Přejít na obsah
J774A.1
Tkáň
Retikulum
Nemoc
Sarcoma
Synonyma
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Dokumenty

J774A.1

Cell line · Číslo výrobku 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie J774A.1 byla získána z nádoru ascitu myší samice BALB/c/NIH během léčby vyvolávající plazmocytom. Buňky jsou známé svou schopností provádět fagocytózu závislou na protilátkách, což z nich činí užitečný nástroj pro zkoumání imunitních reakcí na různé antigeny.

Růst buněk J774A.1 je inhibován různými látkami, včetně dextran sulfátu, p-fenylendiaminu (PPD) a lipopolysacharidu (LPS). Buňky J774A.1 syntetizují velké množství lysozymu a je známo, že kontinuálně syntetizují interleukin-1 beta.
Buňky J774A.1 mají dobu zdvojení 17 hodin a lze je kultivovat za stejných podmínek jako makrofágy RAW 264.7. Kromě toho je známo, že buněčná linie J774A.1 exprimuje specifické geny, včetně interleukinu-1 (IL-1) a lysozymu, a také specifické expresní markery, jako je komplement (C3) a vysokoafinitní Fc receptor, IgG (Fcgr1).

Buněčná linie J774A.1 byla použita v různých imunologických studiích a studiích infekčních onemocnění. Byla například použita ke zkoumání cytotoxicity triazolo[1,5-a]pyridiniových solí s leishmanicidní aktivitou a antitrypanosomatické aktivity flavonoidních glykosidů izolovaných z druhu Delphinium.

Celkově jsou buňky J774A.1 cenným nástrojem při studiu funkce makrofágů, syntézy cytokinů a imunitní odpovědi na různé antigeny a patogeny.

Tkáň
Retikulum
Nemoc
Sarcoma
Synonyma
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Makrofágy

04Identifikátory

Citace
J774A.1 (katalogové číslo Cytion 400220)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Imunoglobulin (Fc), komplement (C3)
Produkty
Interleukin-1 (interleukin 1, IL-1, LAF), lysozym

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Doporučuje se oddělit buňky pomocí škrabky na buňky. Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c
Věk dárce
Dospělí