Μετάβαση στο περιεχόμενο
J774A.1
Ιστός
Δικτυωτό
Ασθένεια
Σάρκωμα
Συνώνυμα
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Έγγραφα

J774A.1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά J774A.1 προήλθε από τον όγκο ασκίτη ενός θηλυκού ποντικού BALB/c/NIH κατά τη διάρκεια θεραπείας που προκάλεσε πλασματοκυττάρωση. Τα κύτταρα είναι γνωστά για την ικανότητά τους να εκτελούν φαγοκυττάρωση εξαρτώμενη από αντισώματα, γεγονός που τα καθιστά χρήσιμο εργαλείο για τη διερεύνηση των ανοσολογικών αποκρίσεων σε διάφορα αντιγόνα.

Η ανάπτυξη των κυττάρων J774A.1 αναστέλλεται από διάφορες ουσίες, συμπεριλαμβανομένης της θειικής δεξτράνης, της p-φαινυλενοδιαμίνης (PPD) και του λιποπολυσακχαρίτη (LPS). Τα κύτταρα J774A.1 συνθέτουν μεγάλες ποσότητες λυσοζύμης και είναι γνωστό ότι συνθέτουν συνεχώς ιντερλευκίνη-1 βήτα.
Τα κύτταρα J774A.1 έχουν χρόνο διπλασιασμού 17 ώρες και μπορούν να καλλιεργηθούν υπό τις ίδιες συνθήκες με τα μακροφάγα RAW 264.7. Επιπλέον, η κυτταρική σειρά J774A.1 είναι γνωστό ότι εκφράζει συγκεκριμένα γονίδια, συμπεριλαμβανομένων της ιντερλευκίνης-1 (IL-1) και της λυσοζύμης, καθώς και ειδικούς δείκτες έκφρασης, όπως το συμπλήρωμα (C3) και ο υποδοχέας υψηλής συγγένειας Fc, IgG (Fcgr1).

Η κυτταρική σειρά J774A.1 έχει χρησιμοποιηθεί σε διάφορες μελέτες ανοσολογίας και μολυσματικών ασθενειών. Για παράδειγμα, έχει χρησιμοποιηθεί για τη διερεύνηση της κυτταροτοξικότητας αλάτων τριαζολο[1,5-a]πυριδινίου με λεϊσμανιοκτόνο δράση και της αντιθρυπανοσωματικής δράσης φλαβονοειδών γλυκοζιτών που απομονώνονται από είδη Delphinium.

Συνολικά, τα κύτταρα J774A.1 αποτελούν πολύτιμο εργαλείο για τη μελέτη της λειτουργίας των μακροφάγων, της σύνθεσης κυτταροκινών και της ανοσολογικής απόκρισης σε διάφορα αντιγόνα και παθογόνα.

Ιστός
Δικτυωτό
Ασθένεια
Σάρκωμα
Συνώνυμα
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Τύπος κυττάρου
Μακροφάγα

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
J774A.1 (αριθμός καταλόγου Cytion 400220)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0358

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Ανοσοσφαιρίνη (Fc), συμπλήρωμα (C3)
Προϊόντα
Ιντερλευκίνη-1 (ιντερλευκίνη 1, IL-1, LAF), λυσοζύμη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Συνιστάται η αποκόλληση των κυττάρων με κυτταροξεσχιστήρα. Συγκεντρώστε τα εναιωρούμενα κύτταρα σε ένα σωληνάριο των 15 ml και πλύνετε απαλά τα προσκολλημένα κύτταρα με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (χρησιμοποιήστε 3-5 ml για φιάλες T25 και 5-10 ml για φιάλες T75). Εφαρμόστε Accutase (1-2 ml για φιάλες T25, 2,5 ml για φιάλες T75) εξασφαλίζοντας πλήρη κάλυψη της κυτταρικής στιβάδας. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 10 λεπτά. Μετά την επώαση, συνδυάστε και φυγοκεντρίστε τόσο το εναιώρημα όσο και τα προσκολλημένα κύτταρα. Μετά τη φυγοκέντρηση, ανασυγκεντρώστε προσεκτικά το κυτταρικό σφαιρίδιο και μεταφέρετε το εναιώρημα κυττάρων σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c
Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων