Премини към съдържанието
J774A.1
Тъкан
Ретикулум
Заболяване
Сарком
Синоними
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Документи

J774A.1

Cell line · Номер на продукта 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия J774A.1 е получена от тумор на асцит на женска BALB/c/NIH мишка по време на лечение, предизвикващо плазмоцитом. Клетките са известни със способността си да извършват антитяло-зависима фагоцитоза, което ги прави полезен инструмент за изследване на имунните реакции към различни антигени.

Растежът на клетките J774A.1 се инхибира от различни вещества, включително декстран сулфат, p-фенилендиамин (PPD) и липополизахарид (LPS). Клетките J774A.1 синтезират големи количества лизозим и е известно, че непрекъснато синтезират интерлевкин-1 бета.
Клетките J774A.1 имат време за удвояване от 17 часа и могат да бъдат култивирани при същите условия като макрофагите RAW 264.7. Освен това е известно, че клетъчната линия J774A.1 експресира специфични гени, включително интерлевкин-1 (IL-1) и лизозим, както и специфични маркери за експресия, като комплемент (C3) и високоафинитетен Fc рецептор, IgG (Fcgr1).

Клетъчната линия J774A.1 е използвана в различни изследвания в областта на имунологията и инфекциозните заболявания. Например, тя е използвана за изследване на цитотоксичността на триазоло[1,5-а]пиридиниеви соли с лайшманицидна активност и антитрипаносоматичната активност на флавоноидни гликозиди, изолирани от вида Delphinium.

Като цяло клетките J774A.1 са ценен инструмент за изучаване на макрофагиалната функция, синтеза на цитокини и имунния отговор към различни антигени и патогени.

Тъкан
Ретикулум
Заболяване
Сарком
Синоними
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Тип клетка
Макрофаги

04Идентификатори

Източник
J774A.1 (каталожен номер 400220 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_0358

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Имуноглобулин (Fc), комплемент (C3)
Продукти
Интерлевкин-1 (интерлевкин 1, IL-1, LAF), лизозим

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Препоръчва се отделяне на клетките чрез клетъчна стъргалка. Съберете суспендираните клетки в епруветка от 15 ml и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
BALB/c
Възраст на донора
Възрастни