İçeriğe atla
J774A.1
Doku
Retikulum
Hastalık
Sarkom
Eş anlamlılar
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

J774A.1

Cell line · Ürün numarası 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

J774A.1 hücre hattı, plazmasitoma indükleyici tedavi sırasında dişi bir BALB/c/NIH faresinin asit tümöründen türetilmiştir. Bu hücreler antikora bağlı fagositoz gerçekleştirme yetenekleriyle bilinmektedir ve bu da onları çeşitli antijenlere karşı bağışıklık tepkilerini araştırmak için yararlı bir araç haline getirmektedir.

J774A.1 hücrelerinin büyümesi dekstran sülfat, p-fenilendiamin (PPD) ve lipopolisakkarit (LPS) dahil olmak üzere çeşitli maddeler tarafından inhibe edilir. J774A.1 hücreleri büyük miktarlarda lizozim sentezler ve sürekli olarak interlökin-1 beta sentezledikleri bilinmektedir.
J774A.1 hücrelerinin ikiye katlanma süresi 17 saattir ve RAW 264.7 makrofajlarıyla aynı koşullar altında kültürlenebilirler. Ayrıca, J774A.1 hücre hattının interlökin-1 (IL-1) ve lizozim gibi spesifik genlerin yanı sıra kompleman (C3) ve yüksek afiniteli Fc reseptörü, IgG (Fcgr1) gibi spesifik ekspresyon belirteçlerini ifade ettiği bilinmektedir.

J774A.1 hücre hattı çeşitli immünoloji ve bulaşıcı hastalık çalışmalarında kullanılmıştır. Örneğin, leishmanicidal aktiviteye sahip triazolo[1,5-a]pyridinium tuzlarının sitotoksisitesini ve Delphinium türlerinden izole edilen flavonoid glikozitlerin antitrypanosomatik aktivitesini araştırmak için kullanılmıştır.

Genel olarak, J774A.1 hücreleri makrofaj fonksiyonu, sitokin sentezi ve çeşitli antijenlere ve patojenlere karşı bağışıklık tepkisinin incelenmesinde değerli bir araçtır.

Doku
Retikulum
Hastalık
Sarkom
Eş anlamlılar
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Makrofaj

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
J774A.1 (Cytion katalog numarası 400220)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
İmmünoglobulin (Fc), kompleman (C3)
Ürünler
İnterlökin-1 (interlökin 1, IL-1, LAF), lizozim

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Hücrelerin bir hücre kazıyıcı ile ayrılması tavsiye edilir. Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra, hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
Yetişkin