Pāriet uz saturu
J774A.1
Audums
Retikuls
Slimība
Sarkoma
Sinonīmi
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Dokumenti

J774A.1

Cell line · Preces numurs 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

J774A.1 šūnu līnija tika iegūta no BALB/c/NIH peļu mātītes ascīta audzēja plazmacitomas izraisošas ārstēšanas laikā. Šīm šūnām piemīt spēja veikt no antivielām atkarīgu fagocitozi, padarot tās par noderīgu instrumentu, lai pētītu imūnās atbildes reakcijas uz dažādiem antigēniem.

J774A.1 šūnu augšanu kavē dažādas vielas, tostarp dekstrāna sulfāts, p-fenilēndiamīns (PPD) un lipopolisaharīds (LPS). J774A.1 šūnas sintezē lielu daudzumu lizocīma un ir zināms, ka tās nepārtraukti sintezē interleikīnu-1 beta.
J774A.1 šūnu dubultošanās laiks ir 17 stundas, un tās var kultivēt tādos pašos apstākļos kā RAW 264.7 makrofāgus. Turklāt ir zināms, ka J774A.1 šūnu līnija ekspresē specifiskus gēnus, tostarp interleikīnu-1 (IL-1) un lizocīmu, kā arī specifiskus ekspresijas marķierus, piemēram, komplementa (C3) un augstas afinitātes Fc receptoru IgG (Fcgr1).

J774A.1 šūnu līnija ir izmantota dažādos imunoloģijas un infekcijas slimību pētījumos. Piemēram, to izmantoja, lai pētītu triazolo[1,5-a]piridīnija sāļu citotoksicitāti ar leišmanicīdu aktivitāti un no Delphinium sugas izdalītu flavonoīdu glikozīdu antitrypanosomatisko aktivitāti.

Kopumā J774A.1 šūnas ir vērtīgs instruments makrofāgu funkcijas, citokīnu sintēzes un imūnās atbildes reakcijas uz dažādiem antigēniem un patogēniem pētīšanai.

Audums
Retikuls
Slimība
Sarkoma
Sinonīmi
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Makrofāgi

04Identifikatori

Atsauce
J774A.1 (Cytion kataloga numurs 400220)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Imunoglobulīns (Fc), komplements (C3)
Produkti
Interleikīns-1 (interleikīns 1, IL-1, LAF), lizocīms

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Ieteicams atdalīt šūnas, izmantojot šūnu skrāpi. Savākt suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un viegli izmazgāt pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmantot 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c
Donora vecums
Pieaugušo