P19

多能性胚性癌の一種であるP19細胞株は、当初C3H/He系統マウスの奇形癌から得られた。この上皮様細胞株は、0.1mMのβ-メルカプトエタノールを添加した培地で培養すると、高い能力でクローンを作る能力を示す。P19細胞の特筆すべき特徴は、レチノイン酸にさらされると神経細胞やグリア細胞に分化する適応性を持つことである。同時に、ジメチルスルホキシド（DMSO）に暴露すると、心筋や骨格筋に変化する可能性を持っている。レチノイン酸とDMSOの両方にさらされると、主にレチノイン酸誘導性分化の特徴を示す。

P19細胞株はマウス（Mus musculus）を起源とし、真核生物門、動物界、後生動物門、脊索動物門、脊椎動物門、四肢動物門の大分類に属する。この細胞は胚に由来する上皮組織型の形態を体現しており、奇形癌という病気に関連している。これらは主に、動物細胞という製品カテゴリー内の3D細胞培養アプリケーションで利用されている。

がん細胞は、その急速かつ攻撃的な増殖により重大な健康上の脅威をもたらす一方で、がん細胞の発生を研究し、より的を絞った治療法を求める研究者にとっては貴重な資源でもある。1982年、McBurneyとRogersにより、腫瘍の成長を誘導するために7.5日目のマウス胚を精巣に移植したところ、P19細胞株が作成された。彼らは、未分化の幹細胞を含む原発性腫瘍から細胞培養物を単離することに成功し、胚性癌P19細胞と名付けた。これらの細胞はフィーダー細胞を必要とせずに急速な増殖を示し、維持も容易であった。その後、別の系統のマウスの胚盤胞に注入したところ、3つの生殖細胞層すべての組織がレシピエントマウスで増殖したことから、P19細胞の多能性が確認された。

オリジナルのP19細胞から、P19S18、P19D3、P19RAC65、P19C16を含むいくつかの亜型細胞株が派生した。これらのサブタイプはそれぞれ、レチノイン酸やDMSOで処理すると、神経細胞や筋肉細胞に分化するユニークな能力を有している。最近の研究では、分化したP19細胞に由来する細胞株が作製されており、P19細胞の多能性により、外胚葉、中胚葉、内胚葉様細胞へと変化することができる。

P19細胞は血清添加培地で持続的に増殖することで知られている。P19細胞の分化は、レチノイン酸のような無毒性の薬剤を用いて効果的に制御することができ、ニューロン、アストログリア、ミクログリアの発生につながる。一方、DMSOにさらされたP19細胞の集合体は、心筋や骨格筋を含む内胚葉や中胚葉に分化する。P19細胞はまた、組換え遺伝子をコードするDNAでトランスフェクションすることが可能であり、これらの遺伝子を発現する安定株を簡便に単離することができる。このような可鍛性と多様性により、P19細胞は分化多能性細胞の発生決定を支配する分子機構を研究するための優れたリソースとなっている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。