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LCLC-97TM1
Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a grandi cellule
Sinonimi
LCLC97TM1

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LCLC-97TM1

Cell line · Codice prodotto 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare LCLC-97TM1 deriva da un carcinoma polmonare a grandi cellule (LCLC) ed è stata creata utilizzando un approccio di xenotrapianto, in particolare dal primo passaggio su topo nudo di un carcinoma primario a grandi cellule. Questa linea cellulare presenta isolotti epitelioidi densamente impacchettati in coltura, con bordi cellulari che sono tipicamente indistinguibili all'esame microscopico standard. A differenza di molte altre linee cellulari, le colture di LCLC-97TM1 non raggiungono generalmente la confluenza, il che può essere attribuito ai loro modelli di crescita unici.

Dal punto di vista citologico, le cellule LCLC-97TM1 sono caratterizzate da un nucleo grande, singolo e rotondo che contiene uno o due nucleoli prominenti e un pattern di cromatina uniformemente distribuito. Questa morfologia nucleare è indicativa della natura aggressiva spesso associata al carcinoma polmonare a grandi cellule. La linea cellulare è anche nota per essere PAS (Periodic Acid-Schiff) negativa e per non mostrare reattività alla colorazione con blu di Alcian, caratteristiche coerenti con quelle osservate sia nel tumore originale che nello xenotrapianto derivato dalla linea cellulare.

L'analisi cromosomica di LCLC-97TM1 rivela un cariotipo complesso, tipico dei carcinomi a grandi cellule, che suggerisce una significativa instabilità genetica. Questo profilo genetico, combinato con le sue distinte caratteristiche morfologiche, rende LCLC-97TM1 un modello prezioso per lo studio della patobiologia del carcinoma polmonare a grandi cellule, in particolare nel contesto della tumorigenesi, delle metastasi e della risposta terapeutica nel carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC).

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a grandi cellule
Sinonimi
  • LCLC97TM1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
LCLC-97TM1 (numero di catalogo Cytion 300409)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Espressione di P53
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 1 a 3 x 105 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
44 anni
Etnia
Caucasico