Ga naar de inhoud
J774A.1
Weefsel
Netmaag
Ziekte
Sarcoom
Synoniemen
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Documenten

J774A.1

Cell line · Productnummer 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De J774A.1 cellijn werd afgeleid van de ascites tumor van een vrouwelijke BALB/c/NIH muis tijdens een plasmacytoma-inducerende behandeling. De cellen staan bekend om hun vermogen om antilichaamafhankelijke fagocytose uit te voeren, waardoor ze een nuttig hulpmiddel zijn voor het onderzoeken van immuunreacties op verschillende antigenen.

De groei van J774A.1 cellen wordt geremd door verschillende stoffen, waaronder dextraansulfaat, p-fenyleendiamine (PPD) en lipopolysaccharide (LPS). J774A.1 cellen synthetiseren grote hoeveelheden lysozym en staan erom bekend dat ze continu interleukine-1 bèta synthetiseren.
J774A.1 cellen hebben een verdubbelingstijd van 17 uur en kunnen onder dezelfde omstandigheden worden gekweekt als RAW 264.7 macrofagen. Bovendien is van de J774A.1 cellijn bekend dat deze specifieke genen tot expressie brengt, waaronder interleukine-1 (IL-1) en lysozym, evenals specifieke expressiemarkers, zoals complement (C3) en hoogaffiniteit Fc receptor, IgG (Fcgr1).

De J774A.1 cellijn is gebruikt in verschillende immunologische en infectieziektestudies. De lijn is bijvoorbeeld gebruikt om de cytotoxiciteit van triazolo[1,5-a]pyridiniumzouten met leishmanicide activiteit en de antitrypanosomatische activiteit van flavonoïde glycosiden geïsoleerd uit Delphinium soorten te onderzoeken.

Over het algemeen zijn J774A.1 cellen een waardevol hulpmiddel bij het bestuderen van macrofaagfunctie, cytokinesynthese en de immuunrespons op verschillende antigenen en ziekteverwekkers.

Weefsel
Netmaag
Ziekte
Sarcoom
Synoniemen
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Macrofaag

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
J774A.1 (Cytion catalogusnummer 400220)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Immunoglobuline (Fc), complement (C3)
Producten
Interleukine-1 (interleukine 1, IL-1, LAF), lysozym

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Het wordt aanbevolen om de cellen los te maken met een celschraper. Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen combineren en centrifugeren. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
Volwassen