P19

Клетъчната линия P19, вид плурипотентен ембрионален карцином, първоначално е получена от тератокарцином на мишка от щама C3H/He. Тази епителноподобна клетъчна линия проявява способност за клониране с висока степен на ефективност, когато се отглежда в среда, наситена с 0,1 mM β-меркаптоетанол. Забележителна особеност на клетките P19 е тяхната способност да се диференцират в невронни и глиални клетки, когато са изложени на ретиноева киселина. Едновременно с това те имат потенциала да се трансформират в сърдечен и скелетен мускул, когато са изложени на въздействието на диметилсулфоксид (DMSO). Когато са подложени както на ретиноева киселина, така и на DMSO, те показват предимно характеристиките на диференциация, предизвикана от ретиноевата киселина.

Клетъчната линия P19 произхожда от мишка (Mus musculus) и принадлежи към широката класификация на Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata и Tetrapod. Клетките въплъщават морфологията на епителен тип тъкан, произхождаща от ембриона, и се свързват със заболяването тератокарцином. Те се използват предимно в приложения за 3D клетъчни култури в рамките на продуктовата категория животински клетки.

Въпреки че раковите клетки представляват значителна заплаха за здравето поради бързия си и агресивен растеж, те предлагат и безценен ресурс за изследователите, които изучават развитието на раковите клетки и търсят по-целенасочени лечения. През 1982 г. е създадена клетъчната линия P19, когато Макбърни и Роджърс трансплантират 7,5-дневен миши ембрион в тестис, за да предизвикат туморен растеж. Те успешно изолират клетъчни култури от първичния тумор, съдържащи недиференцирани стволови клетки, наречени клетки от ембрионален карцином P19. Тези клетки демонстрират бърз растеж без нужда от захранващи клетки и са лесни за поддържане. Последвалото инжектиране в бластоцисти на друг щам мишки потвърждава мултипотентността на клетките P19, тъй като в реципиентната мишка израстват тъкани от всички три зародишни слоя.

Няколко подтипа клетъчни линии са получени от оригиналните клетки P19, включително P19S18, P19D3, P19RAC65 и P19C16. Всеки от тези подтипове притежава уникална способност за диференциация в невронни или мускулни клетки, когато се третира съответно с ретиноева киселина или DMSO. В по-нови проучвания са генерирани клетъчни линии, получени от диференцирани клетки P19, които поради плурипотентността на клетките P19 могат да се трансформират в ектодерма, мезодерма и ендодермоподобни клетки.

Клетките P19 са известни с устойчивия си растеж в среда, допълнена със серум. Тяхната диференциация може да бъде ефективно контролирана с помощта на нетоксични лекарства, като например ретиноева киселина, което води до развитието на неврони, астроглия и микроглия. От друга страна, агрегати от клетки P19, изложени на DMSO, се диференцират в ендодермални и мезодермални производни, включително сърдечен и скелетен мускул. Клетките P19 също така се поддават на трансфекция с ДНК, кодираща рекомбинантни гени, и стабилни линии, експресиращи тези гени, могат да бъдат изолирани по удобен начин. Тази податливост и гъвкавост правят клетките P19 отличен ресурс за изследване на молекулярните механизми, които управляват решенията за развитие на диференциращите се плурипотентни клетки.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация