Skip to content
CHO-FCGR2B
Tissue
รังไข่
Disease
เซลล์รังไข่แฮมสเตอร์จีน, ไม่ใช่เนื้องอก; ตัดต่อพันธุกรรมเพื่อการแสดงออกของ FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) บนพื้นผิวเซลล์

Documents

CHO-FCGR2B

Cell line · Product number 305982

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

€1,900.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

ข้อจำกัดความรับผิดชอบ: ราคาที่แสดงสำหรับสายเซลล์เป็นราคาสำหรับลูกค้าในสถาบันการศึกษา/ไม่แสวงหากำไรเท่านั้น สำหรับหน่วยงานเชิงพาณิชย์ ราคาประมาณ €6,250
หากคุณเป็นตัวแทนของหน่วยงานเชิงพาณิชย์หรือไม่แน่ใจว่าอยู่ในหมวดหมู่ใด กรุณา ติดต่อเรา


เซลล์ CHO-FCGR2B เป็นเซลล์รังไข่แฮมสเตอร์จีน (CHO) ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมให้แสดงออกอย่างคงที่ของตัวรับ Fc gamma receptor IIB ของมนุษย์ (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B) ซึ่งเป็นตัวรับยับยั้งที่มีความจำเพาะต่ำสำหรับบริเวณ Fc ของอิมมูโนโกลบูลิน G (IgG) FcγRIIB แพร่หลายอย่างกว้างขวางบนเซลล์บี เซลล์เดนไดรติก โมโนไซต์ แมคโครฟาจ และประชากรเซลล์ภูมิคุ้มกันอื่นๆ ซึ่งทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมเชิงลบที่สำคัญของการกระตุ้นภูมิคุ้มกัน เมื่อมีการกระตุ้นร่วมกับตัวรับที่กระตุ้น FcγRIIB จะดึงดูดฟอสฟาเตสผ่านโมทีฟยับยั้งที่มีไทโรซีนเป็นพื้นฐานของตัวรับภูมิคุ้มกัน (ITIM) จึงยับยั้งเส้นทางสัญญาณที่อยู่ถัดไปซึ่งเกี่ยวข้องกับการตอบสนองภูมิคุ้มกันที่ผ่านตัวแอนติบอดี การควบคุมสัญญาณของ FcγRIIB ที่ผิดปกติได้ถูกเชื่อมโยงกับโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง การอักเสบเรื้อรัง และการตอบสนองที่เปลี่ยนแปลงไปต่อการรักษาด้วยแอนติบอดี

เซลล์ CHO-FCGR2B ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการพัฒนาแอนติบอดีเพื่อการรักษาและการวิจัยด้านภูมิคุ้มกัน เพื่อประเมินปฏิสัมพันธ์ที่เกิดจาก Fc การเลือกจำเพาะของตัวรับ และกลไกการยับยั้งสัญญาณ เซลล์เหล่านี้รองรับการประเมินเชิงปริมาณของการจับของ IgG แต่ละคลาส กลยุทธ์การวิศวกรรม Fc ปฏิสัมพันธ์ของอิมมูโนคอมเพล็กซ์ และการปรับเปลี่ยนวิถีของตัวรับ Fcγ ที่ขึ้นอยู่กับแอนติบอดี พวกมันมีคุณค่าอย่างยิ่งในการคัดกรองแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล แอนติบอดีชนิดสองเป้า โปรตีนฟิวชั่น Fc และชีววัตถุที่ได้รับการวิศวกรรมเชิงไกลโค (glycoengineered) ที่ออกแบบมาเพื่อเปลี่ยนแปลงการจับกับ FcγRIIB โมเดล CHO-FCGR2B ยังถูกนำไปใช้บ่อยในเทคนิคโฟลไซโตเมทรี การศึกษาการจับกับตัวรับ การทดสอบรีพอร์ตเตอร์ และแพลตฟอร์มการคัดกรองแบบความจุสูงที่มีเป้าหมายเพื่อกำหนดลักษณะเฉพาะและความสามารถในการทำงานของตัวรับ Fc

Tissue
รังไข่
Disease
เซลล์รังไข่แฮมสเตอร์จีน, ไม่ใช่เนื้องอก; ตัดต่อพันธุกรรมเพื่อการแสดงออกของ FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) บนพื้นผิวเซลล์
Applications
วิศวกรรม Fc ของแอนติบอดี; การศึกษาตัวรับ Fc ที่ยับยั้ง; การวิจัย ADCP; การพัฒนาภูมิคุ้มกันบำบัด; การวัดด้วยโฟลไซโตเมทรี

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิวของรังไข่
Doubling time
ประมาณ 14-16 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
CHO-FCGR2B (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305982)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W4

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
เอฟซีจีอาร์2บี/ซีดี32บี

06Handling and culture

Culture medium

สำหรับวัฒนธรรมที่เกาะติด: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)

สำหรับวัฒนธรรมแบบแขวนลอย: สารอาหารสำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ CHO A (จาก InSCREENeX; หมายเลขแคตตาล็อก InSCREENeX INS-ME-1039)

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
สำหรับวัฒนธรรมที่เกาะติด: เสริมอาหารด้วย FBS 5% เพิ่ม Geneticin (G418-Sulfat) เพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้าย 0.5 มก./มล.
Dissociation reagent
สำหรับวัฒนธรรมที่เกาะติด: ไทพ์ซิน-EDTA
Subculturing
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เกาะติดแบบปกติ: ดูดสกัดน้ำเลี้ยงเก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติด และล้างเซลล์ด้วย PBS เพื่อกำจัดน้ำเลี้ยงที่เหลืออยู่หลังจากดูด PBS ออกแล้ว ให้เติมสารละลาย Trypsin/EDTA ในปริมาณที่เหมาะสมตามขนาดของภาชนะเพาะเลี้ยง (เช่น 1 มล. สำหรับขวด T25, 3 มล. สำหรับขวด T75) และทำการบ่มที่อุณหภูมิห้องหรือ 37°C เป็นเวลา 5-10 นาที หรือจนกว่าเซลล์จะหลุดออกจากผนังภาชนะสังเกตการหลุดลอกของเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และเคาะภาชนะเบา ๆ หากจำเป็นเพื่อปล่อยเซลล์ เมื่อเซลล์หลุดออกแล้ว ให้เติมอาหารเลี้ยงเซลล์แบบครบถ้วนเพื่อหยุดการทำงานของ Trypsin/EDTA คนเซลล์เบา ๆ ให้เซลล์กระจายตัวดี แล้วแบ่งเซลล์แขวนลอยใส่หลอดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด วางหลอดในตู้บ่มที่อุณหภูมิ 37°Cพร้อมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% และเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2-3 วัน
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
2 ถึง 5 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery

หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว แบ่งเซลล์ในอัตราส่วน 1:2 ถึง 1:3 ลงในขวดเลี้ยงเชื้อ T25 และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะ (สำหรับเซลล์ที่เกาะติด) เป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ผู้ใหญ่