İçeriğe atla

Medya ve Reaktifler

40 ürünler

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

vergi ve kargo hariç

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

vergi ve kargo hariç

McCoys 5A orta (değiştirilmiş), ağırlıkça: 3,0 g/L glikoz, ağırlıkça: stabil glutamin, ağırlıkça: 2,0 mM sodyum piruvat, ağırlıkça: 2,2 g/L NaHCO₃

McCoy's 5A Ortamı, birincil hücre kültürlerinde virüslerin büyümesini ve çoğalmasını kolaylaştırmak üzere tasarlanmış, şiddetle tavsiye edilen ve özel bir besiyeridir. Çeşitli biyolojik araştırma uygulamalarında gösterdiği olağanüstü performansıyla büyük beğeni toplamıştır. McCoy's 5A Besiyerinin öne çıkan uygulamalarından biri, insan kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde kullanılmasıdır. Özellikle, lösin bakımından zengin tekrarlar içeren G-proteini bağlı reseptör (LGR5) ve bunun kolon kanserinin metastazındaki rolü üzerine yapılan çalışmalarda kullanılmıştır. Bu besiyeri, HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ve TENN dahil olmak üzere çeşitli kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde etkili bir şekilde kullanılmıştır ve araştırmacıların kolon kanseri metastazının altında yatan mekanizmaları daha derinlemesine incelemelerine olanak sağlamıştır. Kanser araştırmalarındaki uygulamasına ek olarak, McCoy's 5A Ortamı, osteoblastların incelenmesinde de vazgeçilmez olduğunu kanıtlamıştır. Standart hücre kültürü besiyerlerinde kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatitin iyon reaktivitesini inceleyen araştırmacılar, osteoblastları kültüre etmek için bu besiyerini kullanmışlardır. Bu uygulama, osteoblastlar ile kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatit arasındaki etkileşimlerin daha iyi anlaşılmasını kolaylaştırarak kemik araştırmaları alanındaki ilerlemelere katkıda bulunmuştur. McCoy's 5A Ortamı, karaciğer tümör hücrelerine optimal destek sağlamak üzere Basal Medium Eagle'da bulunan amino asitler değiştirilerek titizlikle formüle edilmiştir. Bu zenginleştirilmiş formülasyon, ortamın çeşitli yerleşik hücre hatlarının yanı sıra birincil hücreler için de uygun olmasını sağlar ve çeşitli araştırma ortamlarındaki çok yönlülüğünü ve uygulanabilirliğini daha da artırır. McCoy's 5A Ortamı, biyokimyasal ve fizyolojik etkilerini karaciğer tümör hücrelerinin ötesine taşır. Kemik iliği, deri, diş eti, böbrek, omentum, adrenal bez, akciğer, dalak, sıçan embriyosu ve diğer hücre tiplerinin birincil kültürlerinde büyümeyi desteklemek için başarıyla kullanılmıştır. Bu geniş uygulama yelpazesi, kapsamlı biyolojik araştırmalar için çeşitli hücre tiplerinin büyümesini ve sürdürülmesini destekleme konusunda McCoy's 5A Ortamının geniş kullanım alanını kanıtlamaktadır. Formülasyon Bu McCoy's 5A besiyeri (modifiye), 3,0 g/L glikoz, stabil glutamin, 2,0 mM sodyum piruvat ve 2,2 g/L NaHCO3 içerir. Kalite kontrol • pH = 20-25°C'de 7,2 ± 0,02. • Her parti, sterilite açısından ve mikoplazma ile bakteri bulunmadığına dair test edilmiştir. Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayınız. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini düşürür. • Besiyerini 37°C'den fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. • Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, açılış tarihinden itibaren 6 ila 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik TuzlarKalsiyum klorür x 2H2O132,00 Magnezyum sülfat97,67 Potasyum klorür400,00 Sodyum klorür6.460,00 Disodyum hidrojen fosfat (susuz)504,00 Diğer bileşenlerD(+)-Glikoz (susuz)3.000,00 Glutatyon (indirgenmiş)0,50 Et Peptonu600,00 Fenol kırmızısı sodyum tuzu11,00 Amino AsitlerL-Alanin13,36 L-Arginin x HCl42,14 L-Asparagin x H₂O45,03 L-Aspartik asit19,97 L-Sistein x HCl x H₂O31,75 L-Glutamin (kararlı)219,15 L-Glutamik asit22,07 Glisin7,51 L-Histidin x HCl x H₂O20,96 L-Hidroksiprolin19,67 L-İzolösin39,36 L-lösin39,36 L-Lizin x HCl36,54 L-Metiyonin14,92 L-Fenilalanin16,52 L-Prolin17,27 L-Serin26,28 L-Treonin17,87 L-Triptofan3,06 L-Tirozin disodyum tuzu26,10 L-Valin17,57 Vitaminlerp-Aminobenzoik asit1,00 Askorbik asit0,56 D(+)-Biotin0,20 D-Kalsiyum pantotenat0,20 Kolin klorür5,00 Folik asit10,00 Miyo-inositol36,00 Nikotinamid0,50 Nikotinik asit0,50 Piridoksal HCl0,50 Piridoksin HCl0,50 Riboflavin0,20 Tiamin HCl0,20 B12 vitamini2,00

€30.00

vergi ve kargo hariç

Orta 199, w: 2,7 mM kararlı glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w: EBSS

Medium 199, birincil eksplantların kültürü için özel olarak formüle edilmiş, çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir hücre kültürü besiyeridir. Bu kapsamlı besiyeri, çeşitli hücre tipleri için tam olarak tanımlanmış bir besin kaynağı sağlamak üzere temel vitaminleri, amino asitleri ve diğer faktörleri bir araya getirir. Özellikle transformasyona uğramamış hücreler için uygun olması nedeniyle biyolojik araştırmalar için paha biçilmez bir araçtır. Medium 199, bu alanda geniş bir uygulama yelpazesi sunar. Cumulus-oosit kompleksini (COC) etkili bir şekilde koruyabilir ve oositlerin in vitro olgunlaşmasını destekleyebilir. Ayrıca, Alman Holstein ineklerinden yumurta toplanması sırasında aspirasyon hatlarının durulanmasında da kullanılır. Dahası, Medium 199, sıçanlardan elde edilen kardiyak endotel hücrelerinin kültürü için mükemmel bir besiyeri görevi görür. Bu uygulamalar, Medium 199’un çeşitli deneysel ihtiyaçlara yönelik çok yönlülüğünü ve uyarlanabilirliğini göstermektedir. Tarihçe 1950’lerde Medium 199’un geliştirilmesi, doku kültürü besiyerlerinde önemli bir ilerlemeyi işaret etmiştir. Piyasaya sürülmesinden önce, birçok kültür besiyeri hayvansal kaynaklı ürünlere ve doku özütlerine dayanıyordu. Ancak Morgan ve meslektaşları, hücre kültürleri için tamamen tanımlanmış bir besin kaynağı formüle ederek bu alanda devrim yaratmıştır. Vitaminler, amino asitler ve diğer faktörlerin farklı kombinasyonlarını içeren deneyleri sayesinde, Medium 199’un olağanüstü büyüme teşvik edici özelliklerini keşfettiler. Kalite kontrol • pH = 7,2 ± 0,02 (20-25°C'de). • Her parti, sterilite açısından ve mikoplazma ile bakteri bulunmadığına dair test edilmiştir. Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayınız. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini en aza indirir. • Besiyerini 37°C'den fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. • Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, üretim tarihinden itibaren 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik Tuzlar Kalsiyum klorür x 2H₂O 264,92 Demir (III) nitrat x 9H₂O 0,72 Magnezyum sülfat 97,67 Potasyum klorür 400,00 Sodyum asetat x 3H₂O 82,95 Sodyum klorür 6.800,00 Sodyum dihidrojen fosfat x H₂O 140,00 Diğer bileşenler Adenin sülfat 10,00 AMP 0,20 ATP 1,00 Kolesterol 0,20 2'-Deoksiriboz 0,50 D(+)-Glikoz susuz 1.000,00 Glutatyon (red.) 0,05 Guanin x HCl 0,30 Hipoksantin 0,30 Fenol kırmızısı 10,00 D-Riboz 0,50 Timin 0,30 Tween 80 4,90 Urasil 0,30 Ksantin 0,30 NaHCO₃ 2.200,00 Amino Asitler L-Alanin 25,00 L-Arginin x HCl 70,00 L-Aspartik asit 30,00 L-Sistein x HCl x H2O 0,10 L-Sistin 20,00 Kararlı L-Glutamin 149,00 L-Glutamik asit 67,00 Glisin 50,00 L-Histidin x HCl x H2O 21,88 L-Hidroksiprolin 10,00 L-İzolösin 20,00 L-lösin 60,00 L-Lizin x HCl 70,00 L-Metiyonin 15,00 L-Fenilalanin 25,00 L-Prolin 40,00 L-Serin 25,00 L-Treonin 30,00 L-Triptofan 10,00 L-Tirozin 40,00 L-Valin 25,00 Vitaminler 4-Aminobenzoik asit 0,05 Askorbik asit 0,05 D(+)-Biotin 0,01 Kalsiferol 0,10 D-Kalsiyum pantotenat 0,01 Kolin klorür 0,50 Folik asit 0,01 Miyo-inositol 0,05 Menadion 0,01 Nikotinik asit 0,025 Nikotinamid 0,025 Piridoksal x HCl 0,025 Piridoksol x HCl 0,025 Riboflavin 0,01 DL-α-Tokoferol fosfat disodyum tuzu 0,01 Tiamin x HCl 0,01 A vitamini asetat 0,14

€40.00

vergi ve kargo hariç

NCI-H295R Hücre Büyüme Ortamı

Özel NCI-H295R hücreleri de dahil olmak üzere memeli hücre hatlarının büyümesini ve sürdürülmesini desteklemek üzere özel olarak tasarlanmış, uzmanlıkla hazırlanmış bir besin çözeltisi olan gelişmiş NCI-H295R Hücre Büyüme Ortamını keşfedin. Bu besiyeri, Dulbecco'nun Modifiye Eagle Besiyeri (DMEM) ile Ham'ın F-12'sinin (Besin Karışımı F-12) hassas bir 1:1 oranında birleştirilmesinden oluşan benzersiz karışımıyla öne çıkmakta ve hücre kültürünün karmaşık ihtiyaçlarını karşılamak üzere temel takviyelerle zenginleştirilmiştir. Üstün Hücre Kültürü Performansı için Geliştirilmiş Formülasyon • Takviyeli Temel Bileşim: Temel besiyeri, DMEM’in yüksek amino asit ve vitamin konsantrasyonlarını Ham’s F-12’nin çeşitli besin maddeleriyle birleştirerek zaten zengindir. Bu güçlü karışıma, hayati önem taşıyan büyüme faktörleri, hormonlar ve proteinler sağlayan %5 Fetal Sığır Serumu (FBS) ekledik. • Özel Olarak Seçilmiş Katkı Maddeleri: FBS'nin ötesinde, bu besiyeri insülin, transferrin, sığır serum albümini, selenyum asidi ve linoleik asit gibi kritik takviyelerle güçlendirilmiştir. Bu katkı maddeleri, spesifik hücresel gereksinimleri karşılayarak gelişmiş hücre büyümesini, metabolik fonksiyonu ve genel sağlığı destekler. • L-Glutamin Desteği: L-glutamin varlığı, besiyerinin etkinliğini daha da artırarak temel metabolik süreçleri destekler ve güçlü hücre çoğalmasını teşvik eder. Hücre Kültürü için Optimize Edilmiştir • pH Kontrollü Ortam: Bikarbonat tampon sistemi ve fenol kırmızısı indikatörü içeren bu besiyeri, stabil bir pH ortamı sağlar. %5 CO₂ atmosferi için optimize edilmiştir ve hassas pH izleme ve ayarlamasına olanak tanır. • Kalite ve Saflık: Temel besiyerinin her partisi, sterillik, mikoplazma ve bakteri açısından titiz testlerden geçirilir ve böylece besiyerinin bütünlüğü garanti altına alınır. pH'ı sabit tutulan bu besiyerinin tutarlı kalitesine ve performansına güvenebilirsiniz. Kullanım ve Saklama Ortamı, +2°C ile +8°C arasında, ışıktan uzak bir yerde buzdolabında saklayarak kalitesini koruyun. Etkinliğini korumak için donma veya aşırı ısınma gibi aşırı koşullardan kaçının. Kısmi kullanım için, gerekli miktarı oda sıcaklığında nazikçe ısıtın ve ortamın bileşenlerini bozmadan uygun duruma getirildiğinden emin olun. Raf Ömrü Üretim tarihinden itibaren 8 haftalık raf ömrüne sahip NCI-H295R Hücre Büyüme Ortamı, hücre kültürü ihtiyaçlarınız için güvenilir bir seçimdir ve araştırmalarınızın canlılığını ve verimliliğini garanti eder.

€150.00

vergi ve kargo hariç

PBS

Fosfat tamponlu salin (PBS), biyolojik ve kimyasal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan bir tampon çözeltisidir. Doku işleme ve hücre kültürü dahil olmak üzere çeşitli deney prosedürleri sırasında pH dengesini ve ozmolariteyi korumada hayati bir rol oynar. PBS çözeltimiz, her deneyde kararlılık ve güvenilirlik sağlamak amacıyla yüksek saflıkta bileşenlerle titizlikle formüle edilmiştir. PBS'mizin ozmolaritesi ve iyon konsantrasyonları insan vücudunkine çok yakındır; bu da onu izotonik hale getirir ve çoğu hücre için toksik olmamasını sağlar. PBS Çözeltimizin Bileşimi PBS çözeltimiz, pH'ı ayarlanmış ultra saf dereceli fosfat tamponları ve salin çözeltilerinin bir karışımıdır. 1X çalışma konsantrasyonunda şunları içerir: • 8000 mg/L Sodyum klorür (NaCl) • 200 mg/L Potasyum klorür (KCl) • 1150 mg/L Susuz dibasik sodyum fosfat (Na2HPO4) • 200 mg/L monobazik susuz potasyum fosfat (KH₂PO₄) Bu bileşim, çok çeşitli biyolojik uygulamalar için uygun olan optimal pH ve iyon dengesini sağlar. PBS Çözeltimizin Uygulamaları PBS çözeltimiz, biyolojik araştırmalardaki çeşitli uygulamalar için idealdir. İzotonik ve toksik olmayan özellikleri, madde seyreltme ve hücre kabı durulama işlemleri için uygun olmasını sağlar. EDTA içeren PBS çözeltileri, yapışmış ve topaklanmış hücreleri ayırmada etkilidir. Ancak, çinko gibi iki değerlikli metaller PBS'ye eklenmemelidir, çünkü bu çökelmeye neden olabilir. Bu tür durumlarda Good's tamponlarının kullanılması önerilir. Ayrıca, PBS çözeltimiz, SARS-CoV-2 dahil olmak üzere RNA virüslerinin taşınması ve saklanması için viral taşıma ortamına uygun bir alternatiftir. Kalite Kontrol • Steril filtrelenmiş Saklama ve Raf Ömrü • Işıktan korunarak +2°C ile +25°C arasında saklayınız. • Açıldıktan sonra 2°C ile 25°C arasında saklayın ve 24 ay içinde kullanın. Nakliye Koşulları • Ortam sıcaklığı Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için donmasını ve sık sık +37°C'ye ısıtılmasını önleyin. • Besiyerini 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı ayırın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına ısıtın. Bileşim Kategori Bileşenler Konsantrasyon (mg/L) Tuzlar Potasyum klorür 200 Susuz monobazik potasyum fosfat 200 Sodyum klorür 8000 Susuz dibazik sodyum fosfat 1150

€20.00

vergi ve kargo hariç

RPMI 1640, w: 2,0 mM kararlı glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO₃

RPMI 1640 Ortamı, RPMI ortamı olarak da bilinen, biyolojik araştırmalarda çeşitli memeli hücrelerini yetiştirmek için yaygın olarak kullanılan, son derece çok yönlü bir hücre kültürü ortamıdır. 1966 yılında ünlü Roswell Park Kapsamlı Kanser Merkezi'nde George E. Moore, Robert E. Gerner ve H. Addison Franklin tarafından geliştirilen bu besiyeri, adını kökeni olan Roswell Park Memorial Enstitüsü'nden (RPMI) almıştır. Başlangıçta hem süspansiyon hem de tek tabaka kültürlerinde insan lösemi hücrelerinin büyümesini desteklemek üzere tasarlanan RPMI 1640 Besiyeri, araştırmacılar ve ticari tedarikçiler tarafından yapılan değişiklikler sayesinde çok çeşitli memeli hücreleri için uygun hale gelmiştir. HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrositler ve karsinomlar gibi hücre hatlarıyla olağanüstü bir uyum gösterir. RPMI 1640 Ortamı, benzersiz bileşimi sayesinde diğer hücre kültürü ortamlarından ayrılır. Önemli miktarda fosfat, amino asit ve vitamin içerir. Özellikle, Eagle's Minimal Essential Medium veya Dulbecco's Modified Eagle Medium'da bulunmayan biotin, B12 vitamini ve PABA'yı içerir. Ayrıca, RPMI 1640 Ortamı, inositol ve kolin vitaminlerinin konsantrasyonlarında önemli ölçüde artış gösterir. Bununla birlikte, protein, lipit veya büyüme faktörleri içermez. Sonuç olarak, hücre büyümesi için optimal koşulları sağlamak amacıyla genellikle %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ilavesi gereklidir. RPMI 1640 Ortamının tamponlama sistemi sodyum bikarbonata dayanır ve fizyolojik olarak uygun bir pH değerini korumak için %5-10 CO₂ içeren bir ortam gerektirir. İndirgeyici ajan olan glutatyonun eklenmesi, bu ortamı diğerlerinden daha da ayırır. Kalite Kontrol • Steril filtrelenmiş Saklama ve Raf Ömrü • Işıktan korunarak +2°C ile +8°C arasında saklayınız. • Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6–8 hafta içinde kullanın. Nakliye Koşulları • Ortam sıcaklığı Saklama • Karanlık bir ortamda +2°C ile +8°C arasında buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için donmasını ve sık sık +37°C'ye ısıtılmasını önleyin. • Besiyerini 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın. • Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı ayırın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına ısıtın. Bileşim Kategori Bileşenler Konsantrasyon (mg/L) Amino Asitler Glisin 10,00 L-Alil-L-Glutamin 434,40 L-Arginin 200,00 L-AsparaginH2O 56,82 L-Aspartik Asit 20,00 L-Sistin 2HCl 65,20 L-Glutamik Asit 20,00 L-Histidin HClH₂O 20,27 L-Hidroksi-L-Prolin 20,00 L-İzolösin 50,00 L-lösin 50,00 L-Lizin HCl 40,00 L-Metiyonin 15,00 L-Fenilalanin 15,00 L-Prolin 20,00 L-Serin 30,00 L-Treonin 20,00 L-Triptofan 5,00 L-Tirozin 2Na2H2O 28,83 L-Valin 20,00 Vitaminler p-Amino Benzoik Asit 1,00 D-Biotin 0,20 Kolin Klorür 3,00 D-Kalsiyum Pantotenat 0,25 Folik Asit 1,00 Miyo-inositol 35,00 Nikotinamid 1,00 Piridoksin HCl 1,00 Riboflavin 0,20 Tiamin HCl 1,00 B12 vitamini 0,005 İnorganik Tuzlar Ca(NO₃)₂4H₂O 100,00 KCl 400,00 MgSO₄7H₂O 100,00 NaCl 6000,00 NaHCO3 2000,00 Na₂HPO₄ 800,00 Diğer Bileşenler D-Glikoz 2000,00 İndirgenmiş L-Glutatyon 1,00 Fenol Kırmızısı Sodyum Tuzu 5,30

€25.00

vergi ve kargo hariç

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

vergi ve kargo hariç

Hücre kültürü besiyerleri: Genel bir bakış

Yaşam bilimleri alanında en önemli metodolojilerden biri hücre kültürüdür. "Hücre kültürü" terimi, bir hayvan veya bitkiden hücre, doku veya organların alınması ve daha sonra bu hücre, doku veya organların hayatta kalmaları ve/veya büyümeleri için elverişli yapay bir ortama nakledilmesi anlamına gelir. Optimum hücre gelişimi için temel çevresel ihtiyaçlar, kontrollü sıcaklık, hücrelerin tutunması için bir substrat, uygun bir büyüme ortamı ve optimum pH ve osmolaliteyi koruyan bir inkübatördür. Hücrelerin tam potansiyeline ulaşarak büyüyebilmesi için bu koşulların sağlanması gerekir.

İn vitro kültür için uygun bir büyüme ortamının seçimi, hücre kültüründe hem en kritik hem de en hayati aşamadır. Kültür ortamı olarak da bilinen büyüme ortamı, organizmaların mikroskobik, hücresel veya bitki benzeri ölçekte gelişimini teşvik etmek üzere formüle edilmiş bir sıvı veya jeldir. Hücrelerin yetiştirilmesi için kullanılan ortam, genellikle yeterli miktarda enerji ve hücre döngüsünü kontrol eden maddeler içerir. Kültür ortamının ana bileşenleri arasında amino asitler, vitaminler, inorganik tuzlar, glikoz ve serum bulunur. Serum, büyüme faktörleri, hormonlar ve bağlanma faktörleri kaynağı olarak işlev gördüğü için ortama eklenir. Ortam, besin maddeleri sağlamanın yanı sıra pH ve osmolalite seviyelerinin korunmasına da katkıda bulunur.

Hücre kültüründe kullanılan ortam türleri

Hem insan hem de hayvan hücreleri, yapay veya sentetik bir ortamda ya da doğal unsurlarla takviye edilmiş tamamen doğal bir ortamda yetiştirilebilir. Aşağıda, şu anda mevcut olan farklı ortam türlerine genel bir bakış sunacağız.

Doğal besiyerleri

Doğal besiyerlerinde yalnızca doğal halleriyle bulunan biyolojik sıvılar bulunur. Doğal besiyerleri, çok çeşitli hayvan hücre tiplerinin yetiştirilmesi için oldukça yararlı ve kolaydır. Doğal besiyerlerini oluşturan kesin bileşenlerin tam olarak anlaşılmaması, doğal besiyerleri kullanılarak elde edilen sonuçların tekrarlanabilirliğinin düşük olmasının başlıca nedenidir.

Yapay besiyerleri

Yapay veya sentetik besiyerlerinin hazırlanması, besin maddelerinin (hem organik hem de inorganik), serum proteinlerinin, karbonhidratların, kofaktörlerin, vitaminlerin ve tuzların yanı sıra O2 ve CO2 gaz fazlarının eklenmesini içerir [1].

Aşağıdaki işlevlerden bir veya daha fazlasını yerine getirmek amacıyla çeşitli yapay besiyolları geliştirilmiştir: 1) Anında hayatta kalma (kesin pH ve ozmotik basınca sahip dengeli bir tuz çözeltisi). 2) Uzun süreli hayatta kalma (farklı organik kimyasal formülasyonları ve/veya serum ile takviye edilmiş dengeli bir tuz çözeltisi). 3) Süresiz gelişim. 4) Özel işlevler.

Yapay besiyerleri dört farklı sınıfa ayrılır:

Serum içeren ortamlar

Hayvan hücrelerinin yetiştirilmesinde kullanılan besiyerlerinde en sık rastlanan takviye türü fetal sığır serumu'dur. Mümkün olan en iyi büyüme koşullarını sağlamak amacıyla, düşük maliyetli bir takviye olarak kültür besiyerine eklenir. Serum, kararsız veya suda çözünmeyen besin maddeleri, hormonlar ve büyüme faktörleri, proteaz inhibitörleri ve diğer maddeler için taşıyıcı veya kenetleyici görevi görmenin yanı sıra, zararlı molekülleri de bağlayarak etkisiz hale getirir.

Serumsuz Ortam

Besiyerlerinde serum bulunmasının bir dizi dezavantajı vardır ve immünolojik araştırmalarda yorumlamada ciddi hatalara yol açma potansiyeli taşır [2, 3]. Bugüne kadar çok çeşitli serum içermeyen besiyerleri geliştirilmiştir [4, 5]. Bu besiyerleri genellikle tek bir hücre tipinin kültürünü desteklemek üzere özel olarak formüle edilmiştir; örneğin, Thermo Fisher Scientific’in Knockout Serum Replacement ve Knockout DMEM ürünleri ile Stem Cell Technologies’in kök hücreler için geliştirdiği mTESR besiyeri [6] bunlara örnektir [7].

Ayrıca, bu besiyerleri, normalde serum tarafından sağlanan saflaştırılmış büyüme faktörleri, lipoproteinler ve diğer proteinleri belirli miktarlarda içerir [8]. Bu besiyerlerini oluşturan bileşenler iyi bilindiği için, bu besiyerlerine genellikle "tanımlanmış kültür besiyerleri" denir.

Kimyasal olarak tanımlanmış besiyerleri

Bu besiyerleri, herhangi bir kontaminasyona maruz kalmamış ultra saf inorganik ve organik bileşenler içerir. Ayrıca, büyüme faktörleri gibi saf protein ilaveleri de içerebilirler.

