Preskoči na vsebino
CHO-FCGR2B
Tkivo
Jajčnik
Bolezen
Jajčniki kitajskega hrčka, ne-neoplastični; gensko spremenjeni za površinsko izražanje FcγRIIB (CD32B/FCGR2B)

Dokumenti

CHO-FCGR2B

Cell line · Številka izdelka 305982

Opozorilo: Cene, prikazane za celične linije, veljajo izključno za akademske/neprofitne stranke. Za komercialne subjekte veljajo cene...

€1,900.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis

Opomba: Cene, prikazane za celične linije, veljajo izključno za akademsko in neprofitno javnost. Za komercialne subjekte znaša cena približno 6.250 €.
Če zastopate komercialni subjekt ali niste prepričani, katera kategorija velja za vas, vas prosimo, da nas kontaktirate.


Celice CHO-FCGR2B so rekombinantne celice jajčnikov kitajskega hrčka (CHO), ki so bile genetsko spremenjene za stabilno izražanje človeškega Fc-gama receptorja IIB (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B), inhibitornega receptorja z nizko afiniteto za Fc-regijo imunoglobulina G (IgG). FcγRIIB se na splošno izraža na B-celicah, dendritskih celicah, monocitih, makrofagih in drugih populacijah imunskih celic, kjer deluje kot ključni negativni regulator imunskega aktiviranja. Ob sočasni vezavi z aktivirajočimi receptorji FcγRIIB prek svojega imunoreceptornega tirozinskega inhibitornega motiva (ITIM) rekrutira fosfataze, s čimer zavira nadaljnje signalne poti, vključene v imunski odziv, posredovan s protitelesi. Motena regulacija signalizacije FcγRIIB je povezana z avtoimunskimi boleznimi, kroničnim vnetjem in spremenjenimi odzivi na terapije z antitelesi.

Celice CHO-FCGR2B se pogosto uporabljajo pri razvoju terapevtskih protiteles in imunoloških raziskavah za oceno interakcij, posredovanih s Fc, selektivnosti receptorjev in inhibicijskih signalnih mehanizmov. Te celice omogočajo kvantitativno oceno vezave podrazredov IgG, strategij inženiringa Fc, interakcij imunskih kompleksov in protitelesno odvisne modulacije poti receptorjev Fcγ. So še posebej dragocene za presejanje monoklonskih protiteles, bispecifičnih protiteles, Fc-fuzijskih proteinov in glikoinženirskih bioloških zdravil, zasnovanih za spreminjanje vezave FcγRIIB. Modeli CHO-FCGR2B se pogosto uporabljajo tudi v testih s pretočno citometrijo, študijah zasedenosti receptorjev, testih z markerji in platformah za presejanje z visoko zmogljivostjo, namenjenih opredelitvi specifičnosti in funkcionalne aktivnosti Fc-receptorjev.

Tkivo
Jajčnik
Bolezen
Jajčniki kitajskega hrčka, ne-neoplastični; gensko spremenjeni za površinsko izražanje FcγRIIB (CD32B/FCGR2B)
Uporaba
Inženiring Fc-deleža protiteles; raziskave inhibitornih Fc-receptorjev; raziskave ADCP; razvoj imunoterapije; pretočna citometrija

02Razvrstitev

Organizem
kitajski hrček
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This CHO cell line contains an FCGR2B expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijska celica jajčnika
Čas podvojitve
približno 14–16 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
CHO-FCGR2B (kataloška številka Cytion 305982)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W4

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
FCGR2B/CD32B

06Ravnanje in gojenje

Gojišče

Za adherentne kulture: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)

Za suspenzijske kulture: CHO Growth Medium A (od podjetja InSCREENeX; kataloška številka podjetja InSCREENeX: INS-ME-1039)

Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Za adherentne kulture: V primeru adhezivne kulture: gojišče dopolnite s 5 % FBS. Dodajte geneticin (G418-Sulfat), da dosežete končno koncentracijo 0,5 mg/ml.
Reagenca za disociacijo
Za adherentne kulture: Tripsin-EDTA
Preusmeritev v drugo kulturo
Za rutinsko gojenje adherentnih celic: Iz adherentnih celic odsesajte staro gojišče in jih sperite s PBS, da odstranite preostalo gojišče. Po odsesanju PBS dodajte ustrezno količino raztopine tripsina/EDTA glede na velikost posode za gojenje (npr. 1 ml za bučko T25, 3 ml za bučko T75) in inkubirajte pri sobni temperaturi ali 37 °C 5 do 10 minut ali dokler se celice ne ločijo. Odlepitev spremljajte pod mikroskopom in po potrebi nežno potrkajte posodo, da se celice sprostijo. Ko se celice ločijo, dodajte popolno gojišče, da inaktivirate tripsin/EDTA, nežno ponovno suspendirajte celice in prenesite alikvot celične suspenzije v novo posodo za gojenje s svežim gojiščem. Posodo postavite v inkubator, nastavljen na 37 °C s 5 %CO2, in gojišče zamenjajte vsake 2 do 3 dni.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
2 do 5 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju

Po odmrznitvi celice razdelite v razmerju 1:2 do 1:3 v bučke T25 in pustite, da si celice opomorejo od postopka zamrzovanja in da se zlepijo (za lepljive kulture) vsaj 24 ur.

Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Odrasli