P19

De P19 cellijn, een type pluripotent embryonaal carcinoom, werd oorspronkelijk verkregen uit een teratocarcinoom in een C3H/He-stam muis. Deze epitheelachtige cellijn vertoont het vermogen om met hoge bekwaamheid te klonen wanneer deze wordt gekweekt in een medium met 0,1mM β-mercaptoethanol. Een opvallend kenmerk van P19 cellen is hun aanpassingsvermogen om te differentiëren in neuronale en gliale cellen wanneer ze worden blootgesteld aan retinoïnezuur. Tegelijkertijd kunnen ze transformeren in hart- en skeletspieren bij blootstelling aan dimethylsulfoxide (DMSO). Wanneer ze worden blootgesteld aan zowel retinoïnezuur als DMSO, vertonen ze voornamelijk kenmerken van door retinoïnezuur geïnduceerde differentiatie.

De P19 cellijn is afkomstig van de muis (Mus musculus) en behoort tot de brede classificatie van Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata en Tetrapoda. De cellen belichamen de morfologie van een epitheliaal weefseltype afkomstig van het embryo en worden in verband gebracht met de ziekte teratocarcinoom. Ze worden voornamelijk gebruikt in 3D-celkweektoepassingen binnen de productcategorie dierlijke cellen.

Kankercellen vormen een belangrijke bedreiging voor de gezondheid vanwege hun snelle en agressieve groei, maar zijn ook van onschatbare waarde voor onderzoekers die de ontwikkeling van kankercellen bestuderen en op zoek zijn naar meer gerichte behandelingen. In 1982 werd de P19 cellijn gecreëerd toen een 7,5-daags muizenembryo werd getransplanteerd in een testis om tumorgroei te induceren door McBurney en Rogers. Ze isoleerden met succes celculturen uit de primaire tumor die ongedifferentieerde stamcellen bevatten, embryonaal carcinoom P19-cellen genoemd. Deze cellen vertoonden een snelle groei zonder dat er voedingscellen nodig waren en waren gemakkelijk te onderhouden. Daaropvolgende injectie in blastocysten van een andere muizenstam bevestigde de multipotentie van P19 cellen, aangezien weefsels van alle drie de kiemlagen groeiden in de ontvangende muis.

Van de oorspronkelijke P19 cellen zijn verschillende subtype cellijnen afgeleid, waaronder P19S18, P19D3, P19RAC65 en P19C16. Elk van deze subtypes heeft een uniek differentiatievermogen in neuronale cellen of spiercellen wanneer ze behandeld worden met respectievelijk retinoïnezuur of DMSO. Recentere studies hebben cellijnen gegenereerd die afgeleid zijn van gedifferentieerde P19 cellen, die vanwege de pluripotentie van P19 cellen kunnen transformeren in ectoderm, mesoderm en endoderm-achtige cellen.

P19 cellen staan bekend om hun aanhoudende groei in media met serum. Hun differentiatie kan effectief worden gecontroleerd met niet-giftige medicijnen zoals retinoïnezuur, wat leidt tot de ontwikkeling van neuronen, astroglia en microglia. Aan de andere kant differentiëren aggregaten van P19 cellen blootgesteld aan DMSO in endodermale en mesodermale derivaten, waaronder hart- en skeletspieren. P19 cellen zijn ook geschikt voor transfectie met DNA dat codeert voor recombinante genen en stabiele lijnen die deze genen tot expressie brengen kunnen gemakkelijk geïsoleerd worden. Deze vormbaarheid en veelzijdigheid maken P19 cellen een uitstekende bron voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen die de ontwikkelingsbeslissingen van differentiërende pluripotente cellen bepalen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring