Tartalomra ugrás
J774A.1
Szövet
Reticulum
Betegség
Szarkóma
Szinonimák
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Dokumentumok

J774A.1

Cell line · Termékszám 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A J774A.1 sejtvonalat egy nőstény BALB/c/NIH egér ascites tumorából nyerték plazmacitoma indukáló kezelés során. A sejtek arról ismertek, hogy képesek antitest-függő fagocitózisra, így hasznos eszközként szolgálnak a különböző antigénekre adott immunválaszok vizsgálatához.

A J774A.1 sejtek növekedését különböző anyagok, többek között dextránsulfát, p-feniléndiamin (PPD) és lipopoliszacharid (LPS) gátolják. A J774A.1 sejtek nagy mennyiségű lizozimot szintetizálnak, és ismert, hogy folyamatosan interleukin-1 béta-t szintetizálnak.
A J774A.1 sejtek megduplázódási ideje 17 óra, és a RAW 264.7 makrofágokkal azonos körülmények között tenyészthetők. Ezenkívül a J774A.1 sejtvonalról ismert, hogy specifikus géneket expresszál, beleértve az interleukin-1 (IL-1) és a lizozimot, valamint specifikus expressziós markereket, mint a komplement (C3) és a nagy affinitású Fc-receptor, IgG (Fcgr1).

A J774A.1 sejtvonalat különböző immunológiai és fertőző betegségekkel kapcsolatos vizsgálatokban használták. Például a leishmanicid hatású triazolo[1,5-a]piridinium sók citotoxicitásának és a Delphinium fajokból izolált flavonoid glikozidok antitrypanoszomatikus hatásának vizsgálatára használták.

Összességében a J774A.1 sejtek értékes eszközt jelentenek a makrofágok működésének, a citokinszintézisnek, valamint a különböző antigénekre és kórokozókra adott immunválasznak a tanulmányozásában.

Szövet
Reticulum
Betegség
Szarkóma
Szinonimák
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Makrofágok

04Azonosítók

Hivatkozás
J774A.1 (Cytion katalógusszám 400220)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Immunglobulin (Fc), komplement (C3)
Termékek
Interleukin-1 (interleukin-1, IL-1, LAF), lizozim

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
A sejtek leválasztása sejtkaparóval ajánlott. Gyűjtsük össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossuk át a megtapadt sejteket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjunk). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
Felnőtt