Ga naar de inhoud
LCLC-97TM1
Weefsel
Long
Ziekte
Grootcellig carcinoom
Synoniemen
LCLC97TM1

Documenten

LCLC-97TM1

Cell line · Productnummer 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De LCLC-97TM1-cellijn is afgeleid van een grootcellig longcarcinoom (LCLC) en werd vastgesteld met behulp van een xenograftbenadering, specifiek van de eerste naaktmuispassage van een primair grootcellig carcinoom. Deze cellijn vertoont dicht opeengepakte epithelioïde eilandjes in kweek, met celranden die doorgaans niet te onderscheiden zijn bij standaard microscopisch onderzoek. In tegenstelling tot veel andere cellijnen bereiken LCLC-97TM1-culturen over het algemeen geen confluentie, wat kan worden toegeschreven aan hun unieke groeipatronen.

Cytologisch worden LCLC-97TM1-cellen gekenmerkt door een grote, enkele, ronde kern met één of twee prominente nucleoli en een gelijkmatig verdeeld chromatinepatroon. Deze nucleaire morfologie is indicatief voor de agressieve aard die vaak geassocieerd wordt met grootcellig longcarcinoom. De cellijn is ook PAS (Periodic Acid-Schiff) negatief en vertoont geen reactiviteit met Alcian blauw kleuring, wat consistent is met de kenmerken die zijn waargenomen in zowel de oorspronkelijke tumor als de xenograft die is afgeleid van de cellijn.

Chromosomale analyse van LCLC-97TM1 onthult het complexe karyotype, dat typerend is voor grotecelcarcinomen en wijst op aanzienlijke genetische instabiliteit. Dit genetische profiel, gecombineerd met de duidelijke morfologische kenmerken, maakt LCLC-97TM1 een waardevol model voor het bestuderen van de pathobiologie van grootcellig longcarcinoom, met name in de context van tumorigenese, metastase en therapeutische respons in niet-kleincellige longkanker (NSCLC).

Weefsel
Long
Ziekte
Grootcellig carcinoom
Synoniemen
  • LCLC97TM1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
LCLC-97TM1 (Cytion catalogusnummer 300409)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53-expressie
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 105 cellen/cm2
Vloeistofverversing
Om de 3 tot 5 dagen
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
44 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch