Gå til innholdet
J774A.1
Vev
Retikulum
Sykdom
Sarkom
Synonymer
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Dokumenter

J774A.1

Cell line · Produktnummer 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

J774A.1-cellelinjen ble avledet fra ascites-svulsten til en BALB/c/NIH-hunnmus under plasmacytominduserende behandling. Cellene er kjent for sin evne til å utføre antistoffavhengig fagocytose, noe som gjør dem til et nyttig verktøy for å undersøke immunresponser mot ulike antigener.

Veksten av J774A.1-celler hemmes av ulike stoffer, blant annet dekstransulfat, p-fenylendiamin (PPD) og lipopolysakkarid (LPS). J774A.1-celler syntetiserer store mengder lysozym og er kjent for å syntetisere interleukin-1 beta kontinuerlig.
J774A.1-celler har en fordoblingstid på 17 timer og kan dyrkes under de samme forholdene som RAW 264.7-makrofager. I tillegg er J774A.1-cellelinjen kjent for å uttrykke spesifikke gener, inkludert interleukin-1 (IL-1) og lysozym, samt spesifikke ekspresjonsmarkører, som komplement (C3) og høyaffinitets Fc-reseptor, IgG (Fcgr1).

J774A.1-cellelinjen har blitt brukt i en rekke studier innen immunologi og infeksjonssykdommer. Den har for eksempel blitt brukt til å undersøke cytotoksisiteten til triazolo[1,5-a]pyridiniumsalter med leishmanicid aktivitet og den antitrypanosomatiske aktiviteten til flavonoidglykosider isolert fra Delphinium-arter.

Samlet sett er J774A.1-celler et verdifullt verktøy for å studere makrofagfunksjon, cytokinsyntese og immunresponsen mot ulike antigener og patogener.

Vev
Retikulum
Sykdom
Sarkom
Synonymer
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Makrofag

04Identifikatorer

Kildehenvisning
J774A.1 (Cytion-katalognummer 400220)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Immunglobulin (Fc), komplement (C3)
Produkter
Interleukin-1 (interleukin 1, IL-1, LAF), lysozym

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Det anbefales å løsne cellene med en celleskrape. Samle suspensjonscellene i et 15 ml rør, og vask de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (bruk 3-5 ml for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml for T25-kolber, 2,5 ml for T75-kolber) og sørg for full dekning av cellelaget. La cellene inkubere i romtemperatur i 10 minutter. Etter inkubasjon kombineres og sentrifugeres både suspensjonen og de adherente cellene. Etter sentrifugering resuspenderes cellepelleten forsiktig, og cellesuspensjonen overføres til nye kolber som inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
BALB/c
Donorens alder
Voksen