P19

Celična linija P19, vrsta pluripotentnega embrionalnega karcinoma, je bila prvotno pridobljena iz teratokarcinoma pri miših seva C3H/He. Ta celična linija, ki je podobna epitelijskim celicam, je sposobna klonirati z visoko učinkovitostjo, kadar se goji v gojišču z 0,1 mM β-merkaptoetanola. Pomembna značilnost celic P19 je njihova sposobnost diferenciacije v nevronske in glialne celice, ko so izpostavljene retinojski kislini. Hkrati se lahko preoblikujejo v srčne in skeletne mišice, kadar so izpostavljene dimetilsulfoksidu (DMSO). Kadar so izpostavljeni tako retinojski kislini kot DMSO, kažejo predvsem značilnosti diferenciacije, ki jo povzroča retinojska kislina.

Celična linija P19 izvira iz miši (Mus musculus) in spada v široko klasifikacijo Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata in Tetrapod. Celice utelešajo morfologijo epitelijskega tipa tkiva, ki izhaja iz zarodka, in so povezane z boleznijo teratokarcinom. Uporabljajo se predvsem v aplikacijah 3D celičnih kultur v kategoriji izdelkov živalskih celic.

Čeprav rakave celice zaradi svoje hitre in agresivne rasti predstavljajo veliko grožnjo zdravju, so tudi neprecenljiv vir za raziskovalce, ki proučujejo razvoj rakavih celic in iščejo bolj ciljno usmerjeno zdravljenje. Leta 1982 sta McBurney in Rogers ustvarila celično linijo P19, ko sta 7,5-dnevni mišji zarodek presadila v testis, da bi povzročila rast tumorja. Iz primarnega tumorja sta uspešno izolirala celične kulture, ki so vsebovale nediferencirane matične celice, imenovane celice embrionalnega karcinoma P19. Te celice so hitro rasle, ne da bi potrebovale hranilne celice, in jih je bilo enostavno vzdrževati. Kasnejša injiciranje v blastociste drugega seva miši je potrdilo multipotentnost celic P19, saj so pri miši prejemnici zrasla tkiva iz vseh treh zarodnih plasti.

Iz prvotnih celic P19 je bilo izpeljanih več podtipov celic, vključno s celicami P19S18, P19D3, P19RAC65 in P19C16. Vsak od teh podtipov ima edinstveno sposobnost diferenciacije v nevronske celice ali mišične celice, kadar je obdelan z retinojsko kislino ali DMSO. Novejše študije so ustvarile celične linije, pridobljene iz diferenciranih celic P19, ki se lahko zaradi pluripotentnosti celic P19 spremenijo v ektoderm, mezoderm in endodermu podobne celice.

Celice P19 so znane po svoji trajni rasti v mediju, ki je dopolnjen s serumom. Njihovo diferenciacijo je mogoče učinkovito nadzorovati z uporabo netoksičnih zdravil, kot je retinojska kislina, kar vodi v razvoj nevronov, astroglije in mikroglije. Po drugi strani pa se agregati celic P19, izpostavljeni DMSO, diferencirajo v endodermalne in mezodermalne derivate, vključno s srčno in skeletno mišico. Celice P19 so primerne tudi za transfekcijo z DNA, ki kodira rekombinantne gene, in stabilne linije, ki izražajo te gene, je mogoče priročno izolirati. Zaradi te prilagodljivosti in vsestranskosti so celice P19 odličen vir za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki uravnavajo razvojne odločitve diferencirajočih se pluripotentnih celic.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo