İçeriğe atla

Medya ve Reaktifler

40 ürünler

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

vergi ve kargo hariç

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

vergi ve kargo hariç

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

vergi ve kargo hariç

DMEM:Ham's F12 (1:1), ağırlıkça: 3,1 g/L glikoz, ağırlıkça: 2,5 mM L-glutamin, ağırlıkça: 15 mM HEPES, ağırlıkça: 0,5 mM sodyum piruvat, ağırlıkça: 1,2 g/L NaHCO₃

DMEM:Ham's F12, biyolojik araştırmalar için hücre kültüründe yaygın olarak tanınan ve sıklıkla kullanılan bir bazal besiyeridir. Özellikle Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye edildiğinde, çeşitli memeli hücre hatlarının büyümesi için temel bir besin kaynağı görevi görür. Bu benzersiz formülasyon, Dulbecco'nun Modifiye Eagle Ortamı (DMEM) ile Ham's F-12'yi (Ham's Besin Karışımı F-12) tam olarak 1:1 oranında birleştirir. L-glutamin ilavesi, bileşimini daha da zenginleştirir. Eagle'ın Minimal Esansiyel Ortamı'ndan (EMEM) türetilen DMEM, önceki versiyonuna kıyasla daha yüksek konsantrasyonda amino asit ve vitamin içerir. Buna karşılık, Ham'ın F-12'si, Ham'ın F-10 ortamını temel alır ve tamamlayıcı bir dizi temel bileşen sağlar. Optimum hücre büyümesini desteklemek için, DMEM:Ham's F12'ye tipik olarak %5-10 konsantrasyonda FBS ilave edilmesi yaygın bir uygulamadır. Bu ilave, besiyerinde hücresel gelişim için hayati önem taşıyan büyüme hormonları, lipitler ve proteinlerin bulunmaması nedeniyle gereklidir. DMEM:Ham's F12, bir pH tampon sistemi içerir ve genellikle bir pH göstergesi olan fenol kırmızısı ile takviye edilir. DMEM:Ham's F12'de veya bikarbonat tampon sistemini kullanan herhangi bir besiyerinde kültürlenen hücreler, uygun pH seviyelerini korumak için %5-10 oranında kontrollü bir CO₂ ortamına ihtiyaç duyar. Kalite Kontrol • Steril filtrelenmiş Saklama ve Raf Ömrü • Işıktan korunarak +2°C ile +8°C arasında saklayınız. • Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6–8 hafta içinde kullanın. Nakliye Koşulları • Ortam sıcaklığı Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için donmasını ve sık sık +37°C'ye ısıtılmasını önleyin. • Besiyerini 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı ayırın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına ısıtın. Bileşim Kategori Bileşenler Konsantrasyon (mg/L) Amino Asitler Glisin 18,75 L-alanin 4,45 L-Arginin HCl 147,50 L-Asparagin H₂O 7,50 L-Aspartik Asit 6,65 L-Sistein HCl H₂O 17,56 L-Sistin 2 HCl 31,29 L-Glutamik Asit 7,35 L-Glutamin 365,00 L-Histidin HCl H₂O 31,48 L-İzolösin 54,47 L-Lösin 59,05 L-Lizin HCl 91,25 L-Metiyonin 17,24 L-Fenilalanin 35,48 L-Prolin 17,25 L-Serin 26,25 L-treonin 53,45 L-Triptofan 9,02 L-Tirozin 2 Na 2 H₂O 55,79 L-Valin 52,85 Vitaminler D-Biotin 0,0035 Kolin Klorür 8,98 D-Kalsiyum Pantotenat 2,24 Folik Asit 2,66 Miyo-inositol 12,60 Nikotinamid 2,02 Piridoksin HCl 0,031 Piridoksal HCl 2,00 Riboflavin 0,219 Tiamin HCl 2,17 B12 vitamini 0,68 İnorganik Tuzlar CaCl₂·2H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄ 7 H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂ 6 H₂O 61,20 MgSO₄ 7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2H₂O 70,87 ZnSO₄ 7 H₂O 0,432 Diğer Bileşenler D-Glikoz 3151,00 Hipoksantin 2,40 HEPES 3574,50 Linoleik Asit 0,042 Lipoik Asit 0,105 Fenol Kırmızısı Sodyum Tuzu 8,63 Putresin 2 HCl 0,081 Sodyum Piruvat 55,00 Timidin 0,365

€25.00

vergi ve kargo hariç

DMEM, ağırlıkça: 4,5 g/L glikoz, ağırlıkça: 4 mM L-glutamin, ağırlıkça: 3,7 g/L NaHCO₃, ağırlıkça: 1,0 mM sodyum piruvat

DMEM (Dulbecco'nun Modifiye Eagle Ortamı), biyolojik araştırmalarda çok çeşitli memeli hücrelerinin büyümesini desteklemek üzere tasarlanmış, son derece çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir bazal besiyeridir. Birincil fibroblastlar, nöronlar, glial hücreler, HUVEC'ler, düz kas hücrelerinin yanı sıra HeLa, 293, Cos-7 ve PC-12 gibi yaygın hücre hatlarının kültürlenmesi için ideal bir besiyeri görevi görür. DMEM'i diğer besiyerlerinden ayıran en önemli özellik, benzersiz bileşimidir. Orijinal Eagle's Minimal Essential Medium'a kıyasla, amino asit ve vitamin konsantrasyonunda dört kat artış içerir. Başlangıçta düşük glikoz (1 g/L) ve sodyum piruvat ile geliştirilen DMEM, sodyum piruvat olsun ya da olmasın, genellikle daha yüksek glikoz seviyeleriyle kullanılır. Özellikle DMEM, protein, lipit veya büyüme faktörleri içermediğinden takviye edilmesi gerekir. Optimum büyüme elde etmek için yaygın bir yaklaşım, DMEM'e %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) eklemektir. Ayrıca, DMEM bir sodyum bikarbonat tampon sistemi kullanır ve fizyolojik pH değerini korumak için %5-10 CO₂ içeren bir ortam gerektirir. Dulbecco'nun Modifiye Eagle Ortamı (DMEM), hücre ve doku kültürü için tanımlanmış ortamlar arasında büyük saygı görür ve çeşitli yapışkan hücre fenotiplerinin büyüme ihtiyaçlarını karşılar. Dulbecco modifikasyonu olarak bilinen geliştirilmiş ek formülasyon sayesinde, 1950'lerde tavuk hücrelerini kültüre etmek için geliştirilen orijinal Eagle Ortası'nı geride bırakır. Bu modifikasyon, seçilmiş amino asitlerin ve vitaminlerin içeriğini orijinal ortaya kıyasla dört katına kadar önemli ölçüde artırır. Hücre kültürü alanında DMEM, birincil hücreler, kök hücreler ve dönüştürülmüş hücreler dahil olmak üzere farklı hücre tipleri için bir büyüme ortamı olarak hayati bir rol oynar. Araştırmacılar ayrıca, ilaç keşfi, doku mühendisliği ve hücre sinyal yolaklarının incelenmesi gibi çok çeşitli araştırma uygulamaları için DMEM’in modifiye edilmiş versiyonunu kullanmaktadır. Kalite Kontrol • Steril filtrelenmiş Saklama ve Raf Ömrü • Işıktan korunarak +2°C ile +8°C arasında saklayınız. • Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6–8 hafta içinde kullanın. Nakliye Koşulları • Ortam sıcaklığı Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için donmasını ve sık sık +37°C'ye ısıtılmasını önleyin. • Besiyerini 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı ayırın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına ısıtın. Bileşim Kategori Bileşenler Konsantrasyon (mg/L) Amino Asitler Glisin 30,00 L-Arginin HCl 84,00 L-Sistin 2 HCl 62,57 L-Glutamin 584,00 L-Histidin HCl H₂O 42,00 L-İzolösin 105,00 L-Lösin 105,00 L-Lizin HCl 146,00 L-Metiyonin 30,00 L-Fenilalanin 66,00 L-Serin 42,00 L-Treonin 95,00 L-Triptofan 16,00 L-Tirozin 2 Na 2H₂O 103,79 L-Valin 94,00 Vitaminler Kolin klorür 4,00 D-Kalsiyum Pantotenat 4,00 Folik asit 4,00 Miyo-İnositol 7,20 Nikotinamid 4,00 Piridoksal HCl 4,00 Riboflavin 0,40 Tiamin HCl 4,00 İnorganik Tuzlar CaCl₂·2H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄ 7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO3 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Diğer Bileşenler D-Glikoz 4500,00 Fenol Kırmızısı Sodyum Tuzu 15,90 Sodyum Piruvat 110,00

€25.00

vergi ve kargo hariç

EMEM (MEM Eagle), ağırlıkça: 2 mM L-glutamin, ağırlıkça: 2,2 g/L NaHCO₃, ağırlıkça: EBSS

Eagle’ın Asgari Temel Besiyeri (EMEM), çok çeşitli memeli hücrelerinin, özellikle de yapışkan hücre hatlarının kültivasyonu için en yaygın olarak kullanılan bazal besiyerlerinden biridir. İlk olarak Harry Eagle tarafından geliştirilen bu klasik formülasyon, standart kültür koşulları altında hem birincil hücrelerin hem de yerleşik hücre hatlarının büyümesini desteklemek için gerekli olan esansiyel amino asitleri, vitaminleri ve inorganik tuzları içerir. Kullanıma hazır, steril filtrelenmiş bu sıvı formülasyon, Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukoz (1,0 g/L) ve 2,2 g/L sodyum bikarbonat (NaHCO3) ile takviye edilmiştir; bu da onu CO₂ kontrollü inkübatör atmosferinde (tipik olarak %5 CO₂) kullanım için uygun hale getirir. Ürüne dahil edilen fenol kırmızısı, bir pH göstergesi görevi görür ve hücre kültürü sırasında besiyeri durumunun kolayca görsel olarak izlenmesini sağlar. Temel Özellikler • Earle’s Dengeli Tuz Çözeltisi (EBSS) içeren klasik Eagle’s MEM formülasyonu • 2 mM L-glutamin içerir – hemen kullanıma hazırdır • 2,2 g/L sodyum bikarbonat – %5 CO₂ inkübasyonu için tamponlanmıştır • Birincil karbon kaynağı olarak D-glikoz (1,0 g/L) içerir • pH göstergesi olarak fenol kırmızısı içerir • HEPES ve sodyum piruvat içermez • Steril filtrelenmiş sıvı besiyeri, kullanıma hazır • pH 7,0 – 7,6 Tipik Uygulamalar EMEM, HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 ve birçok birincil hücre dahil olmak üzere çok çeşitli memeli hücre hatlarının kültürlenmesini destekler. Yaygın uygulamalar şunlardır: • Yapışkan hücre hatlarının rutin bakımı ve çoğaltılması • Virüs çoğaltma ve aşı üretimi iş akışları • Sitotoksisite ve biyoanaliz uygulamaları • Transfeksiyon ve protein ekspresyonu çalışmaları • Hücre biyolojisi ve moleküler biyoloji alanındaki temel araştırmalar Optimum hücre büyümesi için EMEM'e tipik olarak %5–10 fetal sığır serumu (FBS) ve hücre hattına bağlı olarak esansiyel olmayan amino asitler (NEAA) ile penisilin/streptomisin gibi antibiyotikler eklenir. Kullanım ve Saklama Açılmamış şişeyi +2 °C ile +8 °C arasında, ışıktan korunarak saklayınız. Açıldıktan sonra aseptik koşullar altında kullanınız. Çözeltideki L-glutamin kademeli olarak bozulur; en iyi performans için ortamı açıldıktan sonra 4 hafta içinde kullanmanızı veya daha uzun süre saklanacaksa kullanımdan önce taze L-glutamin eklemenizi öneririz. Ortamı hücrelere eklemeden önce 37 °C'ye ısıtın. Kalite Sıkı kalite standartları altında üretilmiştir. Hücre kültürü uygulamalarında tutarlı performans sağlamak için her parti sterillik, pH, osmolalite ve endotoksin düzeyleri açısından test edilir. Ürün Özellikleri Özellik Ayrıntı Ürün türüMEM Ürün kategorisiHücre kültürü besiyerleri BiçimSıvı SterilEvet Boyut500 ml L-GlutaminL-glutamin (2 mM) içerir GlikozGlikoz içerir (1,0 g/L) Sodyum bikarbonatNaHCO3 (2,2 g/L) içeren HEPESHEPES içermeyen Sodyum piruvatSodyum piruvat içermeyen Fenol kırmızısıFenol kırmızısı içeren Tuz çözeltisiEarle’ın Dengeli Tuz Çözeltisi (EBSS) pH7,0 – 7,6 Endotoksin içeriğiBelirtilmemiştir Saklama+2 °C ila +8 °C Formülasyon (Litre Başına Bileşim)

€25.00

vergi ve kargo hariç

CM-1 Dondurma Ortamı - 100 ml

Cytion’un Freeze Medium CM-1 ürünü, çözülme sonrası en yüksek düzeyde hücre canlılığı ve işlevselliğini sağlamak üzere tasarlanmış, son teknoloji ürünü bir kriyoprezervasyon ortamıdır. Bu çok yönlü ortam, hem insan hem de hayvan hücreleri dahil olmak üzere geniş bir hücre yelpazesi için uygundur; bu özelliği sayesinde çeşitli araştırma uygulamaları için vazgeçilmez bir araçtır. Kriyoprotektanlar ve temel besin maddelerinin titizlikle dengelenmiş bir kombinasyonuyla formüle edilen Freeze Medium CM-1, dondurma işlemi sırasında buz kristali oluşumunu ve hücresel stresi en aza indirerek hücresel bütünlüğü korur. Freeze Medium CM-1’in başlıca özellikleri şunlardır: • Geniş Uyumluluk: Birincil hücreler, kök hücreler ve yerleşik hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli hücre tipleri için etkilidir. • Yüksek Canlılık: Çözülme sonrası hücre geri kazanımını ve canlılığını en üst düzeye çıkarmak üzere optimize edilmiştir; bu sayede güvenilir deney sonuçları sağlanır. • Kullanıma Hazır: Hemen uygulanabilecek şekilde hazırlanmış ve sterilize edilmiştir; bu sayede hazırlık süresini ve kontaminasyon riskini azaltır. • Geliştirilmiş Kararlılık: Standart kriyoprezervasyon koşulları altında tutarlı performans gösterir ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlar. • Uzun Raf Ömrü: CM-1, buzdolabında bir yıla kadar saklanabilen, serum içeren, kullanıma hazır bir kriyoprezervasyon ortamıdır. Hücreleri Dondurmak İçin CM-1'in Kullanımı CM-1'i hem yapışkan hem de süspansiyon hücrelerini dondurmak için kullanmak üzere aşağıdaki adımları izleyin: • Yapışkan hücreler için, hücreleri yıkayın ve kültür substratından ayırın. Süspansiyon hücreleri için doğrudan bir sonraki adıma geçin. • Hücrelerin uygun konsantrasyonda olduğundan emin olmak için sayın. • Hücreleri santrifüjleyerek çökeltin, ardından CM-1 dondurma ortamında yeniden süspansiyon haline getirin. • Yeniden süspansiyon haline getirilen hücreleri kriyoşişelere aktarın. • Hücreleri uzun süreli depolamaya aktarmadan önce yavaş dondurma yöntemi kullanın. Yöntem Açıklama Adımlar ❄️ Manuel Dondurma Hücre canlılığını sağlamak için kademeli sıcaklık düşürmeyi içeren adım adım bir yöntem. 1️⃣ Hücreleri dondurma ortamına koyun ve 4°C'lik bir dondurucuda 40 dakika bekletin. 2️⃣ -80°C'lik bir dondurucuya aktarın ve 24 saat bekletin. 3️⃣ Uzun süreli saklama için hücreleri sıvı azot içinde saklayın. ❄️ Mr. Frosty'nin Kullanımı Elektrik gücü olmadan kontrollü dondurma hızları sağlayan kullanışlı bir cihaz. 1️⃣ Hücreleri dondurma ortamı içeren kriyo şişelerde hazırlayın. 2️⃣ Kriyo şişeleri Mr. Frosty kabına yerleştirin. 3️⃣ Sıvı azota aktarmadan önce 24 saat boyunca -80°C'de saklayın. ❄️ Kontrollü Hızlı Dondurucu Thermo Fisher veya diğer üreticiler tarafından kontrollü sıcaklık düşürme için tasarlanmış yüksek hassasiyetli bir dondurucu. 1️⃣ Cihazı, sıcaklığı kademeli olarak düşürecek şekilde programlayın. 2️⃣ Hazırlanan hücreleri dondurucuya yerleştirin. 3️⃣ Dondurma döngüsü tamamlandıktan sonra hücreleri sıvı azota aktarın. • Kriyoşişeleri, uzun süreli saklama için -130°C'nin altındaki sıcaklıklarda veya sıvı azot içinde saklayın. Malzemeler • FBS, DMSO, Glikoz, Tuzlar içerir • Tamponlama kapasitesi: pH = 7,2 ila 7,6 Cytion’un CM-1 Dondurma Ortamı, kriyoprezervasyon için güvenilir bir çözüm sunarak, çok çeşitli araştırma uygulamaları için çözüldükten sonra yüksek hücre canlılığı ve işlevselliği sağlar.

€99.00

vergi ve kargo hariç

Dondurma Ortamı CM-1 - 50 ml

Cytion’un Freeze Medium CM-1 ürünü, çözülme sonrası en yüksek düzeyde hücre canlılığı ve işlevselliğini sağlamak üzere tasarlanmış, son teknoloji ürünü bir kriyoprezervasyon ortamıdır. Bu çok yönlü ortam, hem insan hem de hayvan hücreleri dahil olmak üzere geniş bir hücre yelpazesi için uygundur; bu özelliği sayesinde çeşitli araştırma uygulamaları için vazgeçilmez bir araçtır. Kriyoprotektanlar ve temel besin maddelerinin titizlikle dengelenmiş bir kombinasyonuyla formüle edilen Freeze Medium CM-1, dondurma işlemi sırasında buz kristali oluşumunu ve hücresel stresi en aza indirerek hücresel bütünlüğü korur. Freeze Medium CM-1’in başlıca özellikleri şunlardır: • Geniş Uyumluluk: Birincil hücreler, kök hücreler ve yerleşik hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli hücre tipleri için etkilidir. • Yüksek Canlılık: Çözülme sonrası hücre geri kazanımını ve canlılığını en üst düzeye çıkarmak üzere optimize edilmiştir; bu sayede güvenilir deney sonuçları sağlanır. • Kullanıma Hazır: Hemen uygulanabilecek şekilde hazırlanmış ve sterilize edilmiştir; bu sayede hazırlık süresini ve kontaminasyon riskini azaltır. • Geliştirilmiş Kararlılık: Standart kriyoprezervasyon koşulları altında tutarlı performans gösterir ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlar. • Uzun Raf Ömrü: CM-1, buzdolabında bir yıla kadar saklanabilen, serum içeren, kullanıma hazır bir kriyoprezervasyon ortamıdır. Hücreleri Dondurmak İçin CM-1'in Kullanımı CM-1'i hem yapışkan hem de süspansiyon hücrelerini dondurmak için kullanmak üzere aşağıdaki adımları izleyin: • Yapışkan hücreler için, hücreleri yıkayın ve kültür substratından ayırın. Süspansiyon hücreleri için doğrudan bir sonraki adıma geçin. • Hücrelerin uygun konsantrasyonda olduğundan emin olmak için sayın. • Hücreleri santrifüjleyerek çökeltin, ardından CM-1 dondurma ortamında yeniden süspansiyon haline getirin. • Yeniden süspansiyon haline getirilen hücreleri kriyo şişelere aktarın. • Hücreleri uzun süreli depolamaya aktarmadan önce yavaş dondurma yöntemi kullanın. Yöntem Açıklama Adımlar ❄️ Manuel Dondurma Hücre canlılığını sağlamak için kademeli sıcaklık düşürmeyi içeren adım adım bir yöntem. 1️⃣ Hücreleri dondurma ortamına koyun ve 4°C'lik bir dondurucuda 40 dakika bekletin. 2️⃣ -80°C'lik bir dondurucuya aktarın ve 24 saat bekletin. 3️⃣ Uzun süreli saklama için hücreleri sıvı azot içinde saklayın. ❄️ Mr. Frosty'nin Kullanımı Elektrik gücü olmadan kontrollü dondurma hızları sağlayan kullanışlı bir cihaz. 1️⃣ Hücreleri dondurma ortamı içeren kriyo şişelerde hazırlayın. 2️⃣ Kriyo şişeleri Mr. Frosty kabına yerleştirin. 3️⃣ Sıvı azota aktarmadan önce 24 saat boyunca -80°C'de saklayın. ❄️ Kontrollü Hızlı Dondurucu Thermo Fisher veya diğer üreticiler tarafından kontrollü sıcaklık düşürme için tasarlanmış yüksek hassasiyetli bir dondurucu. 1️⃣ Cihazı, sıcaklığı kademeli olarak düşürecek şekilde programlayın. 2️⃣ Hazırlanan hücreleri dondurucuya yerleştirin. 3️⃣ Dondurma döngüsü tamamlandıktan sonra hücreleri sıvı azota aktarın. • Kriyoşişeleri, uzun süreli saklama için -130°C'nin altındaki sıcaklıklarda veya sıvı azot içinde saklayın. Malzemeler • FBS, DMSO, Glikoz, Tuzlar içerir • Tamponlama kapasitesi: pH = 7,2 ila 7,6 Cytion’un CM-1 Dondurma Ortamı, kriyoprezervasyon için güvenilir bir çözüm sunarak, çok çeşitli araştırma uygulamaları için çözüldükten sonra yüksek hücre canlılığı ve işlevselliği sağlar.

€59.00

vergi ve kargo hariç

Ham's F12K Orta, w: 2,0 mM L-glutamin, w: 2,0 mM sodyum piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO₃

Biyolojik araştırmaların kendine özgü gereksinimlerini karşılamak üzere tasarlanmış, Ham's F-12 besiyerinin özel bir modifikasyonu olan Ham's F-12K (Kaighn's) Besiyerini sizlere sunuyoruz. Bu gelişmiş besiyeri, özellikle düşük serum koşullarında birincil insan hepatositlerinin yanı sıra sıçan ve tavuk karaciğer hücrelerinin kültürlenmesini iyileştirerek belirgin avantajlar sunar. Ham's F-12K (Kaighn's) Besiyeri, hücre kültürü koşullarını optimize etmek üzere özenle formüle edilmiştir. Zenginleştirilmiş bileşimi sayesinde amino asitler ve sodyum piruvat gibi temel bileşenlerin yanı sıra putresin, timidin, hipoksantin ve çinko gibi ek unsurları da yüksek seviyelerde içerir. Bu ilaveler, araştırmacıların besiyerini belirli hücre tipleri için minimum serum veya tanımlanmış bileşenlerle takviye etmelerine olanak tanıyarak hassas deney koşullarının oluşturulmasını kolaylaştırır. Özellikle, Ham's F-12K (Kaighn's) Besiyeri proteinler veya büyüme faktörleri içermez. Sonuç olarak, büyüme faktörleri ve Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye genellikle gereklidir; bu da araştırmacıların besiyerini belirli hücre hatlarının gereksinimlerine göre uyarlayabilmelerini sağlar. En iyi performans için, FBS konsantrasyonu her bir hücre hattı için dikkatle optimize edilmeli ve böylece optimum büyüme ve işlevsellik sağlanmalıdır. Fizyolojik pH değerini korumak için Ham's F-12K (Kaighn's) Ortamı, sodyum bikarbonat tampon sistemi (2,5 g/L) kullanır; bu da kültürleme sırasında %5-10 aralığında kontrollü bir CO₂ ortamı gerektirir. Bu, ortamın pH değerinin hücre büyümesi ve canlılığı için ideal aralıkta kalmasını sağlar. Kalite kontrol • pH = 20-25°C'de 7,2 ± 0,02. • Her parti, sterilite açısından ve mikoplazma ile bakteri bulunmadığına dair test edilmiştir. Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayınız. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini düşürür. • Besiyerini 37°C'den fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. • Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, üretim tarihinden itibaren 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik Tuzlar Kalsiyum klorür x 2H2O 135,24 Bakır(II) sülfat x 5H₂O 0,00 Demir (II) sülfat x 7H₂O 0,83 Magnezyum klorür x 6H₂O 105,72 Magnezyum sülfat x 7H₂O 394,49 Potasyum klorür 283,29 Potasyum dihidrojen fosfat 58,52 Sodyum klorür 7597,20 Susuz di-sodyum hidrojen fosfat 115,02 Çinko sülfat x 7H₂O 0,14 Diğer bileşenler D(+)-Glikoz susuz 1260,00 Hipoksantin 4,08 DL-α-Lipoik asit 0,21 Fenol kırmızısı 3,00 Putresin x 2HCl 0,32 Sodyum piruvat 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Timidin 0,73 Amino Asitler L-Alanin 17,82 L-Arginin x HCl 421,40 L-Asparagin x H₂O 30,02 L-Aspartik asit 26,62 L-Sistein x HCl x H₂O 70,24 L-Glutamin 292,20 L-Glutamik asit 29,42 Glisin 15,01 L-Histidin x HCl x H₂O 41,92 L-izolösin 7,87 L-lösin 26,24 L-Lizin x HCl 73,04 L-Metiyonin 8,95 L-Fenilalanin 9,91 L-Prolin 69,06 L-Serin 21,02 L-treonin 23,82 L-Triptofan 4,08 L-Tirozin 10,87 L-Valin 23,42 Vitaminler D(+)-Biotin 0,07 D-Kalsiyum pantotenat 0,48 Kolin klorür 13,96 Folik asit 1,32 Miyo-inositol 18,02 Nikotinamid 0,04 Piridoksin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Tiamin x HCl 0,34 B12 vitamini 1,36

€108.00

vergi ve kargo hariç

Ham's F12 Orta, w: 1,0 mM kararlı glutamin, w: 1,0 mM sodyum piruvat, w: 1,176 g/L NaHCO₃

Ham's F-12 Besiyeri, Ham's F-12 Besin Karışımı olarak da bilinir ve hücre kültürü için özel olarak tasarlanmış, yaygın olarak kullanılan bir bazal besiyeridir. Çin Hamster Yumurtalık (CHO) hücreleri, akciğer hücreleri ve fare L hücrelerinin serum içermeyen tek hücreli ekimi için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca, Ham's F-12, Klonal Toksisite Testi (CTA) için tercih edilen besiyeridir. Bu besiyerinin öne çıkan avantajlarından biri, serum takviyesine gerek kalmadan hücre büyümesini destekleyebilmesidir. Bu, serum bileşenlerinin neden olabileceği potansiyel etkileşimleri ortadan kaldırarak tutarlı ve güvenilir deney sonuçları sağlar. Serumsuz bir kültür ortamı sunan Ham's F-12 Besiyeri, araştırmacılara çalışmalarında daha fazla kontrol imkanı sunar. Ham's F-12 Ortamının bir diğer önemli özelliği, tek hücreli plakalama için uygun olmasıdır. Bu da onu, CHO hücreleri, akciğer hücreleri ve fare L hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre hatları için mükemmel bir seçim haline getirir. Besiyerinin optimize edilmiş besin bileşimi, tek tek hücrelerin verimli bir şekilde tutunmasını ve büyümesini kolaylaştırarak, tekrarlanabilirliği artırılmış homojen hücre kültürlerinin oluşturulmasını sağlar. Ayrıca, Ham's F-12 Ortamı, Klonal Toksisite Testi (CTA) için tercih edilen ortam olarak kabul görmüştür. Bu test, maddelerin hücreler üzerindeki sitotoksik etkilerinin değerlendirilmesinde kritik bir rol oynar. Araştırmacılar, CTA'da Ham's F-12 Ortamı'nı kullanarak çeşitli bileşiklerin veya tedavilerin tek tek hücreler üzerindeki etkisini doğru bir şekilde değerlendirebilir ve toksikolojik profiller hakkında değerli bilgiler elde edebilirler. Kalite kontrol • pH = 20-25°C'de 7,2 ± 0,02. • Her parti, sterilite açısından ve mikoplazma ile bakteri bulunmadığına dair test edilmiştir. Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayınız. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini düşürür. • Besiyerini 37°C'den fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. • Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, üretim tarihinden itibaren 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik Tuzlar Kalsiyum klorür x 2H₂O 44,00 Bakır(II) sülfat x 5H₂O 0,00 Demir (II) sülfat x 7H₂O 0,83 Magnezyum klorür x 6H₂O 122,00 Potasyum klorür 223,65 Sodyum klorür 7599,00 Susuz di-sodyum hidrojen fosfat 142,04 Çinko sülfat x 7H₂O 0,86 Diğer bileşenler D(+)-Glukoz susuz 1801,60 Hipoksantin 4,08 Linoleik asit 0,08 DL-α-Lipoik asit 0,21 Fenol kırmızısı 1,20 Putresin x 2HCl 0,16 Sodyum piruvat 110,00 Timidin 0,73 NaHCO3 1176,00 Amino Asitler L-Alanin 8,91 L-Arginin x HCl 210,70 L-Asparagin x H₂O 15,01 L-Aspartik asit 13,31 L-Sistein x HCl x H₂O 35,12 L-Alanil-L-Glutamin 217,30 L-Glutamik asit 14,71 Glisin 7,51 L-Histidin x HCl x H₂O 20,96 L-izolösin 3,94 L-lösin 13,12 L-Lizin x HCl 36,54 L-Metiyonin 4,48 L-Fenilalanin 4,96 L-Prolin 34,53 L-Serin 10,51 L-Treonin 11,91 L-Triptofan 2,04 L-Tirozin 5,44 L-Valin 11,71 Vitaminler D(+)-Biotin 0,01 D-Kalsiyum pantotenat 0,24 Kolin klorür 13,96 Folik asit 1,32 Miyo-inositol 18,02 Nikotinamid 0,04 Piridoksin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Tiamin x HCl 0,34 B12 vitamini 1,36

€25.00

vergi ve kargo hariç

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

vergi ve kargo hariç

Hücre kültürü besiyerleri: Genel bir bakış

Yaşam bilimleri alanında en önemli metodolojilerden biri hücre kültürüdür. "Hücre kültürü" terimi, bir hayvan veya bitkiden hücre, doku veya organların alınması ve daha sonra bu hücre, doku veya organların hayatta kalmaları ve/veya büyümeleri için elverişli yapay bir ortama nakledilmesi anlamına gelir. Optimum hücre gelişimi için temel çevresel ihtiyaçlar, kontrollü sıcaklık, hücrelerin tutunması için bir substrat, uygun bir büyüme ortamı ve optimum pH ve osmolaliteyi koruyan bir inkübatördür. Hücrelerin tam potansiyeline ulaşarak büyüyebilmesi için bu koşulların sağlanması gerekir.

İn vitro kültür için uygun bir büyüme ortamının seçimi, hücre kültüründe hem en kritik hem de en hayati aşamadır. Kültür ortamı olarak da bilinen büyüme ortamı, organizmaların mikroskobik, hücresel veya bitki benzeri ölçekte gelişimini teşvik etmek üzere formüle edilmiş bir sıvı veya jeldir. Hücrelerin yetiştirilmesi için kullanılan ortam, genellikle yeterli miktarda enerji ve hücre döngüsünü kontrol eden maddeler içerir. Kültür ortamının ana bileşenleri arasında amino asitler, vitaminler, inorganik tuzlar, glikoz ve serum bulunur. Serum, büyüme faktörleri, hormonlar ve bağlanma faktörleri kaynağı olarak işlev gördüğü için ortama eklenir. Ortam, besin maddeleri sağlamanın yanı sıra pH ve osmolalite seviyelerinin korunmasına da katkıda bulunur.

Hücre kültüründe kullanılan ortam türleri

Hem insan hem de hayvan hücreleri, yapay veya sentetik bir ortamda ya da doğal unsurlarla takviye edilmiş tamamen doğal bir ortamda yetiştirilebilir. Aşağıda, şu anda mevcut olan farklı ortam türlerine genel bir bakış sunacağız.

Doğal besiyerleri

Doğal besiyerlerinde yalnızca doğal halleriyle bulunan biyolojik sıvılar bulunur. Doğal besiyerleri, çok çeşitli hayvan hücre tiplerinin yetiştirilmesi için oldukça yararlı ve kolaydır. Doğal besiyerlerini oluşturan kesin bileşenlerin tam olarak anlaşılmaması, doğal besiyerleri kullanılarak elde edilen sonuçların tekrarlanabilirliğinin düşük olmasının başlıca nedenidir.

Yapay besiyerleri

Yapay veya sentetik besiyerlerinin hazırlanması, besin maddelerinin (hem organik hem de inorganik), serum proteinlerinin, karbonhidratların, kofaktörlerin, vitaminlerin ve tuzların yanı sıra O2 ve CO2 gaz fazlarının eklenmesini içerir [1].

Aşağıdaki işlevlerden bir veya daha fazlasını yerine getirmek amacıyla çeşitli yapay besiyolları geliştirilmiştir: 1) Anında hayatta kalma (kesin pH ve ozmotik basınca sahip dengeli bir tuz çözeltisi). 2) Uzun süreli hayatta kalma (farklı organik kimyasal formülasyonları ve/veya serum ile takviye edilmiş dengeli bir tuz çözeltisi). 3) Süresiz gelişim. 4) Özel işlevler.

Yapay besiyerleri dört farklı sınıfa ayrılır:

Serum içeren ortamlar

Hayvan hücrelerinin yetiştirilmesinde kullanılan besiyerlerinde en sık rastlanan takviye türü fetal sığır serumu'dur. Mümkün olan en iyi büyüme koşullarını sağlamak amacıyla, düşük maliyetli bir takviye olarak kültür besiyerine eklenir. Serum, kararsız veya suda çözünmeyen besin maddeleri, hormonlar ve büyüme faktörleri, proteaz inhibitörleri ve diğer maddeler için taşıyıcı veya kenetleyici görevi görmenin yanı sıra, zararlı molekülleri de bağlayarak etkisiz hale getirir.

Serumsuz Ortam

Besiyerlerinde serum bulunmasının bir dizi dezavantajı vardır ve immünolojik araştırmalarda yorumlamada ciddi hatalara yol açma potansiyeli taşır [2, 3]. Bugüne kadar çok çeşitli serum içermeyen besiyerleri geliştirilmiştir [4, 5]. Bu besiyerleri genellikle tek bir hücre tipinin kültürünü desteklemek üzere özel olarak formüle edilmiştir; örneğin, Thermo Fisher Scientific’in Knockout Serum Replacement ve Knockout DMEM ürünleri ile Stem Cell Technologies’in kök hücreler için geliştirdiği mTESR besiyeri [6] bunlara örnektir [7].

Ayrıca, bu besiyerleri, normalde serum tarafından sağlanan saflaştırılmış büyüme faktörleri, lipoproteinler ve diğer proteinleri belirli miktarlarda içerir [8]. Bu besiyerlerini oluşturan bileşenler iyi bilindiği için, bu besiyerlerine genellikle "tanımlanmış kültür besiyerleri" denir.

Kimyasal olarak tanımlanmış besiyerleri

Bu besiyerleri, herhangi bir kontaminasyona maruz kalmamış ultra saf inorganik ve organik bileşenler içerir. Ayrıca, büyüme faktörleri gibi saf protein ilaveleri de içerebilirler.

 Bakteri veya mayanın genetik olarak modifiye edilmesi, belirli yağ asitleri, vitaminler, kolesterol ve amino asitlerin eklenmesiyle birlikte, bu ortamların bileşenlerinin üretilmesini sağlar [9].

Proteinsiz besiyerleri

Proteinsiz besiyerleri, hiç protein içermeyen ve bunun yerine sadece protein dışı unsurlar içeren besiyerleridir. Serum ilaveli besiyerleriyle karşılaştırıldığında, protein ilavesi yapılmamış besiyerlerinin kullanımı, daha fazla hücre çoğalmasını ve protein ekspresyonunu teşvik eder ve sonraki aşamalarda üretilen herhangi bir ürünün saflaştırılmasını kolaylaştırır [10-12]. MEM ve RPMI-1640 gibi formülasyonlarda protein bulunmaz. Ancak, gerekirse bir protein takviyesi verilebilir.

Kültür besiyerleri ve temel bileşenleri

Ticari kültür besiyeri toz veya sıvı olarak satın alınabilir ve genellikle amino asitler, glikoz, tuzlar, vitaminler ve diğer besin takviyeleri gibi çeşitli besin maddelerini içerir. 

Bu bileşenlere olan ihtiyaç her hücre hattı için farklıdır ve bu farklılıklar, çok sayıda farklı besiyeri formülasyonunun ortaya çıkmasına neden olmaktadır. Her bileşen belirli bir işlevi yerine getirir; bu işlevler aşağıdaki paragraflarda özetlenmiştir:

Tamponlama sistemleri

Optimum büyüme koşullarını sağlamak için pH'ın kontrol edilmesi gerekir; bu genellikle iki tamponlama sisteminden biri ile yapılır:

Doğal tamponlama sistemi

Atmosferdeki CO2/H2CO3 oranı, besiyerindeki oranla eşittir ve bu da doğal bir tamponlama mekanizması oluşturur. Doğal tamponlama mekanizmasını korumak için, kültürler %5-10 CO2 içeren bir hava ortamında tutulmalıdır; bu genellikle bir CO2 inkübatörü kullanılarak sağlanır. Doğal tampon kullanmanın en büyük avantajlarından biri, hem ucuz hem de güvenli olmasıdır.

HEPES

Zwitteriyon HEPES kullanılarak yapılan kimyasal tamponlama, 7,2-7,4 pH aralığında daha yüksek tamponlama kapasitesine sahiptir ve kontrollü bir gaz ortamı gerektirmez. Bazı hücre tipleri için yüksek dozda HEPES zararlı olabilir. HEPES içeren besiyerleri de aynı şekilde floresan ışığın fototoksik etkilerine karşı çok daha duyarlıdır [13].

Fenol Kırmızısı

pH göstergesi olan fenol kırmızısı, genellikle piyasada bulunan kültür ortamlarına dahil edilir ve pH'ın sürekli izlenmesini sağlar. Hücrelerin çoğalmasıyla, bu hücreler tarafından üretilen metabolitler pH'da bir kaymaya ve dolayısıyla ortamın renginde bir değişikliğe neden olur. Fenol kırmızısı, besiyerinin rengi üzerinde ikili bir etkiye sahiptir; asidik pH'da sarıya, alkali pH'da ise mora dönüşür. Hücre kültürü için optimal değer olan pH 7,4, besiyerinin floresan kırmızı görünmesine neden olur.

Ancak fenol kırmızısının birkaç dezavantajı vardır: İlk olarak, fenol kırmızısı başta östrojen olmak üzere bir dizi steroid hormonun etkisini taklit edebilir [14]. Bu nedenle, meme dokusu gibi östrojene duyarlı hücreler üzerinde çalışma yaparken fenol kırmızısı içermeyen bir besiyeri kullanılması önerilir. Sodyum-potasyum dengesi, birçok serumsuz formülasyonda fenol kırmızısının varlığı nedeniyle bozulur. Ortama serum veya sığır hipofiz hormonu eklenmesi bu etkiyi ortadan kaldırabilir [15]. Üçüncü olarak, akış sitometrisi deneylerinde tespit işlemi, fenol kırmızısının varlığı nedeniyle zorlaşır.

İnorganik tuzlar

Sodyum, potasyum ve kalsiyum iyonları gibi inorganik tuzlar içeren besiyerleri, ozmotik dengenin korunmasına yardımcı olur ve membran potansiyelini düzenler.

Amino asitler

Amino asitler, proteinin temel bileşenleri oldukları için, bugüne kadar geliştirilmiş her hücre büyüme ortamının vazgeçilmez bir bileşenidir. Hücreler belirli amino asitleri kendi başlarına üretemedikleri için, kültür ortamının esansiyel amino asitleri içermesi önemlidir. Bunlar, hücrelerin çoğalması için gereklidir ve bunların bulunduğu konsantrasyon, ulaşılabilecek maksimum hücre yoğunluğunu belirler. Özellikle, esansiyel bir amino asit olan L-glutamin son derece önemlidir.

L-glutamin, metabolizma için ikincil bir enerji kaynağı olarak işlev görür ve NAD, NADPH ve nükleotidlerin üretimine azot sağlar. L-glutamin, zamanla hücrelerin kullanamayacağı bir forma dönüşen kararsız bir amino asit olduğu için, besiyerine eklenmesi gerekir.

Ayrıca, büyüme süreci boyunca tüketilen amino asitleri yenilemek amacıyla besiyerine esansiyel olmayan amino asitler de eklenebilir. Büyüme besiyerine esansiyel olmayan amino asitler eklendiğinde, hücrelerin büyümesi hızlanır ve canlılıkları artar.

Karbonhidratlar

Şeker formundaki karbonhidratlar, başlıca enerji kaynağıdır. Birçok besiyerinde, glikoz ve galaktoz gibi yaygın şekerlerin yanı sıra maltoz ve fruktoz da bulunur.

Proteinler ve peptitler

Albümin, transferrin ve fibronektin en yaygın olarak kullanılan protein ve peptitlerdir. Bunlar, serum içermeyen besiyerlerinde özellikle önemlidir. Albümin, transferrin, aprotinin, fetuin ve fibronektin, zengin bir protein kaynağı olan serumda bulunabilen proteinlerden bazılarıdır.

Albümin, kanda bulunan başlıca proteindir ve işlevi, su, tuzlar, serbest yağ asitleri, hormonlar ve vitaminler dahil olmak üzere çeşitli maddeleri farklı organlar ve hücreler arasında bağlayıp taşımaktır. Albüminin kimyasallara bağlanma yeteneği, onu hücrelerin kültürlendiği besiyerinden zararlı bileşikleri uzaklaştırmak için etkili bir aday haline getirir.

Aprotinin, nötr ve asidik pH'da kararlı olmasının yanı sıra yüksek sıcaklıklara ve proteolitik enzimlerin neden olabileceği tahribata dirençli olması nedeniyle hücre kültürü sistemlerinde koruyucu bir ajandır. Tripsin dahil olmak üzere bir dizi serin proteazı inhibe etme yeteneğine sahiptir.

Fetuin, yetişkin serumuna kıyasla fetal ve yenidoğan hayvanların serumunda daha yüksek miktarlarda saptanabilen bir glikoproteindir. Buna ek olarak, bir serin proteaz inhibitörü olarak da işlev görür. Fibronektin proteini, hücre yapışması sürecinde temel bir bileşendir. Transferrin, demiri taşıyan ve demiri hücre zarlarına ulaştırmaktan sorumlu bir proteindir.

Yağ asitleri ve lipitler

Serum bulunmadığında, serumsuz besiyerinde çok önemli bir rol oynarlar.

Vitaminler

Hücre gelişimi ve çoğalması için çok sayıda vitamin gereklidir. Vitaminler hücreler tarafından yeterli miktarda üretilemez ve bu nedenle doku kültüründe besin takviyesi olarak vazgeçilmezdir.

Hücre kültüründe serum, vitaminlerin birincil kaynağıdır; ancak besiyerleri, belirli bir hücre tipine uygun hale getirmek için çeşitli vitaminlerle de zenginleştirilir. Genellikle büyümeyi teşvik etmek için B grubu vitaminler kullanılır.

Eser elementler

Bakır, çinko, selenyum ve trikarboksilik asit ara maddeleri gibi kimyasal elementler eser elementler olarak bilinir. Eser elementler, genellikle serumda bulunanları ikame etmek amacıyla serum içermeyen besiyerlerine eklenir. Bu elementler, sağlıklı hücre gelişimi için gerekli olan önemli kimyasal bileşenlerdir. Enzim aktivitesi gibi birçok biyokimyasal reaksiyon, belirli mikro besin maddelerine bağlıdır.

Besiyeri takviyeleri

Belirli hücre hatları için önerilen tam büyüme besiyeri, temel besiyeri ve serumda bulunmayan ek bileşenlere ihtiyaç duyar. Bu besin takviyeleri, hücre büyümesini ve uygun metabolik işlevi destekler.

Hormonlar, büyüme faktörleri ve sinyal molekülleri belirli hücre hatlarının uygun şekilde çoğalması için gerekli olsa da, aşağıdaki önlemler her zaman alınmalıdır: Takviyelerin eklenmesi, tam büyüme ortamının osmolalitesini değiştirebilir ve bu da hücre gelişimini engelleyebileceğinden, takviyeleri ekledikten sonra osmolaliteyi her zaman kontrol etmek tavsiye edilir. Çoğu hücre hattı için optimum osmolalite 260 ile 320 mOSM/kg arasındadır.

Antibiyotikler

Antibiyotikler, hücre büyümesi için gerekli olmasa da, bakteriyel ve fungal kontaminantların gelişimini engellemek amacıyla sıklıkla kullanılır [16]. Antibiyotikler, mikoplazma ve dirençli bakteriler kaynaklı kontaminasyonu gizleyebileceğinden, hücre kültürü için rutin olarak kullanılması önerilmez [17, 18].

Ayrıca, antibiyotikler aşırı duyarlı hücrelerin metabolizmasını bozabilir. MilliporeSigma ve Life Technologies tarafından üretilen penisilin-streptomisin kombinasyonları sıklıkla kullanılmaktadır. Plasmocin, TS603, TS516 ve BT260 gliom hücre hatlarının kültüründe kullanılmıştır [19] ve mikoplazma kontaminasyonunu ortadan kaldırmada etkili olduğu gösterilmiştir (20).

Serum

Serumda albüminler, büyüme faktörleri ve büyüme inhibitörleri bulunur. Serum, amino asitler, proteinler, vitaminler (özellikle A, D, E ve K gibi yağda çözünen vitaminler), karbonhidratlar, lipitler, hormonlar, büyüme faktörleri, mineraller ve eser elementler sağladığı için hücre kültürü besiyerinin en önemli bileşenlerinden biridir.

Kültürlenmiş hücrelerin gelişimini desteklemek için genellikle fetal ve dana sığır kaynaklı serum kullanılır. Fetal serum, büyüme faktörleri açısından zengindir ve hücre klonlaması ile hassas hücrelerin gelişimi için uygundur. Büyümeyi destekleme yeteneğinin daha düşük olması nedeniyle, dana serumu temas inhibisyon deneylerinde kullanılır. Normal büyüme ortamları genellikle %2 ila %10 oranında serum içerir. Kültür ortamına serum eklenmesi aşağıdaki amaçlara hizmet eder [21]:

  • Serum, hücreler için gerekli besin maddelerini (hem çözelti halinde hem de proteinlere bağlı olarak) sağlar.

  • Serumda, büyümeyi teşvik eden ve özel hücre aktivitesinde rol oynayan çeşitli büyüme faktörleri ve hormonlar bulunur.

  • Serum, diğer kimyasalları hücreye taşıyan albümin ve transferrin gibi birçok bağlanma proteini sağlar. Örneğin, albümin yağları, vitaminleri, hormonları vb. hücrelere taşır.

  • Ayrıca, hücrelerin substrata yapışmasını artıran fibronektin gibi proteinler de sağlar. Buna ek olarak, bölünmeden önce hücre genişlemesine yardımcı olan yayılma unsurları üretir.

  • Hücrelerde proteolizi önleyen proteaz inhibitörlerini sağlar.

  • Ayrıca Na+, K+, Zn2+ ve Fe2+ gibi mineraller de içerir.

  • Besiyerinin viskozitesini artırarak, süspansiyon kültürü çalkalama sırasında hücreleri mekanik hasardan korur.

  • Aynı zamanda bir tampondur.

Kaynakça

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Doku kültüründe hayvan hücrelerinin beslenmesi; sentetik bir besiyeri üzerine ilk çalışmalar. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Kültürdeki memeli hücreleri tarafından fetal dana serumu bileşeninin hızlı adsorpsiyonu. Hücreye özgü antijenlere karşı antiserum çalışmalarında potansiyel bir artefakt kaynağı. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Popliteal lenf düğümü testi yoluyla incelenen hücre aracılı reaksiyonlarda olası bir artefakt kaynağı olarak hücre süspansiyonlarının hazırlanmasında kullanılan besiyerine serum ilavesi. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Ticari serumsuz besiyerleri: hibridoma büyümesi ve monoklonal antikor üretimi. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Serumsuz besiyerinde kültürlenmiş hücrelerin büyütülmesine yönelik yöntemler. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, ve ark. HSP70, RNA içermeyen TDP-43'ü anizotropik intranükleer sıvı küresel kabuklara taşır. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, vd. Down sendromunun neden olduğu yaşlanma, nöral progenitörlerin nükleer yapısını bozar. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Lipopolisakkarit reaktif B lenfosit kültürlerinde serumun albümin, transferrin ve soya lipidi ile tamamen ikame edilmesi. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Hibridoma büyümesi ve monoklonal antikor üretimi için kimyasal olarak tanımlanmış proteinsiz bir besiyerinin sistematik olarak iyileştirilmesi. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Hibridomların ve bağışıklık sisteminin diğer hücrelerinin büyümesi için protein içermeyen bir besiyeri. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Serumsuz hücre kültürü: birleştirici bir yaklaşım. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Proteinsiz besiyerlerinde Çin hamster hücre hatlarının klonal büyümesi. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Işığa maruz kalmış HEPES içeren kültür ortamının sitotoksik etkilerinin analizi. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Doku kültürü besiyerlerindeki fenol kırmızısı zayıf bir östrojendir: kültürdeki östrojene duyarlı hücrelerin incelenmesi ile ilgili çıkarımlar. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Serumsuz besiyerlerinin geliştirilmesi. İçinde: Master JRW, editör. Hayvan Hücre Kültürü, 3. baskı. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Hücre kültürü besiyerlerinde antibiyotik kullanımı. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Hücre kültürlerinde mikoplazma enfeksiyonunun yayılması ve kontrolü. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Ortamın değiştirilmesi ve hücre hatlarının pasajlanması. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, vd. Histon demetilaz KDM6A, kromatini ve hücre kaderini kontrol etmek için oksijeni doğrudan algılar. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, ve ark. Hücre kültüründe yaygın olarak kullanılan antibiyotiklerle karşılaştırıldığında, mollicutes ile enfekte olmuş çeşitli memeli hücre hatlarında Plasmocin™'in etkinliği: yerel bir deneyim. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Serum albüminine ligand bağlanmasının moleküler yönleri. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53