Skip to content
P19
Tissue
睾丸
Disease
畸胎瘤
Synonyms
P-19

Documents

P19

Cell line · Product number 400416

The P19 cell line, a type of pluripotent embryonal carcinoma, was initially obtained from a teratocarcinoma in a C3H/He strain mouse. This epithelial-like...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

P19 细胞系是一种多能胚胎癌,最初是从 C3H/He 株小鼠的畸胎癌中获得的。当在注入 0.1mM β-巯基乙醇的培养基中生长时,这种上皮样细胞系具有高效克隆能力。P19 细胞的一个显著特点是,当暴露于维甲酸时,它们能适应分化成神经元和神经胶质细胞。同时,当暴露于二甲基亚砜(DMSO)时,它们有可能转化为心肌和骨骼肌。当同时受到视黄酸和二甲基亚砜的作用时,它们主要表现出视黄酸诱导分化的特征。

P19 细胞系起源于小鼠(Mus musculus),属于真核细胞、动物界、元古代、脊索动物、脊椎动物和四足动物的广义分类。这种细胞具有胚胎上皮组织类型的形态,与畸胎瘤疾病有关。它们主要用于动物细胞产品类别中的三维细胞培养应用。

癌细胞因其生长迅速、侵袭性强而对健康构成严重威胁,同时也为研究人员提供了研究癌细胞发育和寻求更有针对性治疗的宝贵资源。1982 年,麦克伯尼和罗杰斯将 7.5 天的小鼠胚胎移植到睾丸,诱导肿瘤生长,从而产生了 P19 细胞系。他们成功地从原发肿瘤中分离出含有未分化干细胞的细胞培养物,并将其称为胚胎癌P19细胞。这些细胞无需饲养细胞即可快速生长,而且易于维持。随后将这些细胞注入另一种小鼠品系的囊胚中,证实了 P19 细胞的多潜能性,因为受体小鼠的三个生殖层组织都在生长。

从最初的 P19 细胞衍生出了多个亚型细胞系,包括 P19S18、P19D3、P19RAC65 和 P19C16。每种亚型细胞在视黄酸或二甲基亚砜的作用下都具有向神经细胞或肌肉细胞分化的独特能力。最近的研究产生了由分化的 P19 细胞衍生的细胞系,由于 P19 细胞具有多能性,它们可以转化为外胚层、中胚层和内胚层细胞。

P19 细胞以其在血清补充培养基中的持续生长而闻名。使用视黄酸等无毒药物可有效控制它们的分化,导致神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞的发育。另一方面,暴露于二甲基亚砜的 P19 细胞聚集体会分化成内胚层和中胚层衍生物,包括心肌和骨骼肌。P19 细胞还可转染编码重组基因的 DNA,并可方便地分离出表达这些基因的稳定品系。这种可塑性和多功能性使 P19 细胞成为探索多能分化细胞发育决定的分子机制的绝佳资源。

Tissue
睾丸
Disease
畸胎瘤
Synonyms
  • P-19

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
纤维母细胞样
Karyotype
N = 40,xY

04Identifiers

Citation
P19(Cytion 目录编号 400416)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2153

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗粘附的细胞(T25 细胞培养皿用 3-5 毫升 PBS,T75 细胞培养皿用 5-10 毫升)。加入 TrypleExpress(每个 T25 细胞培养瓶 1-2 毫升,每个 T75 细胞培养瓶 2.5 毫升),细胞片必须完全覆盖。在 37 摄氏度下培养 10 分钟。小心重悬细胞,可选择添加培养基,但不是必须的,然后分装到装有新鲜培养基的新培养瓶中。不要让细胞保持汇合。至少每 48 小时再培养一次。
Seeding density
至少每 48 小时进行一次亚培养
Fluid renewal
每两天
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

07Donor

Breed / subspecies
C3H/He