Preskoči na vsebino
LCLC-97TM1
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Velikocelični karcinom
Sinonimi
LCLC97TM1

Dokumenti

LCLC-97TM1

Cell line · Številka izdelka 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija LCLC-97TM1 izhaja iz velikoceličnega pljučnega karcinoma (LCLC) in je bila vzpostavljena s ksenografskim pristopom, natančneje iz prve pasaže gole miši primarnega velikoceličnega karcinoma. Ta celična linija ima v kulturi gosto zapolnjene epiteloidne otočke z mejami celic, ki jih pri standardnem mikroskopskem pregledu običajno ni mogoče razločiti. Za razliko od številnih drugih celičnih linij kulture LCLC-97TM1 na splošno ne dosežejo konfluence, kar je mogoče pripisati njihovim edinstvenim vzorcem rasti.

Citološko je za celice LCLC-97TM1 značilno veliko, eno samo okroglo jedro, ki vsebuje eno ali dve vidni jedri in enakomerno razporejen vzorec kromatina. Ta jedrska morfologija kaže na agresivno naravo, ki je pogosto povezana z velikoceličnim pljučnim karcinomom. Celična linija je tudi negativna na PAS (Periodic Acid-Schiff) in ni reaktivna pri barvanju z alcianovim modrim, kar je v skladu z značilnostmi, opaženimi v prvotnem tumorju in ksenograftu, pridobljenem iz te celične linije.

Kromosomska analiza LCLC-97TM1 razkriva kompleksen kariotip, ki je značilen za velikocelične karcinome in kaže na precejšnjo genetsko nestabilnost. Zaradi tega genetskega profila in izrazitih morfoloških značilnosti je LCLC-97TM1 dragocen model za preučevanje patobiologije velikocelularnega pljučnega karcinoma, zlasti v kontekstu tumorigeneze, metastaziranja in terapevtskega odziva pri nedrobnoceličnem pljučnem raku (NSCLC).

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Velikocelični karcinom
Sinonimi
  • LCLC97TM1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
LCLC-97TM1 (Cytionova kataloška številka 300409)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Izražanje P53
Reversna transkriptaza
Negativni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 105 celic/cm2
Obnova tekočine
Vsakih 3 do 5 dni
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
44 let
Etnična pripadnost
Kavkaški