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J774A.1
Gewebe
Retikulum
Krankheit
Sarkom
Synonyme
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

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J774A.1

Cell line · Artikelnummer 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die J774A.1-Zelllinie wurde aus dem Aszites-Tumor einer weiblichen BALB/c/NIH-Maus während einer Plasmazytom-induzierenden Behandlung gewonnen. Die Zellen sind für ihre Fähigkeit zur antikörperabhängigen Phagozytose bekannt, was sie zu einem hilfreichen Instrument für die Untersuchung von Immunreaktionen auf verschiedene Antigene macht.

Das Wachstum von J774A.1-Zellen wird durch verschiedene Substanzen gehemmt, darunter Dextransulfat, p-Phenylendiamin (PPD) und Lipopolysaccharid (LPS). J774A.1-Zellen synthetisieren große Mengen von Lysozym und sind dafür bekannt, dass sie kontinuierlich Interleukin-1 beta synthetisieren.
J774A.1-Zellen haben eine Verdopplungszeit von 17 Stunden und können unter denselben Bedingungen wie RAW 264.7-Makrophagen kultiviert werden. Darüber hinaus ist bekannt, dass die J774A.1-Zelllinie spezifische Gene, darunter Interleukin-1 (IL-1) und Lysozym, sowie spezifische Expressionsmarker wie Komplement (C3) und den hochaffinen Fc-Rezeptor IgG (Fcgr1) exprimiert.

Die J774A.1-Zelllinie wurde in verschiedenen Studien zur Immunologie und zu Infektionskrankheiten eingesetzt. So wurde mit ihr beispielsweise die Zytotoxizität von Triazolo[1,5-a]pyridiniumsalzen mit leishmanizider Wirkung und die antitrypanosomatische Wirkung von Flavonoidglykosiden aus Delphinium-Arten untersucht.

Insgesamt sind J774A.1-Zellen ein wertvolles Instrument für die Untersuchung der Makrophagenfunktion, der Zytokinsynthese und der Immunantwort auf verschiedene Antigene und Krankheitserreger.

Gewebe
Retikulum
Krankheit
Sarkom
Synonyme
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Makrophagen

04Bezeichner

Quellenangabe
J774A.1 (Cytion Katalognummer 400220)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Immunglobulin (Fc), Komplement (C3)
Produkte
Interleukin-1 (Interleukin 1, IL-1, LAF), Lysozym

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Es wird empfohlen, die Zellen mit einem Zellschaber abzulösen. Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation wird das Zellpellet vorsichtig resuspendiert und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführt.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
BALB/c
Alter des Spenders
Erwachsener