Siirry sisältöön
LCLC-97TM1
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Suurisoluinen karsinooma
Synonyymit
LCLC97TM1

Asiakirjat

LCLC-97TM1

Cell line · Tuotenumero 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

LCLC-97TM1-solulinja on peräisin suurisoluisesta keuhkosyövästä (LCLC), ja se on perustettu ksenograft-menetelmällä, erityisesti primaarisen suurisoluisen karsinooman ensimmäisestä alastomasta hiiripassagesta. Tällä solulinjalla on viljelyssä tiheästi pakkautuneita epiteeliomaisia saarekkeita, joiden solurajat ovat tavanomaisessa mikroskooppisessa tutkimuksessa yleensä erottamattomat. Toisin kuin monet muut solulinjat, LCLC-97TM1-viljelmät eivät yleensä saavuta konfluenssia, mikä voi johtua niiden ainutlaatuisesta kasvumallista.

Sytologisesti LCLC-97TM1-soluille on ominaista suuri, yksittäinen, pyöreä tuma, jossa on yksi tai kaksi näkyvää nukleolia, ja tasaisesti jakautunut kromatiinikuvio. Tämä ydinmorfologia on osoitus aggressiivisesta luonteesta, joka usein liittyy suurisoluiseen keuhkosyöpään. Solulinjan on myös todettu olevan PAS-negatiivinen (Periodic Acid-Schiff) eikä se reagoi Alcian-sinivärjäykseen, mikä vastaa sekä alkuperäisessä kasvaimessa että solulinjasta saadussa ksenograftissa havaittuja ominaisuuksia.

LCLC-97TM1:n kromosomianalyysi paljastaa sen monimutkaisen karyotyypin, joka on tyypillinen suurisoluisille karsinoomille ja viittaa merkittävään geneettiseen epävakauteen. Tämä geneettinen profiili yhdistettynä sen erityisiin morfologisiin piirteisiin tekee LCLC-97TM1:stä arvokkaan mallin suurisoluisen keuhkosyövän patobiologian tutkimiseen, erityisesti kasvainten synnyn, etäpesäkkeiden muodostumisen ja ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC) hoitovasteen kannalta.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Suurisoluinen karsinooma
Synonyymit
  • LCLC97TM1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
LCLC-97TM1 (Cytionin luettelonumero 300409)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53-ilmentymä
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 105 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
44 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen