Mine otse sisu juurde
LCLC-97TM1
Kude
Kopsud
Haigus
Suurrakuline kartsinoom
Sünonüümid
LCLC97TM1

Dokumendid

LCLC-97TM1

Cell line · Toote number 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LCLC-97TM1 rakuliin on saadud suurrakulisest kopsukartsinoomist (LCLC) ja see on loodud ksenotransplantaadi meetodil, täpsemalt primaarse suurrakulise kartsinoomi esimesest nude hiirepassaažist. Sellel rakuliinil on kultuuris tihedalt pakitud epitelioidsed saarekesed, mille rakupiirid on tavaliselt standardse mikroskoopilise uurimise käigus eristamatud. Erinevalt paljudest teistest rakuliinidest ei saavuta LCLC-97TM1 kultuurid üldiselt konfluentsust, mis võib olla tingitud nende ainulaadsest kasvumustrist.

Tsütoloogiliselt iseloomustab LCLC-97TM1 rakke suur, üksik, ümmargune tuum, mis sisaldab ühte või kahte silmapaistvat nukleooli ja ühtlaselt jaotunud kromatiinimustrit. Selline tuumamorfoloogia viitab agressiivsele iseloomule, mida sageli seostatakse suurrakulise kopsukartsinoomiga. Rakuliinile on iseloomulik, et see on PAS (perioodiline hape-Schiff) negatiivne ja ei reageeri Alcian-sinise värvimisele, mis on kooskõlas nii algse kasvaja kui ka sellest rakuliinist saadud ksenotransplantaadi puhul täheldatud omadustega.

LCLC-97TM1 kromosoomianalüüs näitab selle keerulist karüotüüpi, mis on tüüpiline suurrakulistele kartsinoomidele ja viitab märkimisväärsele geneetilisele ebastabiilsusele. Selline geneetiline profiil koos selle eripäraste morfoloogiliste omadustega muudab LCLC-97TM1 väärtuslikuks mudeliks suurrakulise kopsukartsinoomi patobioloogia uurimiseks, eriti seoses kasvajate tekke, metastaaside tekke ja ravivastusega mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) puhul.

Kude
Kopsud
Haigus
Suurrakuline kartsinoom
Sünonüümid
  • LCLC97TM1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
LCLC-97TM1 (Cytioni katalooginumber 300409)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 ekspressioon
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 105 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
44 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia