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J774A.1
Pañuelo de papel
Retículo
Enfermedad
Sarcoma
Sinónimos
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

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J774A.1

Cell line · Número de producto 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

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01Información general

Descripción

La línea celular J774A.1 se derivó del tumor de ascitis de un ratón BALB/c/NIH hembra durante un tratamiento inductor de plasmocitoma. Las células son conocidas por su capacidad de realizar fagocitosis dependiente de anticuerpos, lo que las convierte en una herramienta útil para investigar las respuestas inmunitarias a diversos antígenos.

El crecimiento de las células J774A.1 se ve inhibido por diversas sustancias, como el sulfato de dextrano, la p-fenilendiamina (PPD) y el lipopolisacárido (LPS). Las células J774A.1 sintetizan grandes cantidades de lisozima y se sabe que sintetizan interleucina-1 beta continuamente.
Las células J774A.1 tienen un tiempo de duplicación de 17 horas y pueden cultivarse en las mismas condiciones que los macrófagos RAW 264.7. Además, se sabe que la línea celular J774A.1 expresa genes específicos, como la interleucina-1 (IL-1) y la lisozima, así como marcadores de expresión específicos, como el complemento (C3) y el receptor Fc de alta afinidad, IgG (Fcgr1).

La línea celular J774A.1 se ha utilizado en diversos estudios de inmunología y enfermedades infecciosas. Por ejemplo, se ha utilizado para investigar la citotoxicidad de sales de triazolo[1,5-a]piridinio con actividad leishmanicida y la actividad antitripanosomática de glucósidos flavonoides aislados de especies de Delphinium.

En general, las células J774A.1 son una herramienta valiosa para estudiar la función de los macrófagos, la síntesis de citocinas y la respuesta inmunitaria a diversos antígenos y patógenos.

Pañuelo de papel
Retículo
Enfermedad
Sarcoma
Sinónimos
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tipo de célula
Macrófagos

04Identificadores

Referencia
J774A.1 (número de catálogo de Cytion 400220)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Inmunoglobulina (Fc), complemento (C3)
Productos
Interleucina-1 (interleucina 1, IL-1, LAF), lisozima

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Se recomienda separar las células con un raspador celular. Recoger las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lavar suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilizar 3-5 ml para matraces T25 y 5-10 ml para matraces T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para matraces T25, 2,5 ml para matraces T75) asegurando la cobertura completa de la capa celular. Dejar incubar las células a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combinar y centrifugar tanto la suspensión como las células adherentes. Tras la centrifugación, resuspender cuidadosamente el sedimento celular y transferir la suspensión celular a nuevos matraces que contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
BALB/c
Edad del donante
Adultos