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CHO-FCGR2B
Gewebe
Eierstock
Krankheit
Ovarialzellen des chinesischen Hamsters, nicht-neoplastisch; gentechnisch verändert zur Expression von FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) auf der Zelloberfläche

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CHO-FCGR2B

Cell line · Artikelnummer 305982

Haftungsausschluss: Die für Zelllinien angegebenen Preise gelten ausschließlich für Kunden aus dem akademischen Bereich bzw. gemeinnützige Einrichtungen. Für kommerzielle Unternehmen gelten die Preise...

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Anpassung / Empfehlungen

Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Haftungsausschluss: Die für Zelllinien angegebenen Preise gelten ausschließlich für akademische/gemeinnützige Kunden. Für kommerzielle Einrichtungen beträgt der Preis ca. 6.250 €.
Wenn Sie eine kommerzielle Einrichtung vertreten oder sich nicht sicher sind, welche Kategorie auf Sie zutrifft, kontaktieren Sie uns bitte .


CHO-FCGR2B-Zellen sind rekombinante Chinese-Hamster-Ovarialzellen (CHO-Zellen), die so verändert wurden, dass sie stabil den humanen Fc-Gamma-Rezeptor IIB (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B) exprimieren, einen inhibitorischen Rezeptor mit geringer Affinität für die Fc-Region von Immunglobulin G (IgG). FcγRIIB wird in großem Umfang auf B-Zellen, dendritischen Zellen, Monozyten, Makrophagen und anderen Immunzellpopulationen exprimiert, wo es als entscheidender negativer Regulator der Immunaktivierung fungiert. Bei gleichzeitiger Bindung an aktivierende Rezeptoren rekrutiert FcγRIIB über sein immunrezeptorbasiertes Tyrosin-basiertes inhibitorisches Motiv (ITIM) Phosphatasen und unterdrückt dadurch nachgeschaltete Signalwege, die an antikörpervermittelten Immunantworten beteiligt sind. Eine Dysregulation der FcγRIIB-Signalübertragung wird mit Autoimmunerkrankungen, chronischen Entzündungen und veränderten Reaktionen auf Antikörpertherapeutika in Verbindung gebracht.

CHO-FCGR2B-Zellen werden in der Entwicklung therapeutischer Antikörper und in der immunologischen Forschung häufig eingesetzt, um Fc-vermittelte Interaktionen, Rezeptorselektivität und inhibitorische Signalmechanismen zu bewerten. Diese Zellen ermöglichen die quantitative Beurteilung der Bindung von IgG-Subklassen, von Fc-Engineering-Strategien, von Immunkomplex-Interaktionen und der antikörperabhängigen Modulation von Fcγ-Rezeptor-Signalwegen. Sie sind besonders wertvoll für das Screening von monoklonalen Antikörpern, bispezifischen Antikörpern, Fc-Fusionsproteinen und glykoengineerten Biologika, die darauf ausgelegt sind, die Bindung an FcγRIIB zu verändern. CHO-FCGR2B-Modelle werden zudem häufig in Durchflusszytometrie-Assays, Studien zur Rezeptorbelegung, Reporter-Assays und Hochdurchsatz-Screening-Plattformen eingesetzt, die darauf abzielen, die Spezifität und funktionelle Aktivität von Fc-Rezeptoren zu charakterisieren.

Gewebe
Eierstock
Krankheit
Ovarialzellen des chinesischen Hamsters, nicht-neoplastisch; gentechnisch verändert zur Expression von FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) auf der Zelloberfläche
Anwendungen
Fc-Modifikation von Antikörpern; Untersuchungen zu inhibitorischen Fc-Rezeptoren; ADCP-Forschung; Entwicklung von Immuntherapien; Durchflusszytometrie

02Klassifizierung

Organismus
Chinesischer Hamster
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzelle des Eierstocks
Verdopplungszeit
ca. 14–16 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
CHO-FCGR2B (Cytion-Katalognummer 305982)
NCBI-Steuer-ID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W4

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
FCGR2B/CD32B

06Handhabung und Kultur

Nährmedium

Für adhärente Kulturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)

Für Suspensionskulturen: CHO-Wachstumsmedium A (von InSCREENeX; InSCREENeX-Katalognummer INS-ME-1039)

Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Für adhärente Kulturen: Ergänzen Sie das Medium mit 5% FBS. Geneticin (G418-Sulfat) hinzufügen, um eine Endkonzentration von 0,5 mg/ml zu erreichen.
Dissoziationsreagenz
Für adhärente Kulturen: Trypsin-EDTA
Subkultivierung
Für die routinemäßige adhärente Zellkultur: Saugen Sie das alte Kulturmedium von den adhärenten Zellen ab und waschen Sie sie mit PBS, um das restliche Medium zu entfernen. Nach dem Absaugen des PBS die entsprechende Menge Trypsin/EDTA-Lösung je nach Größe des Kulturgefäßes zugeben (z. B. 1 ml für einen T25-Kolben, 3 ml für einen T75-Kolben) und bei Raumtemperatur oder 37 °C 5-10 Minuten lang inkubieren, oder bis sich die Zellen ablösen. Überwachen Sie die Ablösung unter dem Mikroskop und klopfen Sie bei Bedarf vorsichtig auf das Gefäß, um die Zellen freizusetzen. Sobald sich die Zellen abgelöst haben, fügen Sie vollständiges Medium hinzu, um das Trypsin/EDTA zu inaktivieren, resuspendieren Sie die Zellen vorsichtig und transferieren Sie einen aliquoten Teil der Zellsuspension in ein neues Kulturgefäß mit frischem Medium. Stellen Sie das Gefäß in einen Inkubator, der auf 37°C mit 5%CO2 eingestellt ist, und wechseln Sie das Medium alle 2-3 Tage.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
2 bis 5 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen

Nach dem Auftauen die Zellen im Verhältnis 1:2 bis 1:3 in T25-Kolben aufteilen und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen (bei adhärenten Kulturen).

Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Erwachsener