Gå direkt till innehållet
CHO-FCGR2B
Vävnad
Äggstock
Sjukdom
Äggstocksceller från kinesisk hamster, icke-neoplastiska; genetiskt modifierade för ytuttryck av FcγRIIB (CD32B/FCGR2B)

CHO-FCGR2B

Cell line · Produktnummer 305982

Ansvarsfriskrivning: De priser som anges för cellinjer gäller uteslutande för akademiska kunder och kunder inom ideella organisationer. För kommersiella aktörer gäller pr...

€1,900.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning

Ansvarsfriskrivning: De priser som anges för cellinjer gäller endast akademiska kunder och ideella organisationer. För kommersiella aktörer är priset cirka 6 250 euro.
Om du representerar en kommersiell aktör eller är osäker på vilken kategori som gäller, vänligen kontakta oss.


CHO-FCGR2B-celler är rekombinanta celler från kinesisk hamsteräggstock (CHO) som har modifierats för att stabilt uttrycka human Fc-gamma-receptor IIB (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B), en hämmande receptor med låg affinitet för Fc-regionen av immunglobulin G (IgG). FcγRIIB uttrycks i stor utsträckning på B-celler, dendritiska celler, monocyter, makrofager och andra immuncellspopulationer, där den fungerar som en kritisk negativ regulator av immunaktivering. Vid samtidig aktivering med aktiverande receptorer rekryterar FcγRIIB fosfataser genom sitt immunreceptor-tyrosinbaserade hämmande motiv (ITIM), vilket därmed undertrycker nedströms signalvägar som är involverade i antikroppsmedierade immunresponser. Dysregulering av FcγRIIB-signalering har kopplats till autoimmuna sjukdomar, kronisk inflammation och förändrade reaktioner på antikroppsterapier.

CHO-FCGR2B-celler används i stor utsträckning vid utveckling av terapeutiska antikroppar och inom immunologisk forskning för att utvärdera Fc-medierade interaktioner, receptorselektivitet och hämmande signaleringsmekanismer. Dessa celler möjliggör kvantitativ bedömning av bindning av IgG-subklasser, strategier för Fc-modifiering, interaktioner mellan immunkomplex samt antikroppsberoende modulering av Fcγ-receptorvägar. De är särskilt värdefulla för screening av monoklonala antikroppar, bispecifika antikroppar, Fc-fusionsproteiner och glykoengineerade biologiska läkemedel som är utformade för att förändra FcγRIIB-bindningen. CHO-FCGR2B-modeller används också ofta i flödescytometriska analyser, studier av receptorbeläggning, reporteranalyser och plattformar för högkapacitetsscreening avsedda att karakterisera Fc-receptorspecificitet och funktionell aktivitet.

Vävnad
Äggstock
Sjukdom
Äggstocksceller från kinesisk hamster, icke-neoplastiska; genetiskt modifierade för ytuttryck av FcγRIIB (CD32B/FCGR2B)
Ansökningar
Fc-modifiering av antikroppar; studier av hämmande Fc-receptorer; ADCP-forskning; utveckling av immunterapi; flödescytometri

02Klassificering

Organism
Kinesisk hamster
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Adhärens och suspension
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epithelcell i äggstocken
Fördubblingstid
ca 14–16 timmar

04Identifierare

Källa
CHO-FCGR2B (Cytion-katalognummer 305982)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W4

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
FCGR2B/CD32B

06Hantering och odling

Odlingsmedium

För vidhäftande kulturer: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)

För suspensionskulturer: CHO Growth Medium A (från InSCREENeX; InSCREENeX katalognummer INS-ME-1039)

Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
För vidhäftande kulturer: Komplettera med 5% FBS i mediet. Tillsätt Geneticin (G418-Sulfat) för att uppnå en slutlig koncentration på 0,5 mg/ml.
Dissociationsmedel
För vidhäftande kulturer: Trypsin-EDTA
Vidareodling
För rutinmässig adherent cellkultur: Aspirera det gamla odlingsmediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS för att avlägsna eventuellt kvarvarande medium. Efter aspirering av PBS, tillsätt lämplig volym Trypsin/EDTA-lösning baserat på odlingskärlets storlek (t.ex. 1 ml för en T25-kolv, 3 ml för en T75-kolv) och inkubera vid rumstemperatur eller 37°C i 5-10 minuter, eller tills cellerna lossnar. Övervaka avskiljningen under mikroskop och knacka försiktigt på kärlet om det behövs för att frigöra cellerna. När cellerna har lossnat, tillsätt komplett medium för att inaktivera trypsin/EDTA, resuspendera cellerna försiktigt och överför en alikvot av cellsuspensionen till ett nytt odlingskärl med färskt medium. Placera kärlet i en inkubator inställd på 37°C med 5%CO2 och byt medium var 2-3:e dag.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
2 till 5 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining

Efter upptining, dela upp cellerna i förhållandet 1:2 till 1:3 i T25-kolvar och låt cellerna återhämta sig från frysningsprocessen och fästa (för vidhäftande kulturer) i minst 24 timmar.

Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Vuxen