Przejdź do treści
J774A.1
Chusteczka
Siatkówka
Choroba
Mięsak
Synonimy
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Dokumenty

J774A.1

Cell line · Numer produktu 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa J774A.1 została uzyskana z guza wodobrzusza samicy myszy BALB/c/NIH podczas leczenia indukującego plazmocytomę. Komórki te są znane ze swojej zdolności do fagocytozy zależnej od przeciwciał, co czyni je pomocnym narzędziem do badania odpowiedzi immunologicznej na różne antygeny.

Wzrost komórek J774A.1 jest hamowany przez różne substancje, w tym siarczan dekstranu, p-fenylenodiaminę (PPD) i lipopolisacharyd (LPS). Komórki J774A.1 syntetyzują duże ilości lizozymu i są znane z ciągłej syntezy interleukiny-1 beta.
Komórki J774A.1 mają czas podwojenia wynoszący 17 godzin i mogą być hodowane w takich samych warunkach jak makrofagi RAW 264.7. Dodatkowo, linia komórkowa J774A.1 wykazuje ekspresję specyficznych genów, w tym interleukiny-1 (IL-1) i lizozymu, a także specyficznych markerów ekspresji, takich jak dopełniacz (C3) i receptor Fc IgG o wysokim powinowactwie (Fcgr1).

Linia komórkowa J774A.1 była wykorzystywana w różnych badaniach z zakresu immunologii i chorób zakaźnych. Na przykład, została ona wykorzystana do zbadania cytotoksyczności soli triazolo[1,5-a]pirydyniowych z aktywnością leiszmaniobójczą oraz aktywności antytrypanosomatycznej glikozydów flawonoidowych wyizolowanych z gatunku Delphinium.

Ogólnie rzecz biorąc, komórki J774A.1 są cennym narzędziem w badaniu funkcji makrofagów, syntezy cytokin i odpowiedzi immunologicznej na różne antygeny i patogeny.

Chusteczka
Siatkówka
Choroba
Mięsak
Synonimy
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Makrofag

04Identyfikatory

Źródło
J774A.1 (numer katalogowy Cytion 400220)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Immunoglobulina (Fc), dopełniacz (C3)
Produkty
Interleukina-1 (interleukina 1, IL-1, LAF), lizozym

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Zaleca się oderwanie komórek za pomocą skrobaka. Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c
Wiek dawcy
Dorosły