Přejít na obsah
LCLC-97TM1
Tkáň
Plíce
Nemoc
Velkobuněčný karcinom
Synonyma
LCLC97TM1

Dokumenty

LCLC-97TM1

Cell line · Číslo výrobku 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie LCLC-97TM1 je odvozena od velkobuněčného karcinomu plic (LCLC) a byla vytvořena pomocí xenograftu, konkrétně z první pasáže primárního velkobuněčného karcinomu na nahé myši. Tato buněčná linie vykazuje v kultuře hustě uspořádané epiteloidní ostrůvky s hranicemi buněk, které jsou při standardním mikroskopickém vyšetření obvykle nerozlišitelné. Na rozdíl od mnoha jiných buněčných linií kultury LCLC-97TM1 obvykle nedosahují konfluence, což lze přičíst jejich jedinečnému způsobu růstu.

Cytologicky se buňky LCLC-97TM1 vyznačují velkým, jediným kulatým jádrem, které obsahuje jedno nebo dvě výrazná jadérka, a rovnoměrně rozloženým chromatinem. Tato jaderná morfologie svědčí o agresivní povaze, která je často spojována s velkobuněčným karcinomem plic. Buněčná linie je rovněž PAS (Periodic Acid-Schiff) negativní a nevykazuje reaktivitu při barvení alciánovou modří, což odpovídá charakteristikám pozorovaným u původního nádoru i xenotransplantátu odvozeného z buněčné linie.

Chromozomální analýza LCLC-97TM1 ukazuje jeho komplexní karyotyp, který je typický pro velkobuněčné karcinomy a naznačuje značnou genetickou nestabilitu. Tento genetický profil v kombinaci s výraznými morfologickými rysy činí z LCLC-97TM1 cenný model pro studium patobiologie velkobuněčného karcinomu plic, zejména v kontextu tumorigeneze, metastazování a léčebné odpovědi u nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC).

Tkáň
Plíce
Nemoc
Velkobuněčný karcinom
Synonyma
  • LCLC97TM1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší

04Identifikátory

Citace
LCLC-97TM1 (katalogové číslo Cytion 300409)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Exprese P53
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 105 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
44 let
Etnická příslušnost
Kavkazský