الانتقال إلى المحتوى
J774A.1
الأنسجة
الشبكية
المرض
الساركوما
المرادفات
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

المستندات

J774A.1

Cell line · رقم المنتج 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تم اشتقاق سلالة الخلايا J774A.1 من الورم الاستسحاقي لأنثى فأر BALB/C/NIH أثناء العلاج المحفز للبلازما. وتُعرف هذه الخلايا بقدرتها على القيام بالبلعمة المعتمدة على الأجسام المضادة، مما يجعلها أداة مفيدة لدراسة الاستجابات المناعية لمختلف المستضدات.

يتم تثبيط نمو خلايا J774A.1 بواسطة مواد مختلفة، بما في ذلك كبريتات الديكستران وكبريتات الفينيلينديامين (PPD) وعديد السكاريد الشحمي (LPS). تقوم خلايا J774A.1 بتخليق كميات كبيرة من الليزوزيم ومن المعروف أنها تقوم بتخليق الإنترلوكين 1 بيتا باستمرار.
تبلغ مدة تضاعف خلايا J774A.1 17 ساعة ويمكن زراعتها في نفس ظروف الخلايا الضامة RAW 264.7. وبالإضافة إلى ذلك، من المعروف أن خط الخلايا J774A.1 يعبر عن جينات محددة، بما في ذلك الإنترلوكين-1 (IL-1) والليزوزيم، بالإضافة إلى علامات تعبيرية محددة، مثل المكمل (C3) ومستقبلات Fc عالية التقارب، IgG (Fcgr1).

تم استخدام خط الخلايا J774A.1 في العديد من دراسات علم المناعة والأمراض المعدية. فعلى سبيل المثال، استُخدم هذا الخط في دراسة السمية الخلوية لأملاح التريازولو[1،5-أ] البيريدينيوم ذات النشاط المبيد لليشمانيوم والنشاط المضاد للريبانوزوماتيك لمركبات جليكوسيدات الفلافونويد المعزولة من أنواع الدلفينيوم.

بشكل عام، تُعد خلايا J774A.1 أداة قيّمة في دراسة وظيفة البلاعم، وتخليق السيتوكينات، والاستجابة المناعية لمختلف المستضدات ومسببات الأمراض.

الأنسجة
الشبكية
المرض
الساركوما
المرادفات
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

نوع الخلية
البلاعم

04المعرّفات

المرجع
J774A.1 (كتالوج سيتيون رقم 400220)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0358

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
الغلوبولين المناعي (Fc)، المكمل (C3)
المنتجات
إنترلوكين-1 (إنترلوكين 1، IL-1، LAF)، الليزوزيم

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
يوصى بفصل الخلايا عن طريق مكشطة الخلايا. اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج
عمر المتبرع
للبالغين