Przejdź do treści
LCLC-97TM1
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak wielkokomórkowy
Synonimy
LCLC97TM1

Dokumenty

LCLC-97TM1

Cell line · Numer produktu 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa LCLC-97TM1 wywodzi się z wielkokomórkowego raka płuc (LCLC) i została utworzona przy użyciu metody ksenoprzeszczepu, w szczególności z pierwszego przejścia nago myszy pierwotnego raka wielkokomórkowego. Ta linia komórkowa wykazuje gęsto upakowane wysepki nabłonkowe w hodowli, z granicami komórek, które są zwykle nie do odróżnienia w standardowym badaniu mikroskopowym. W przeciwieństwie do wielu innych linii komórkowych, hodowle LCLC-97TM1 zazwyczaj nie osiągają konfluencji, co można przypisać ich unikalnym wzorcom wzrostu.

Cytologicznie, komórki LCLC-97TM1 charakteryzują się dużym, pojedynczym, okrągłym jądrem, które zawiera jedno lub dwa wyraźne jąderka i równomiernie rozłożony wzór chromatyny. Ta morfologia jądrowa wskazuje na agresywny charakter często związany z wielkokomórkowym rakiem płuc. Linia komórkowa jest również ujemna pod względem PAS (Periodic Acid-Schiff) i nie wykazuje reaktywności z barwieniem błękitem Alciana, co jest zgodne z cechami obserwowanymi zarówno w pierwotnym guzie, jak i ksenoprzeszczepie uzyskanym z tej linii komórkowej.

Analiza chromosomalna LCLC-97TM1 ujawnia jego złożony kariotyp, który jest typowy dla raka wielkokomórkowego i sugeruje znaczną niestabilność genetyczną. Ten profil genetyczny, w połączeniu z jego odrębnymi cechami morfologicznymi, sprawia, że LCLC-97TM1 jest cennym modelem do badania patobiologii wielkokomórkowego raka płuc, szczególnie w kontekście nowotworzenia, przerzutów i odpowiedzi terapeutycznej w niedrobnokomórkowym raku płuc (NSCLC).

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak wielkokomórkowy
Synonimy
  • LCLC97TM1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
LCLC-97TM1 (numer katalogowy Cytion 300409)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Ekspresja P53
Transkryptaza odwrotna
Negatywny

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 105 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
44 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski