İçeriğe atla
CHO-FCGR2B
Doku
Yumurtalık
Hastalık
Çin hamster yumurtalık hücresi, neoplastik olmayan; FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) yüzey ekspresyonu için genetik olarak modifiye edilmiş

CHO-FCGR2B

Cell line · Ürün numarası 305982

Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyatlar...

€1,900.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyat yaklaşık 6.250 €'dur.
Ticari bir kuruluşu temsil ediyorsanız veya hangi kategoriye girdiğinizden emin değilseniz, lütfen bizimle iletişime geçin.


CHO-FCGR2B hücreleri, immünoglobulin G'nin (IgG) Fc bölgesi için düşük afiniteli bir inhibe edici reseptör olan insan Fc gama reseptörü IIB'yi (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B) stabil bir şekilde eksprese etmek üzere tasarlanmış rekombinant Çin hamster yumurtalık (CHO) hücreleridir. FcγRIIB, B hücreleri, dendritik hücreler, monositler, makrofajlar ve diğer immün hücre popülasyonlarında yaygın olarak eksprese edilir ve burada immün aktivasyonun kritik bir negatif düzenleyicisi olarak işlev görür. Aktive edici reseptörlerle birlikte bağlandığında, FcγRIIB, immün reseptör tirozin bazlı inhibe edici motifi (ITIM) aracılığıyla fosfatazları devreye sokar ve böylece antikor aracılı immün yanıtlarda rol oynayan aşağı akış sinyal yolaklarını baskılar. FcγRIIB sinyal iletiminin düzensizliği, otoimmün hastalıklar, kronik inflamasyon ve antikor terapilerine karşı değişmiş yanıtlarla ilişkilendirilmiştir.

CHO-FCGR2B hücreleri, Fc aracılı etkileşimleri, reseptör seçiciliğini ve inhibe edici sinyal mekanizmalarını değerlendirmek amacıyla terapötik antikor geliştirme ve immünoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, IgG alt sınıfı bağlanmasının, Fc mühendisliği stratejilerinin, immün kompleks etkileşimlerinin ve Fcγ reseptör yolaklarının antikora bağlı modülasyonunun kantitatif değerlendirmesini destekler. Bu hücreler, monoklonal antikorların, bispesifik antikorların, Fc füzyon proteinlerinin ve FcγRIIB bağlanmasını değiştirmek üzere tasarlanmış gliko-mühendislik biyolojik ürünlerin taranmasında özellikle değerlidir. CHO-FCGR2B modelleri ayrıca, Fc reseptör spesifikliğini ve fonksiyonel aktivitesini karakterize etmeyi amaçlayan akış sitometrisi testlerinde, reseptör doluluk çalışmalarında, raportör testlerinde ve yüksek verimli tarama platformlarında sıklıkla uygulanmaktadır.

Doku
Yumurtalık
Hastalık
Çin hamster yumurtalık hücresi, neoplastik olmayan; FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) yüzey ekspresyonu için genetik olarak modifiye edilmiş
Uygulamalar
Antikor Fc mühendisliği; inhibe edici Fc reseptörü çalışmaları; ADCP araştırmaları; immünoterapi geliştirme; akış sitometrisi

02Sınıflandırma

Canlı
Çin hamsteri
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Yumurtalığın epitel hücresi
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 14-16 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CHO-FCGR2B (Cytion katalog numarası 305982)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W4

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
FCGR2B/CD32B

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri

Yapışık kültürler için: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)

Süspansiyon kültürleri için: CHO Büyüme Ortamı A (InSCREENeX'ten; InSCREENeX katalog numarası INS-ME-1039)

Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Yapışık kültürler için: Ortamı %5 FBS ile takviye edin. Nihai konsantrasyonu 0,5 mg/mL elde etmek için Geneticin (G418-Sulfat) ekleyin.
Ayrıştırma reaktifi
Yapışık kültürler için: Tripsin-EDTA
Alt kültür oluşturma
Rutin yapışık hücre kültürü için: Yapışık hücrelerden eski kültür ortamını aspire edin ve kalan ortamı çıkarmak için PBS ile yıkayın. PBS'yi aspire ettikten sonra kültür kabı boyutuna göre uygun hacimde Tripsin/EDTA solüsyonu ekleyin (örn. T25 şişesi için 1 ml, T75 şişesi için 3 ml) ve oda sıcaklığında veya 37°C'de 5-10 dakika veya hücreler ayrılana kadar inkübe edin. Mikroskop altında ayrılmayı izleyin ve gerekirse hücreleri serbest bırakmak için kaba hafifçe vurun. Hücreler ayrıldıktan sonra Tripsin/EDTA'yı inaktive etmek için tam ortam ekleyin, hücreleri nazikçe yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunun bir alikotunu taze ortam içeren yeni bir kültür kabına aktarın. Kabı %5CO2 ile 37°C'ye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin ve ortamı 2-3 günde bir değiştirin.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 ila 5 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma

Çözüldükten sonra, hücreleri 1:2 ila 1:3 oranında T25 flasklara bölün ve hücrelerin donma sürecinden kurtulmasına ve en az 24 saat boyunca yapışmasına (yapışkan kültürler için) izin verin.

Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yetişkin