P19

تم الحصول على خط الخلية P19، وهو نوع من السرطان الجنيني متعدد القدرات، في البداية من سرطان مسخي في فأر من سلالة C3H/He. يُظهر هذا الخط الخلوي الشبيه بالظهارة القدرة على الاستنساخ بكفاءة عالية عند نموه في وسط مشبع بـ 0.1 ملي مولار بيتا-ميركابتويثانول. ومن السمات البارزة لخلايا P19 هي قدرتها على التمايز إلى خلايا عصبية ودبقية عند تعرضها لحمض الريتينويك. وفي الوقت نفسه، لديها القدرة على التحول إلى عضلات قلبية وهيكلية عند تعريضها لثنائي ميثيل سلفوكسيد الكبريت (DMSO). وعند تعريضها لكل من حمض الريتينويك وDMSO، فإنها تُظهر في الغالب خصائص التمايز الناجم عن حمض الريتينويك.

يعود أصل خط الخلايا P19 إلى الفأر (Mus musculus) وينتمي إلى التصنيف الواسع لحقيقيات النوى والحيوانات والميتازوا والحبليات والفقاريات ورباعيات الأرجل. تجسد هذه الخلايا مورفولوجيا نوع من الأنسجة الظهارية المشتقة من الجنين وترتبط بمرض السرطان المسخي. يتم استخدامها بشكل أساسي في تطبيقات زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد ضمن فئة منتجات الخلايا الحيوانية.

وفي حين تشكل الخلايا السرطانية تهديداً صحياً كبيراً بسبب نموها السريع والعدواني، إلا أنها توفر أيضاً مورداً لا يقدر بثمن للباحثين الذين يدرسون تطور الخلايا السرطانية ويبحثون عن علاجات أكثر استهدافاً. في عام 1982، تم إنشاء سلالة الخلايا P19 عندما تم زرع جنين فأر مدته 7.5 يوم في الخصية لتحفيز نمو الورم من قبل McBurney وRugers. وقد نجحا في عزل مزارع الخلايا من الورم الأولي الذي يحتوي على خلايا جذعية غير متمايزة، أطلق عليها اسم خلايا السرطان الجنيني P19. أظهرت هذه الخلايا نموًا سريعًا دون الحاجة إلى خلايا مغذية وكان من السهل الحفاظ عليها. وقد أكد الحقن اللاحق في كيسات أُرَيمية من سلالة فأر أخرى تعدد خلايا P19، حيث نمت الأنسجة من جميع الطبقات الجرثومية الثلاث في الفأر المتلقي.

تم اشتقاق العديد من خطوط الخلايا الفرعية من خلايا P19 الأصلية، بما في ذلك P19S18 و P19D3 و P19RAC65 و P19C16. يمتلك كل نوع من هذه الأنواع الفرعية قدرات تمايز فريدة من نوعها إلى خلايا عصبية أو خلايا عضلية عند معالجتها بحمض الريتينويك أو DMSO، على التوالي. وقد أنتجت الدراسات الحديثة خطوطًا خلوية مشتقة من خلايا P19 المتمايزة، والتي يمكن أن تتحول إلى خلايا تشبه الأديم الظاهر والأديم المتوسط والأديم الباطن، وذلك بسبب تعدد القدرات الكامنة في خلايا P19.

وتُعرف خلايا P19 بنموها المستمر في الوسائط المكملة بالمصل. ويمكن التحكم في تمايزها بفعالية باستخدام عقاقير غير سامة مثل حمض الريتينويك، مما يؤدي إلى تطور الخلايا العصبية والخلايا الدبقية النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة. من ناحية أخرى، تتمايز مجاميع خلايا P19 المعرضة لـ DMSO إلى مشتقات الأديم الباطن والأديم المتوسط، بما في ذلك العضلات القلبية والهيكل العظمي. كما أن خلايا P19 قابلة أيضًا لنقل الحمض النووي المشفّر للجينات المؤتلفة، ويمكن عزل الخطوط المستقرة التي تعبر عن هذه الجينات بسهولة. هذه المرونة وتعدد الاستخدامات تجعل من خلايا P19 مورداً ممتازاً لاستكشاف الآليات الجزيئية التي تحكم القرارات التنموية للخلايا متعددة القدرات المتمايزة.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان