
- Chusteczka
- Jajnik
- Choroba
- Komórki jajnika chomika chińskiego, nienowotworowe; zmodyfikowane genetycznie w celu ekspresji FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) na powierzchni komórek
Dokumenty
CHO-FCGR2B
Cell line · Numer produktu 305982
Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich i organizacji non-profit. W przypadku podmiotów komercyjnych ceny...
Dostosowanie / Zalecenia
- CHO-FCGR2BCell line€1,900.00
01Informacje ogólne
- Opis
Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich lub organizacji non-profit. Dla podmiotów komercyjnych cena wynosi około 6 250 euro.
Jeśli reprezentujesz podmiot komercyjny lub nie masz pewności, która kategoria ma zastosowanie, prosimy o kontakt.
Komórki CHO-FCGR2B to rekombinowane komórki jajnika chomika chińskiego (CHO), zmodyfikowane genetycznie w celu stabilnej ekspresji ludzkiego receptora Fc gamma IIB (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B), receptora hamującego o niskim powinowactwie do regionu Fc immunoglobuliny G (IgG). FcγRIIB jest szeroko wyrażany na komórkach B, komórkach dendrytycznych, monocytach, makrofagach i innych populacjach komórek odpornościowych, gdzie pełni funkcję kluczowego negatywnego regulatora aktywacji immunologicznej. Po współzwiązaniu z receptorami aktywującymi FcγRIIB rekrutuje fosfatazy poprzez swój motyw hamujący oparty na tyrozynie (ITIM), hamując w ten sposób dalsze szlaki sygnałowe zaangażowane w odpowiedzi immunologiczne, w których pośredniczą przeciwciała. Zaburzenia regulacji sygnalizacji FcγRIIB są powiązane z chorobami autoimmunologicznymi, przewlekłym stanem zapalnym oraz zmienionymi reakcjami na terapie przeciwciałami.
Komórki CHO-FCGR2B są szeroko stosowane w rozwoju przeciwciał terapeutycznych i badaniach immunologicznych do oceny interakcji, w których pośredniczy Fc, selektywności receptorów oraz mechanizmów sygnalizacji hamującej. Komórki te umożliwiają ilościową ocenę wiązania podklas IgG, strategii inżynierii Fc, interakcji kompleksów immunologicznych oraz modulacji szlaków receptora Fcγ zależnej od przeciwciał. Są one szczególnie cenne w badaniach przesiewowych przeciwciał monoklonalnych, przeciwciał bispecyficznych, białek fuzyjnych Fc oraz leków biologicznych modyfikowanych glikolitycznie, zaprojektowanych w celu zmiany interakcji z FcγRIIB. Modele CHO-FCGR2B są również często stosowane w testach cytometrii przepływowej, badaniach zajętości receptorów, testach reporterowych oraz platformach przesiewowych o wysokiej przepustowości, mających na celu charakterystykę specyficzności i aktywności funkcjonalnej receptorów Fc.
- Chusteczka
- Jajnik
- Choroba
- Komórki jajnika chomika chińskiego, nienowotworowe; zmodyfikowane genetycznie w celu ekspresji FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) na powierzchni komórek
- Zastosowania
- Modyfikacja fragmentu Fc przeciwciał; badania nad receptorami hamującymi Fc; badania nad ADCP; opracowywanie immunoterapii; cytometria przepływowa
02Klasyfikacja
- Organizm
- chomik chiński
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Adhezja i zawiesina
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórka nabłonkowa jajnika
- Czas podwojenia
- ok. 14–16 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- CHO-FCGR2B (nr katalogowy Cytion 305982)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W4
05Ekspresja i podatność
- Receptory ulegające ekspresji
- FCGR2B/CD32B
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
Dla hodowli adherentnych: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Dla hodowli zawiesinowych: CHO Growth Medium A (od InSCREENeX; numer katalogowy InSCREENeX INS-ME-1039)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Dla hodowli przylegających: Uzupełnić pożywkę 5% FBS. Dodać Geneticin (G418-Sulfat), aby osiągnąć końcowe stężenie 0,5 mg/ml.
- Odczynnik dysocjacyjny
- Dla kultur przylegających: Trypsyna-EDTA
- Hodowla komórek w subkulturze
- W przypadku rutynowej hodowli komórek przylegających: Odessać starą pożywkę z przylegających komórek i przemyć je PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki. Po odessaniu PBS, dodać odpowiednią objętość roztworu Trypsyna/EDTA w zależności od rozmiaru naczynia hodowlanego (np. 1 ml dla kolby T25, 3 ml dla kolby T75) i inkubować w temperaturze pokojowej lub 37°C przez 5-10 minut lub do momentu odłączenia się komórek. Monitoruj oderwanie pod mikroskopem i delikatnie postukaj w naczynie, jeśli to konieczne, aby uwolnić komórki. Po odłączeniu dodać pełną pożywkę w celu inaktywacji trypsyny/EDTA, delikatnie ponownie zawiesić komórki i przenieść porcję zawiesiny komórek do nowego naczynia hodowlanego zawierającego świeżą pożywkę. Umieść naczynie w inkubatorze ustawionym na 37°C z 5%CO2 i zmieniaj pożywkę co 2-3 dni.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 5
- Gęstość wysiewu
- 2 do 5 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu rozdzielić komórki w stosunku 1:2 do 1:3 w kolbach T25 i pozwolić komórkom na regenerację po procesie zamrażania i przyleganie (w przypadku hodowli adherentnych) przez co najmniej 24 godziny.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- Dorosły
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Obowiązują umowy z podmiotami zewnętrznymi
- Tak