 Bakteri veya mayanın genetik olarak modifiye edilmesi, belirli yağ asitleri, vitaminler, kolesterol ve amino asitlerin eklenmesiyle birlikte, bu ortamların bileşenlerinin üretilmesini sağlar [9].

Proteinsiz besiyerleri

Proteinsiz besiyerleri, hiç protein içermeyen ve bunun yerine sadece protein dışı unsurlar içeren besiyerleridir. Serum ilaveli besiyerleriyle karşılaştırıldığında, protein ilavesi yapılmamış besiyerlerinin kullanımı, daha fazla hücre çoğalmasını ve protein ekspresyonunu teşvik eder ve sonraki aşamalarda üretilen herhangi bir ürünün saflaştırılmasını kolaylaştırır [10-12]. MEM ve RPMI-1640 gibi formülasyonlarda protein bulunmaz. Ancak, gerekirse bir protein takviyesi verilebilir.

Kültür besiyerleri ve temel bileşenleri

Ticari kültür besiyeri toz veya sıvı olarak satın alınabilir ve genellikle amino asitler, glikoz, tuzlar, vitaminler ve diğer besin takviyeleri gibi çeşitli besin maddelerini içerir. 

Bu bileşenlere olan ihtiyaç her hücre hattı için farklıdır ve bu farklılıklar, çok sayıda farklı besiyeri formülasyonunun ortaya çıkmasına neden olmaktadır. Her bileşen belirli bir işlevi yerine getirir; bu işlevler aşağıdaki paragraflarda özetlenmiştir:

Tamponlama sistemleri

Optimum büyüme koşullarını sağlamak için pH'ın kontrol edilmesi gerekir; bu genellikle iki tamponlama sisteminden biri ile yapılır:

Doğal tamponlama sistemi

Atmosferdeki CO2/H2CO3 oranı, besiyerindeki oranla eşittir ve bu da doğal bir tamponlama mekanizması oluşturur. Doğal tamponlama mekanizmasını korumak için, kültürler %5-10 CO2 içeren bir hava ortamında tutulmalıdır; bu genellikle bir CO2 inkübatörü kullanılarak sağlanır. Doğal tampon kullanmanın en büyük avantajlarından biri, hem ucuz hem de güvenli olmasıdır.

HEPES

Zwitteriyon HEPES kullanılarak yapılan kimyasal tamponlama, 7,2-7,4 pH aralığında daha yüksek tamponlama kapasitesine sahiptir ve kontrollü bir gaz ortamı gerektirmez. Bazı hücre tipleri için yüksek dozda HEPES zararlı olabilir. HEPES içeren besiyerleri de aynı şekilde floresan ışığın fototoksik etkilerine karşı çok daha duyarlıdır [13].

Fenol Kırmızısı

pH göstergesi olan fenol kırmızısı, genellikle piyasada bulunan kültür ortamlarına dahil edilir ve pH'ın sürekli izlenmesini sağlar. Hücrelerin çoğalmasıyla, bu hücreler tarafından üretilen metabolitler pH'da bir kaymaya ve dolayısıyla ortamın renginde bir değişikliğe neden olur. Fenol kırmızısı, besiyerinin rengi üzerinde ikili bir etkiye sahiptir; asidik pH'da sarıya, alkali pH'da ise mora dönüşür. Hücre kültürü için optimal değer olan pH 7,4, besiyerinin floresan kırmızı görünmesine neden olur.

Ancak fenol kırmızısının birkaç dezavantajı vardır: İlk olarak, fenol kırmızısı başta östrojen olmak üzere bir dizi steroid hormonun etkisini taklit edebilir [14]. Bu nedenle, meme dokusu gibi östrojene duyarlı hücreler üzerinde çalışma yaparken fenol kırmızısı içermeyen bir besiyeri kullanılması önerilir. Sodyum-potasyum dengesi, birçok serumsuz formülasyonda fenol kırmızısının varlığı nedeniyle bozulur. Ortama serum veya sığır hipofiz hormonu eklenmesi bu etkiyi ortadan kaldırabilir [15]. Üçüncü olarak, akış sitometrisi deneylerinde tespit işlemi, fenol kırmızısının varlığı nedeniyle zorlaşır.

İnorganik tuzlar

Sodyum, potasyum ve kalsiyum iyonları gibi inorganik tuzlar içeren besiyerleri, ozmotik dengenin korunmasına yardımcı olur ve membran potansiyelini düzenler.

Amino asitler

Amino asitler, proteinin temel bileşenleri oldukları için, bugüne kadar geliştirilmiş her hücre büyüme ortamının vazgeçilmez bir bileşenidir. Hücreler belirli amino asitleri kendi başlarına üretemedikleri için, kültür ortamının esansiyel amino asitleri içermesi önemlidir. Bunlar, hücrelerin çoğalması için gereklidir ve bunların bulunduğu konsantrasyon, ulaşılabilecek maksimum hücre yoğunluğunu belirler. Özellikle, esansiyel bir amino asit olan L-glutamin son derece önemlidir.

L-glutamin, metabolizma için ikincil bir enerji kaynağı olarak işlev görür ve NAD, NADPH ve nükleotidlerin üretimine azot sağlar. L-glutamin, zamanla hücrelerin kullanamayacağı bir forma dönüşen kararsız bir amino asit olduğu için, besiyerine eklenmesi gerekir.

Ayrıca, büyüme süreci boyunca tüketilen amino asitleri yenilemek amacıyla besiyerine esansiyel olmayan amino asitler de eklenebilir. Büyüme besiyerine esansiyel olmayan amino asitler eklendiğinde, hücrelerin büyümesi hızlanır ve canlılıkları artar.

Karbonhidratlar

Şeker formundaki karbonhidratlar, başlıca enerji kaynağıdır. Birçok besiyerinde, glikoz ve galaktoz gibi yaygın şekerlerin yanı sıra maltoz ve fruktoz da bulunur.

Proteinler ve peptitler

Albümin, transferrin ve fibronektin en yaygın olarak kullanılan protein ve peptitlerdir. Bunlar, serum içermeyen besiyerlerinde özellikle önemlidir. Albümin, transferrin, aprotinin, fetuin ve fibronektin, zengin bir protein kaynağı olan serumda bulunabilen proteinlerden bazılarıdır.

Albümin, kanda bulunan başlıca proteindir ve işlevi, su, tuzlar, serbest yağ asitleri, hormonlar ve vitaminler dahil olmak üzere çeşitli maddeleri farklı organlar ve hücreler arasında bağlayıp taşımaktır. Albüminin kimyasallara bağlanma yeteneği, onu hücrelerin kültürlendiği besiyerinden zararlı bileşikleri uzaklaştırmak için etkili bir aday haline getirir.

Aprotinin, nötr ve asidik pH'da kararlı olmasının yanı sıra yüksek sıcaklıklara ve proteolitik enzimlerin neden olabileceği tahribata dirençli olması nedeniyle hücre kültürü sistemlerinde koruyucu bir ajandır. Tripsin dahil olmak üzere bir dizi serin proteazı inhibe etme yeteneğine sahiptir.

Fetuin, yetişkin serumuna kıyasla fetal ve yenidoğan hayvanların serumunda daha yüksek miktarlarda saptanabilen bir glikoproteindir. Buna ek olarak, bir serin proteaz inhibitörü olarak da işlev görür. Fibronektin proteini, hücre yapışması sürecinde temel bir bileşendir. Transferrin, demiri taşıyan ve demiri hücre zarlarına ulaştırmaktan sorumlu bir proteindir.

Yağ asitleri ve lipitler

Serum bulunmadığında, serumsuz besiyerinde çok önemli bir rol oynarlar.

Vitaminler

Hücre gelişimi ve çoğalması için çok sayıda vitamin gereklidir. Vitaminler hücreler tarafından yeterli miktarda üretilemez ve bu nedenle doku kültüründe besin takviyesi olarak vazgeçilmezdir.

Hücre kültüründe serum, vitaminlerin birincil kaynağıdır; ancak besiyerleri, belirli bir hücre tipine uygun hale getirmek için çeşitli vitaminlerle de zenginleştirilir. Genellikle büyümeyi teşvik etmek için B grubu vitaminler kullanılır.

Eser elementler

Bakır, çinko, selenyum ve trikarboksilik asit ara maddeleri gibi kimyasal elementler eser elementler olarak bilinir. Eser elementler, genellikle serumda bulunanları ikame etmek amacıyla serum içermeyen besiyerlerine eklenir. Bu elementler, sağlıklı hücre gelişimi için gerekli olan önemli kimyasal bileşenlerdir. Enzim aktivitesi gibi birçok biyokimyasal reaksiyon, belirli mikro besin maddelerine bağlıdır.

Besiyeri takviyeleri

Belirli hücre hatları için önerilen tam büyüme besiyeri, temel besiyeri ve serumda bulunmayan ek bileşenlere ihtiyaç duyar. Bu besin takviyeleri, hücre büyümesini ve uygun metabolik işlevi destekler.

Hormonlar, büyüme faktörleri ve sinyal molekülleri belirli hücre hatlarının uygun şekilde çoğalması için gerekli olsa da, aşağıdaki önlemler her zaman alınmalıdır: Takviyelerin eklenmesi, tam büyüme ortamının osmolalitesini değiştirebilir ve bu da hücre gelişimini engelleyebileceğinden, takviyeleri ekledikten sonra osmolaliteyi her zaman kontrol etmek tavsiye edilir. Çoğu hücre hattı için optimum osmolalite 260 ile 320 mOSM/kg arasındadır.

Antibiyotikler

Antibiyotikler, hücre büyümesi için gerekli olmasa da, bakteriyel ve fungal kontaminantların gelişimini engellemek amacıyla sıklıkla kullanılır [16]. Antibiyotikler, mikoplazma ve dirençli bakteriler kaynaklı kontaminasyonu gizleyebileceğinden, hücre kültürü için rutin olarak kullanılması önerilmez [17, 18].

Ayrıca, antibiyotikler aşırı duyarlı hücrelerin metabolizmasını bozabilir. MilliporeSigma ve Life Technologies tarafından üretilen penisilin-streptomisin kombinasyonları sıklıkla kullanılmaktadır. Plasmocin, TS603, TS516 ve BT260 gliom hücre hatlarının kültüründe kullanılmıştır [19] ve mikoplazma kontaminasyonunu ortadan kaldırmada etkili olduğu gösterilmiştir (20).

Serum

Serumda albüminler, büyüme faktörleri ve büyüme inhibitörleri bulunur. Serum, amino asitler, proteinler, vitaminler (özellikle A, D, E ve K gibi yağda çözünen vitaminler), karbonhidratlar, lipitler, hormonlar, büyüme faktörleri, mineraller ve eser elementler sağladığı için hücre kültürü besiyerinin en önemli bileşenlerinden biridir.

Kültürlenmiş hücrelerin gelişimini desteklemek için genellikle fetal ve dana sığır kaynaklı serum kullanılır. Fetal serum, büyüme faktörleri açısından zengindir ve hücre klonlaması ile hassas hücrelerin gelişimi için uygundur. Büyümeyi destekleme yeteneğinin daha düşük olması nedeniyle, dana serumu temas inhibisyon deneylerinde kullanılır. Normal büyüme ortamları genellikle %2 ila %10 oranında serum içerir. Kültür ortamına serum eklenmesi aşağıdaki amaçlara hizmet eder [21]:

  • Serum, hücreler için gerekli besin maddelerini (hem çözelti halinde hem de proteinlere bağlı olarak) sağlar.

  • Serumda, büyümeyi teşvik eden ve özel hücre aktivitesinde rol oynayan çeşitli büyüme faktörleri ve hormonlar bulunur.

  • Serum, diğer kimyasalları hücreye taşıyan albümin ve transferrin gibi birçok bağlanma proteini sağlar. Örneğin, albümin yağları, vitaminleri, hormonları vb. hücrelere taşır.

  • Ayrıca, hücrelerin substrata yapışmasını artıran fibronektin gibi proteinler de sağlar. Buna ek olarak, bölünmeden önce hücre genişlemesine yardımcı olan yayılma unsurları üretir.

  • Hücrelerde proteolizi önleyen proteaz inhibitörlerini sağlar.

  • Ayrıca Na+, K+, Zn2+ ve Fe2+ gibi mineraller de içerir.

  • Besiyerinin viskozitesini artırarak, süspansiyon kültürü çalkalama sırasında hücreleri mekanik hasardan korur.

  • Aynı zamanda bir tampondur.

Kaynakça

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Doku kültüründe hayvan hücrelerinin beslenmesi; sentetik bir besiyeri üzerine ilk çalışmalar. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Kültürdeki memeli hücreleri tarafından fetal dana serumu bileşeninin hızlı adsorpsiyonu. Hücreye özgü antijenlere karşı antiserum çalışmalarında potansiyel bir artefakt kaynağı. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Popliteal lenf düğümü testi yoluyla incelenen hücre aracılı reaksiyonlarda olası bir artefakt kaynağı olarak hücre süspansiyonlarının hazırlanmasında kullanılan besiyerine serum ilavesi. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Ticari serumsuz besiyerleri: hibridoma büyümesi ve monoklonal antikor üretimi. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Serumsuz besiyerinde kültürlenmiş hücrelerin büyütülmesine yönelik yöntemler. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, ve ark. HSP70, RNA içermeyen TDP-43'ü anizotropik intranükleer sıvı küresel kabuklara taşır. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, vd. Down sendromunun neden olduğu yaşlanma, nöral progenitörlerin nükleer yapısını bozar. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Lipopolisakkarit reaktif B lenfosit kültürlerinde serumun albümin, transferrin ve soya lipidi ile tamamen ikame edilmesi. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Hibridoma büyümesi ve monoklonal antikor üretimi için kimyasal olarak tanımlanmış proteinsiz bir besiyerinin sistematik olarak iyileştirilmesi. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Hibridomların ve bağışıklık sisteminin diğer hücrelerinin büyümesi için protein içermeyen bir besiyeri. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Serumsuz hücre kültürü: birleştirici bir yaklaşım. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Proteinsiz besiyerlerinde Çin hamster hücre hatlarının klonal büyümesi. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Işığa maruz kalmış HEPES içeren kültür ortamının sitotoksik etkilerinin analizi. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Doku kültürü besiyerlerindeki fenol kırmızısı zayıf bir östrojendir: kültürdeki östrojene duyarlı hücrelerin incelenmesi ile ilgili çıkarımlar. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Serumsuz besiyerlerinin geliştirilmesi. İçinde: Master JRW, editör. Hayvan Hücre Kültürü, 3. baskı. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Hücre kültürü besiyerlerinde antibiyotik kullanımı. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Hücre kültürlerinde mikoplazma enfeksiyonunun yayılması ve kontrolü. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Ortamın değiştirilmesi ve hücre hatlarının pasajlanması. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, vd. Histon demetilaz KDM6A, kromatini ve hücre kaderini kontrol etmek için oksijeni doğrudan algılar. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, ve ark. Hücre kültüründe yaygın olarak kullanılan antibiyotiklerle karşılaştırıldığında, mollicutes ile enfekte olmuş çeşitli memeli hücre hatlarında Plasmocin™'in etkinliği: yerel bir deneyim. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Serum albüminine ligand bağlanmasının moleküler yönleri. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53