
- Tissue
- Ovário
- Disease
- Ovário de hamster chinês, não neoplásico; geneticamente modificado para a expressão de FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) na superfície
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CHO-FCGR2B
Cell line · Product number 305982
Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...
01General information
- Description
Aviso legal: Os preços exibidos para as linhagens celulares são exclusivos para clientes acadêmicos ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente €6.250.
Se você representa uma entidade comercial ou não tem certeza de qual categoria se aplica, por favor, entre em contato conosco.
As células CHO-FCGR2B são células recombinantes de ovário de hamster chinês (CHO), modificadas geneticamente para expressar de forma estável o receptor Fc gama IIB humano (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B), um receptor inibitório de baixa afinidade para a região Fc da imunoglobulina G (IgG). O FcγRIIB é amplamente expresso em células B, células dendríticas, monócitos, macrófagos e outras populações de células imunes, onde atua como um regulador negativo essencial da ativação imunológica. Ao interagir conjuntamente com receptores ativadores, o FcγRIIB recruta fosfatases por meio de seu motivo inibitório baseado em tirosina do imunorreceptor (ITIM), suprimindo assim as vias de sinalização a jusante envolvidas nas respostas imunes mediadas por anticorpos. A desregulação da sinalização do FcγRIIB tem sido associada a doenças autoimunes, inflamação crônica e respostas alteradas a terapêuticas com anticorpos.
As células CHO-FCGR2B são amplamente utilizadas no desenvolvimento de anticorpos terapêuticos e na pesquisa imunológica para avaliar interações mediadas por Fc, seletividade de receptores e mecanismos de sinalização inibitórios. Essas células permitem a avaliação quantitativa da ligação de subclasses de IgG, estratégias de engenharia de Fc, interações de complexos imunes e modulação dependente de anticorpos das vias do receptor Fcγ. Elas são particularmente valiosas para a triagem de anticorpos monoclonais, anticorpos bispecíficos, proteínas de fusão Fc e produtos biológicos com engenharia glicídica projetados para alterar a interação com o FcγRIIB. Os modelos CHO-FCGR2B também são frequentemente aplicados em ensaios de citometria de fluxo, estudos de ocupação de receptores, ensaios com repórteres e plataformas de triagem de alto rendimento destinadas a caracterizar a especificidade e a atividade funcional dos receptores Fc.
- Tissue
- Ovário
- Disease
- Ovário de hamster chinês, não neoplásico; geneticamente modificado para a expressão de FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) na superfície
- Applications
- Engenharia da região Fc de anticorpos; estudos sobre receptores Fc inibitórios; pesquisa sobre ADCP; desenvolvimento de imunoterapia; citometria de fluxo
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent and suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Célula epitelial do ovário
- Doubling time
- aprox. 14 a 16 horas
04Identifiers
- Citation
- CHO-FCGR2B (número de catálogo da Cytion 305982)
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W4
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- FCGR2B/CD32B
06Handling and culture
- Culture medium
Para culturas aderentes: DMEM:Ham’s F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Para culturas em suspensão: Meio de Crescimento CHO A (da InSCREENeX; número de catálogo da InSCREENeX INS-ME-1039)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Para culturas aderentes: Suplemente o meio com 5% de FBS. Adicione Geneticin (G418-Sulfat) para atingir uma concentração final de 0,5 mg/mL.
- Dissociation reagent
- Para culturas aderentes: tripsina-EDTA
- Subculturing
- Para cultura de células aderentes de rotina: Aspire o meio de cultura antigo das células aderentes e lave-as com PBS para remover qualquer resíduo de meio. Após aspirar o PBS, adicione o volume apropriado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incube à temperatura ambiente ou a 37 °C por 5 a 10 minutos, ou até que as células se desprendam. Monitore o desprendimento ao microscópio e bata suavemente no recipiente, se necessário, para liberar as células. Uma vez desprendidas, adicione meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspenda delicadamente as células e transfira uma alíquota da suspensão celular para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Coloque o recipiente em uma incubadora ajustada a 37 °C com 5% de CO₂, e troque o meio a cada 2 a 3 dias.
- Split ratio
- 1 a 5
- Seeding density
- 2 a 5 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
Após o descongelamento, divida as células na proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixe que as células se recuperem do processo de congelamento e se fixem (no caso de culturas aderentes) por pelo menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- Adulto
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Third-party agreements apply
- Yes