Mine otse sisu juurde
J774A.1
Kude
Reticulum
Haigus
Sarkoom
Sünonüümid
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Dokumendid

J774A.1

Cell line · Toote number 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

J774A.1 rakuliin on saadud emase BALB/c/NIH-hiire astsiidi kasvajast plasmasütoomi indutseeriva ravi ajal. Need rakud on tuntud oma võime poolest teostada antikehasõltuvat fagotsütoosi, mis teeb neist kasuliku vahendi erinevate antigeenide immuunvastuste uurimiseks.

J774A.1 rakkude kasvu pärsivad erinevad ained, sealhulgas dekstraansulfaat, p-fenüleendiamiin (PPD) ja lipopolüsahhariid (LPS). J774A.1 rakud sünteesivad suures koguses lüsosüümi ja teadaolevalt sünteesivad pidevalt interleukiin-1 beeta.
J774A.1 rakkude kahekordistumisaeg on 17 tundi ja neid saab kasvatada samades tingimustes kui RAW 264.7 makrofaage. Lisaks sellele on teada, et rakuliin J774A.1 ekspresseerib spetsiifilisi geene, sealhulgas interleukiin-1 (IL-1) ja lüsosüümi, samuti spetsiifilisi ekspressioonimarkereid, nagu komplement (C3) ja kõrge afiinsusega Fc retseptor, IgG (Fcgr1).

J774A.1 rakuliini on kasutatud mitmesugustes immunoloogia ja nakkushaiguste uuringutes. Näiteks on seda kasutatud leishmanitsiidse toimega triasolo[1,5-a]püridiiniumi soolade tsütotoksilisuse ja Delphinium'i liikidest isoleeritud flavonoidglükosiidide anti-trüpanosomaatilise toime uurimiseks.

Üldiselt on J774A.1 rakud väärtuslik vahend makrofaagide funktsiooni, tsütokiinide sünteesi ja immuunvastuse uurimiseks erinevatele antigeenidele ja patogeenidele.

Kude
Reticulum
Haigus
Sarkoom
Sünonüümid
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Makrofaagid

04Tunnused

Viide
J774A.1 (Cytioni katalooginumber 400220)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Immunoglobuliin (Fc), komplement (C3)
Tooted
Interleukiin-1 (interleukiin 1, IL-1, LAF), lüsosüüm

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Soovitatav on rakkude eraldamine rakukraabitsaga. Koguda suspensioonirakud 15 ml tuubi ja pesta kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
Täiskasvanud