kemampuannya beradaptasi untuk berdiferensiasi menjadi sel neuron dan glial ketika terpapar asam retinoat. Secara bersamaan, mereka memiliki potensi untuk berubah menjadi otot jantung dan rangka ketika terpapar dimetil sulfoksida (DMSO). Ketika terpapar asam retinoat dan DMSO, mereka secara dominan menunjukkan karakteristik diferensiasi yang diinduksi oleh asam retinoat.

Garis sel P19 berasal dari tikus (Mus musculus) dan termasuk dalam klasifikasi luas Eukariota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata, dan Tetrapoda. Sel-sel tersebut mewujudkan morfologi jenis jaringan epitel yang berasal dari embrio dan berhubungan dengan penyakit teratokarsinoma. Sel-sel ini terutama digunakan dalam aplikasi kultur sel 3D dalam kategori produk sel hewan.

Meskipun sel kanker merupakan ancaman kesehatan yang signifikan karena pertumbuhannya yang cepat dan agresif, sel ini juga menawarkan sumber daya yang tak ternilai bagi para peneliti yang mempelajari perkembangan sel kanker dan mencari pengobatan yang lebih tepat sasaran. Pada tahun 1982, garis sel P19 diciptakan ketika embrio tikus 7,5 hari ditransplantasikan ke dalam testis untuk menginduksi pertumbuhan tumor oleh McBurney dan Rogers. Mereka berhasil mengisolasi kultur sel dari tumor primer yang mengandung sel punca yang tidak berdiferensiasi, yang disebut sel P19 karsinoma embrionik. Sel-sel ini menunjukkan pertumbuhan yang cepat tanpa memerlukan sel pengumpan dan mudah dipelihara. Injeksi berikutnya ke dalam blastosis dari strain tikus lain mengkonfirmasi multipotensi sel P19, karena jaringan dari ketiga lapisan germinal tumbuh pada tikus penerima.

Beberapa garis sel subtipe telah diturunkan dari sel P19 asli, termasuk P19S18, P19D3, P19RAC65, dan P19C16. Masing-masing subtipe ini memiliki kemampuan diferensiasi yang unik menjadi sel neuron atau sel otot ketika diobati dengan asam retinoat atau DMSO. Penelitian yang lebih baru telah menghasilkan garis sel yang berasal dari sel P19 yang terdiferensiasi, yang, karena pluripotensi sel P19, dapat berubah menjadi sel ektoderm, mesoderm, dan endoderm.

Sel P19 dikenal karena pertumbuhannya yang berkelanjutan dalam media yang disuplementasi dengan serum. Diferensiasinya dapat dikontrol secara efektif dengan menggunakan obat tidak beracun seperti asam retinoat, yang mengarah pada pengembangan neuron, astroglia, dan mikroglia. Di sisi lain, agregat sel P19 yang terpapar DMSO berdiferensiasi menjadi turunan endodermal dan mesodermal, termasuk otot jantung dan rangka. Sel P19 juga dapat menerima transfeksi dengan DNA yang mengkode gen rekombinan, dan garis stabil yang mengekspresikan gen ini dapat dengan mudah diisolasi. Kelenturan dan keserbagunaan ini menjadikan sel P19 sebagai sumber daya yang sangat baik untuk mengeksplorasi mekanisme molekuler yang mengatur keputusan perkembangan diferensiasi sel pluripoten.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami