P19

เซลล์ไลน์ P19 ซึ่งเป็นชนิดหนึ่งของมะเร็งเซลล์ต้นกำเนิดที่สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ชนิดต่าง ๆ ได้ (pluripotent embryonal carcinoma) ได้รับการแยกครั้งแรกจากมะเร็งเทราโตคาร์ซิโนมาในหนูสายพันธุ์ C3H/He เซลล์ไลน์ที่มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิวนี้แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการโคลนตัวเองได้อย่างมีประสิทธิภาพสูงเมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีสาร 0.1mM β-mercaptoethanol ผสมอยู่ลักษณะเด่นของเซลล์ P19 คือความสามารถในการปรับตัวเพื่อเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ประสาทและเซลล์เกลียเมื่อได้รับกรดเรติโนอิก ในขณะเดียวกัน พวกมันยังมีศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงเป็นกล้ามเนื้อหัวใจและกล้ามเนื้อลายเมื่อได้รับไดเมทิลซัลฟอกไซด์ (DMSO) เมื่อได้รับทั้งกรดเรติโนอิกและ DMSO เซลล์จะแสดงลักษณะของการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากกรดเรติโนอิกเป็นหลัก

เซลล์ไลน์ P19 มีต้นกำเนิดจากหนู (Mus musculus) และจัดอยู่ในกลุ่มกว้างของยูคาริโอตา, อนิมอลเลีย, เมตาโซอา, คอร์ดาตา, เวอร์เทบราตา, และเตตราบอด. เซลล์เหล่านี้มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเนื้อเยื่อเยื่อบุผิวที่มาจากตัวอ่อนและเกี่ยวข้องกับโรคเทราโตคาร์ซิโนมา. เซลล์เหล่านี้ถูกใช้เป็นหลักในการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ 3 มิติในหมวดหมู่ผลิตภัณฑ์ของเซลล์สัตว์.

ในขณะที่เซลล์มะเร็งก่อให้เกิดภัยคุกคามต่อสุขภาพอย่างมีนัยสำคัญเนื่องจากการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและรุนแรง พวกมันยังเป็นแหล่งทรัพยากรที่มีค่าอย่างยิ่งสำหรับนักวิจัยที่ศึกษาการพัฒนาของเซลล์มะเร็งและค้นหาการรักษาที่มุ่งเป้าได้มากขึ้น ในปี 1982 สายพันธุ์เซลล์ P19 ถูกสร้างขึ้นเมื่อตัวอ่อนหนูอายุ 7.5 วันถูกปลูกถ่ายเข้าไปในอัณฑะเพื่อกระตุ้นการเจริญเติบโตของเนื้องอกโดย McBurney และ Rogersพวกเขาประสบความสำเร็จในการแยกเซลล์เพาะเลี้ยงจากเนื้องอกปฐมภูมิซึ่งประกอบด้วยเซลล์ต้นกำเนิดที่ยังไม่เจริญเต็มที่ เรียกว่าเซลล์มะเร็งตัวอ่อน P19 เซลล์เหล่านี้แสดงการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วโดยไม่จำเป็นต้องใช้เซลล์ฟีดเดอร์และดูแลรักษาง่าย การฉีดเซลล์เหล่านี้เข้าไปในบลาสโตซิสของหนูสายพันธุ์อื่นยืนยันถึงความสามารถในการสร้างเนื้อเยื่อหลายชนิดของเซลล์ P19 เนื่องจากเนื้อเยื่อจากทั้งสามชั้นต้นกำเนิดเติบโตในหนูผู้รับ

เซลล์ไลน์ย่อยหลายชนิดได้ถูกแยกออกมาจากเซลล์ต้นกำเนิด P19 ซึ่งรวมถึง P19S18,P19D3, P19RAC65 และ P19C16 แต่ละชนิดย่อยเหล่านี้มีความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเฉพาะตัวเป็นเซลล์ประสาทหรือเซลล์กล้ามเนื้อเมื่อได้รับการรักษาด้วยกรดเรติโนอิกหรือ DMSO ตามลำดับ การศึกษาล่าสุดได้สร้างสายเซลล์ที่สกัดจากเซลล์ P19 ที่เปลี่ยนแปลงแล้ว ซึ่งเนื่องจากความสามารถในการเปลี่ยนแปลงหลายชนิดของเซลล์ P19 สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ที่คล้ายกับ ectoderm, mesoderm และ endoderm ได้

เซลล์ P19 เป็นที่รู้จักกันดีในเรื่องการเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีซีรัมเสริม การเปลี่ยนแปลงของเซลล์เหล่านี้สามารถควบคุมได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยใช้ยาที่ไม่เป็นพิษ เช่น กรดเรติโนอิก ซึ่งนำไปสู่การพัฒนาเป็นเซลล์ประสาท แอสโทรไซต์ และไมโครเกลียในทางกลับกัน กลุ่มเซลล์ P19 ที่สัมผัสกับ DMSO จะแยกตัวเป็นเซลล์ต้นกำเนิดของชั้นในและชั้นกลาง รวมถึงกล้ามเนื้อหัวใจและกล้ามเนื้อโครงร่าง เซลล์ P19 ยังสามารถรับการถ่ายโอนยีนด้วย DNA ที่เข้ารหัสยีนรีคอมบิแนนท์ได้ และสายพันธุ์ที่แสดงออกยีนเหล่านี้สามารถแยกออกมาได้อย่างสะดวก ความยืดหยุ่นและความหลากหลายนี้ทำให้เซลล์ P19 เป็นทรัพยากรที่ยอดเยี่ยมสำหรับการสำรวจกลไกโมเลกุลที่ควบคุมการตัดสินใจในการพัฒนาของเซลล์ต้นกำเนิดหลายชนิด

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.