Ir diretamente para o conteúdo
LCLC-97TM1
Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de células grandes
Sinónimos
LCLC97TM1

Documentos

LCLC-97TM1

Cell line · Número do produto 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular LCLC-97TM1 é derivada de um carcinoma pulmonar de células grandes (LCLC) e foi estabelecida utilizando uma abordagem de xenoenxerto, especificamente a partir da primeira passagem em ratinho nu de um carcinoma primário de células grandes. Esta linha celular apresenta ilhotas epitelioides densamente compactadas em cultura, com bordos celulares que são tipicamente indistinguíveis sob exame microscópico padrão. Ao contrário de muitas outras linhas celulares, as culturas de LCLC-97TM1 não atingem geralmente a confluência, o que pode ser atribuído aos seus padrões de crescimento únicos.

Citologicamente, as células LCLC-97TM1 são caracterizadas por um núcleo grande, único e redondo que contém um ou dois nucléolos proeminentes e um padrão de cromatina uniformemente distribuído. Esta morfologia nuclear é indicativa da natureza agressiva frequentemente associada ao carcinoma pulmonar de células grandes. A linha celular também é conhecida por ser PAS (Periodic Acid-Schiff) negativa e não apresentar reatividade com a coloração de azul de Alcian, o que é consistente com as caraterísticas observadas tanto no tumor original como no xenoenxerto derivado da linha celular.

A análise cromossómica da LCLC-97TM1 revela o seu cariótipo complexo, que é típico dos carcinomas de células grandes e sugere uma instabilidade genética significativa. Este perfil genético, combinado com as suas caraterísticas morfológicas distintas, faz da LCLC-97TM1 um modelo valioso para o estudo da patobiologia do carcinoma do pulmão de células grandes, particularmente no contexto da tumorigénese, metástases e resposta terapêutica no cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC).

Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de células grandes
Sinónimos
  • LCLC97TM1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
LCLC-97TM1 (número de catálogo Cytion 300409)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Expressão de P53
Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 3 x 105 células/cm2
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
44 anos
Etnia
Caucasiano